インフルエンザウイルス感染におけるレセプターとしてのシアル酸糖蛋白質の機能解析
| Project/Area Number |
15J00209
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| Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 国内 |
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| Research Field |
Veterinary medical science
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
日尾野 隆大 北海道大学, 獣医学研究科, 特別研究員(DC2)
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| Project Period (FY) |
2015-04-24 – 2016-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2015)
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| Budget Amount *help |
¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 2015: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
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| Keywords | インフルエンザウイルス / レセプター特異性 / シアル酸 / フコシル化 / エンドサイトーシス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
バイオインフォマティクスの手法を用いて、ニワトリから分離されたH5亜型鳥インフルエンザウイルスのヘマグルチニン (HA)とニワトリ型レセプターであるフコシル化α2,3シアロ糖の結合を予測した。その結果、フコシル化α2,3シアロ糖のフコース基はH5HA分子の222および227位のアミノ酸と相互作用することが予測された。
カモから分離されたA/duck/Mongolia/54/2001 (H5N2) (Dk/MNG)株およびニワトリから分離されたA/chicken/Ibaraki/1/2005 (H5N2) (Ck/IBR)株の組換えHAを作出し、その糖鎖結合特異性をGlycan microarray法で評価した。その結果、Dk/MNG株のHAはフコシル化のないα2,3シアロ糖と、Ck/IBRのHAはフコシル化α2,3シアロ糖とそれぞれ特異的に結合することが分かった。さらに、これらの糖鎖結合特異性が、HAの222位および227位のアミノ酸モチーフによって規定されていることを明らかにした。一方で、Dk/MNG株の粒子はフコシル化α2,3シアロ糖とフコシル化のないα2,3シアロ糖の両方と結合した。この結果はフコシル化のないα2,3シアロ糖とのみ結合した組換えHAの成績と異なっていた。そこでノイラミニダーゼ(NA)阻害剤の存在下で同様の試験を行ったところ、Dk/MNG株の粒子はフコシル化のないα2,3シアロ糖のみと特異的に結合した。すなわち、Dk/MNG株の粒子はNAを介してフコシル化α2,3シアロ糖を認識していると考えられる。
また、インフルエンザウイルスが細胞内に侵入する際に利用する宿主のエンドサイトーシス経路を明らかにするために、クラスリン依存性エンドサイトーシスのアダプター蛋白質であるEPN1およびAP2M1のノックダウンを試みた。当初、shRNA発現ベクターを用いたノックダウンを計画していたが、RNA干渉の効果を得ることができなかった。そこで合成siRNAを用いてノックダウンを試みたところ、EPN1およびAP2M1共に概ね70%以上のノックダウンに成功した。
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| Research Progress Status |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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Report
(1 results)
Research Products
(8 results)
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[Journal Article] Experimental infection of highly and low pathogenic avian influenza viruses to chickens, ducks, tree sparrows, jungle crows, and black rats for the evaluation of their roles in virus transmission2016
Author(s)
Hiono T, Okamatsu M, Yamamoto N, Ogasawara K, Endo M, Kuribayashi S, Shichinohe S, Motohashi Y, Chu DH, Suzuki M, Ichikawa T, Nishi T, Abe Y, Matsuno K, Tanaka K, Tanigawa T, Kida H, Sakoda Y.
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Journal Title
Vet Microbiol
Volume: 182
Pages: 108-115
DOI
Related Report
Peer Reviewed
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[Journal Article] Genetic and antigenic characterization of H5 and H7 influenza viruses isolated from migratory water birds in Hokkaido, Japan and Mongolia from 2010 to 20142015
Author(s)
Hiono T, Ohkawara A, Ogasawara K, Okamatsu M, Tamura T, Chu DH, Suzuki M, Kuribayashi S, Shichinohe S, Takada A, Ogawa H, Yoshida R, Miyamoto H, Nao N, Furuyama W, Maruyama J, Eguchi N, Ulziibat G, Enkhbold B, Shatar M, Jargalsaikhan T, Byambadorj S, Damdinjav B, Sakoda Y, Kida H.
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Journal Title
Virus Genes
Volume: 51 (1)
Issue: 1
Pages: 57-68
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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