MALDI-TOF MSを使用したカルバペネマーゼ産生菌検出法の確立

• Project/Area Number: 15H00617
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: 臨床医学
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 児矢野 早穂 東京大学, 医学部附属病院, 臨床検査技師
• Project Period (FY): 2015
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2015)
• Budget Amount: ¥400,000 (Direct Cost: ¥400,000); Fiscal Year 2015: ¥400,000 (Direct Cost: ¥400,000)
• Keywords: MALDI-TOF MS / カルバペネマーゼ / IMP-1型メタロβ-ラクタマーゼ

Outline of Annual Research Achievements

【目的】カルバペネム系抗菌薬は、広い抗菌スペクトルと強力な抗菌作用により、重症感染症の治療に有効な抗菌薬として広く使用されているが、近年、カルバペネム系抗菌薬耐性腸内細菌科細菌による感染症が拡大し、世界中で問題となっている。本研究では、MALDI-TOF MSを使用したカルバペネマーゼ産生腸内細菌科細菌の検出方法を検討し、日常検査における検査手順の確立することを目的とした。
【方法】2009年4月から2012年3月に当院で臨床分離されたメタロβ-ラクタマーゼ(IMP-1)産生腸内細菌科細菌20株、KPC型カルバペネマーゼ産生標準菌株1株、およびNDM-1型メタロβ-ラクタマーゼ産生標準菌株1株を対象とした。菌の抽出およびMALDI Biotyper (BRUKER社)による解析は、Hrabakらの方法を用い、メロペネム分解時のピークの出現および消失を確認した。陰性対照には、カルバペネマーゼ非産生株であるEnterobacter cloacaeの標準菌株1株、K. pneumoniaeの標準菌株1株および臨床分離株2株を使用した。
【結果】Hrabakらの方法を用いて解析を行った結果、カルバペネマーゼ陽性一致率は18/22株(81.8%)であり、陰性一致率は4/4株(100%)であった。判定が一致しなかったカルバペネマーゼ陽性株4株はいずれも、メロペネム分解時に消失する406.5Daのピークが認められた。それ以外のピークの出現および消失は、すべて一致していた。
【結語】今回検討した株において、一部の菌株を除き、MALDI-TOF MSを使用してカルバペネマーゼ産生の有無を判定することが可能であった。今後は、OXA型カルバペネマーゼ産生菌、カルバペネマーゼ産生ブドウ糖非発酵菌についても検討し、日常検査への導入を目指す予定である。