小児急性脳症の網羅的メタボローム・マイクロＲＮＡ解析を用いたバイオマーカー探索

• Project/Area Number: 15J40217
• Research Category: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 国内
• Research Field: Pediatrics
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 鳥居 ゆか 名古屋大学, 医学系研究科, 特別研究員(RPD)
• Project Period (FY): 2015-04-24 – 2018-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2017)
• Budget Amount: ¥4,030,000 (Direct Cost: ¥3,100,000、Indirect Cost: ¥930,000); Fiscal Year 2017: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2016: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2015: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
• Keywords: 脳症 / エクソソーム / マイクロRNA / ヒトヘルペスウイルス6型 / メタボローム解析 / キノリン酸 / キヌレニン

Outline of Annual Research Achievements

HHV-6感染が証明された症例をAESD(Acute encephalopathy with biphasic seizures and late reduced diffusion)タイプの脳症と診断された症例と、痙攣重積を起こしたが、その後意識回復良好で脳症に至らなかった症例の2群にわけ、それぞれ脳脊髄液エクソソーム中のマイクロRNAの発現プロファイルの比較解析を行った。髄液よりmiRCURY exosome isolatiom kitを用いてエクソソームを分離後、miRCURY RNA Isolation Kit Cell and Plantを用いてRNA抽出を行った。抽出したRNAからNEB Next Multiplex Small RNA Library Prep Set for Illuminaを用いてマイクロRNAのライブラリを作成した。作成したライブラリをMiseqでシーケンスを行った。脳症5例、対症5例の計10サンプルの解析を行い、出力したデータからマイクロRNA発現量を標準化して(RPAM: reads per annotated reads per million)比較解析をした。結果、10症例においてのべ292種のマイクロRNAが検出された。比較解析の結果、FDR(False Discovery Rate)<0.05を満たすのはmiR-381-3pのみであった。mir-381-3pは脳症群で有意に検出された。ターゲット遺伝子予測サイト(miRanda, Target Scan, mirDB)を用いて検索したところ、mir-381-3pの標的となると予測された遺伝子にはGRM8など神経伝達に関わる遺伝子もあり、病態との関連が考えられた。今回は10症例の検討のみであったが、PCRでの解析システムを確立して、より多くの症例を解析する必要があると思われた。

Research Progress Status

29年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

29年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] Comprehensive detection of pathogens in immunocompromised children with bloodstream infections by next-generation sequencing (2018)
  • Author(s): Horiba, K. Kawada, J. Okuno, Y. Tetsuka, N. Suzuki, T. Ando, S. Kamiya, Y. Torii, Y. Yagi, T. Takahashi, Y. Ito, Y.
  • Journal Title: Sci Rep Volume: 8 Issue: 1 Pages: 3784-3784
  • DOI: 10.1038/s41598-018-22133-y
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Antitumor effects of duvelisib on Epstein-Barr virus-associated lymphoma cells (2018)
  • Author(s): Kawada, J. Ando, S. Torii, Y. Watanabe, T. Sato, Y. Ito, Y. Kimura, H.
  • Journal Title: Cancer Med Volume: 印刷中 Issue: 4 Pages: 1275-1284
  • DOI: 10.1002/cam4.1311
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Metabolome analysis reveals the association between the kynurenine pathway and human herpesvirus 6 encephalopathy in immunocompetent children (2017)
  • Author(s): Torii, Y. Kawano, Y. Sato, H. Fujimori, T. Sasaki, K. Kawada, J. Takikawa, O. Lim, C. K. Guillemin, G. J. Ohashi, Y. Ito, Y.
  • Journal Title: Metabolomics Volume: 13 Issue: 11 Pages: 126-126
  • DOI: 10.1007/s11306-017-1268-x
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Comprehensive detection of viruses in pediatric patients with acute liver failure using next-generation sequencing (2017)
  • Author(s): Suzuki, T. Kawada, J. Okuno, Y. Hayano, S. Horiba, K. Torii, Y. Takahashi, Y. Umetsu, S. Sogo, T. Inui, A. Ito, Y.
  • Journal Title: J Clin Virol Volume: 69 Pages: 67-72
  • DOI: 10.1016/j.jcv.2017.10.001
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Epstein-Barr virus infection-induced inflammasome activation in human monocytes. (2017)
  • Author(s): Torii Y, Kawada J, Murata T, Yoshiyama H, Kimura H, Ito Y
  • Journal Title: PLoS ONE Volume: 12 Issue: 4 Pages: e0175053-e0175053
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0175053
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Primary psoas abscess caused by group A streptococcus in a child: Case report with microbiologic findings (2016)
  • Author(s): Kamiya Y, Hasegawa T, Takegami Y, Horiba K, Ando S, Torii Y, Kidokoro H, Kato T, Natsume J, Kawada JI, Ito Y
  • Journal Title: J Infect Chemother Volume: 22 Issue: 12 Pages: 811-814
  • DOI: 10.1016/j.jiac.2016.06.011
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Identification of Viruses in Cases of Pediatric Acute Encephalitis and Encephalopathy Using Next-Generation Sequencing (2016)
  • Author(s): Kawada, J. Okuno, Y. Torii, Y. Okada, R. Hayano, S. Ando, S. Kamiya, Y. Kojima, S. Ito, Y.
  • Journal Title: Scientific Reports Volume: 6 Issue: 1 Pages: 33452-33452
  • DOI: 10.1038/srep33452
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Analysis of circulating human and viral microRNAs in patients with congenital cytomegalovirus infection (2016)
  • Author(s): Kawano, Y. Kawada, J. Kamiya, Y. Suzuki, M. Torii, Y. Kimura, H. Ito, Y.
  • Journal Title: Journal of perinatology Volume: 36 Issue: 12 Pages: 1101-1105
  • DOI: 10.1038/jp.2016.157
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Correlation of rabbit antithymocyte globulin serum levels and clinical outcomes in children who received hematopoietic stem cell transplantation from an alternative donor. (2016)
  • Author(s): Elmahdi S, Muramatsu H, Narita A, Torii Y, Ismael O, Kawashima N, Okuno Y, Sekiya Y, Xu Y, Wang X, Hama A, Ito Y, Takahashi Y, Kojima S.
  • Journal Title: Pediatr Transplant. Volume: 20 Issue: 1 Pages: 105-113
  • DOI: 10.1111/petr.12620
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Quantitative metabolome profiling reveals the involvement of the kynurenine pathway in influenza-associated encephalopathy (2016)
  • Author(s): Yuka Torii, Yoshihiko Kawano, Hajime Sato, Kazunori Sasaki, Tamaki Fujimori, Jun-ichi Kawada, Osamu Takikawa, Chai K Lim, Gilles J Guillemin, Yoshiaki Ohashi, and Yoshinori Ito
  • Journal Title: Metabolomics Volume: 印刷中
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Viral load in children with congenital cytomegalovirus infection identified on newborn hearing screening. Journal of clinical virology (2015)
  • Author(s): Kawada J, Torii Y, Kawano Y, Suzuki M, Kamiya Y, Kotani T, Kikkawa F, Kiimura H, Ito Y
  • Journal Title: Journal of clinical virology Volume: 65 Pages: 41-45
  • DOI: 10.1016/j.jcv.2015.01.015
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Serum microRNAs as Potential Biomarkers of Juvenile Idiopathic Arthritis (2015)
  • Author(s): Kamiya Y, Kawada J, Kawano Y, Torii Y, Kawabe S, Iwata N, Ito Y
  • Journal Title: Clinical rheumatology. Volume: 34 Issue: 10 Pages: 1705-12
  • DOI: 10.1007/s10067-015-2922-1
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Fulminant adenovirus hepatitis after hematopoietic stem cell transplant: Retrospective real-time PCR analysis for adenovirus DNA in two cases (2015)
  • Author(s): Kawashima N, Muramatsu H, Okuno Y, Torii Y, Kawada J, Narita A, Nakamura S, Takahashi Y, Ito Y, Kojima S
  • Journal Title: Journal of infection and chemotherapy Volume: 21 Issue: 12 Pages: 857-63
  • DOI: 10.1016/j.jiac.2015.08.018
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] EBV関連TおよびNKリンパ腫におけるトファシチニブの抗腫瘍効果の検討 (2017)
  • Author(s): 川田潤一、安藤将太郎、渡辺崇広、佐藤好隆、鳥居ゆか、五島典、村田貴之、清水則夫、伊藤嘉規、木村宏
  • Organizer: 第26回EBウイルス感染症研究会
  • Place of Presentation: ヤクルトホール（東京都港区）
  • Year and Date: 2017-03-19
• [Presentation] 次世代シーケンシングによる血流感染症の微生物ゲノム分布解析と臨床応用 (2017)
  • Author(s): 堀場千尋、川田潤一、手塚宜行、武内俊、鈴木高子、安藤将太郎、神谷泰子、鳥居ゆか、伊藤嘉規
  • Organizer: 第91回日本感染症学会総会
• [Presentation] 小児菌血症患者の病原菌診断における次世代シーケンサーの臨床応用 (2017)
  • Author(s): 堀場千尋、川田潤一、手塚宜行、武内俊、鈴木高子、安藤将太郎、神谷泰子、鳥居ゆか、高橋義行、伊藤嘉規
  • Organizer: 第120回日本小児科学会学術集会
• [Presentation] 次世代シーケンサーの血流感染症における病原微生物診断への可能性 (2017)
  • Author(s): 堀場千尋、川田潤一、奥野友介、手塚宜行、鈴木高子、鳥居ゆか、伊藤嘉規
  • Organizer: 第５回NGS現場の会
• [Presentation] ヒト単核細胞におけるEBウイルス感染によるインフラマソーム活性の検討 (2017)
  • Author(s): 川田潤一、鳥居ゆか、武内俊、堀場千尋、鈴木高子、村田貴之、吉山裕規、木村宏、伊藤嘉規
  • Organizer: 第31回ヘルペスウイルス研究会
• [Presentation] Inflammasome-mediated IL-1β production by Human Monocyte with primary EBV infection. (2017)
  • Author(s): Jun-ichi Kawada, Yuka Torii, Takayuki Murata, Hironori Yoshiyama, Hiroshi Kimura, Yoshihiro Ito
  • Organizer: IHW2017
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 次世代シーケンサーの小児血流感染症における病原微生物診断への臨床応用 (2017)
  • Author(s): 堀場千尋、川田潤一、奥野友介、手塚宜行、武内俊、鈴木高子、鳥居ゆか、伊藤嘉規
  • Organizer: 第11回日本ゲノム微生物学会若手の会
• [Presentation] Comprehensive Detection of Pathogens in Immunocompromised Children with Bloodstream Infections by Next-generation Sequencing. (2017)
  • Author(s): Kazuhiro Horiba, Jun-ichi Kawada Yusuke Okuno, Nobuyuki Tetsuka, Takako Suzuki, Shotaro Ando, Yasuko Kamiya, Yuka Torii, Tetsuya Yagi, Yoshiyuki Takahashi, Yoshinori Ito
  • Organizer: IDSA 2017
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] CMV既感染が疑われた母体から出生した症候性先天性CMV感染症の2症例 (2017)
  • Author(s): 館明日香、小谷友美、飯谷友佳子、水谷輝之、丹羽優莉、牛田貴文、今井健史、中野知子、津田弘之、田中亮、鳥居ゆか、伊藤嘉規、吉川史隆
  • Organizer: 第106回愛知産科婦人科学会学術講演会
• [Presentation] 症候性先天性サイトメガロウイルス感染症中央診断の運用状況と課題 (2017)
  • Author(s): 伊藤嘉規、鳥居ゆか、森岡一朗、古谷野伸、吉川哲史、森内浩幸、藤井知行、岡明、木村宏
  • Organizer: 第49回日本小児感染症学会
• [Presentation] 次世代シーケンサーによる小児急性肝不全・重症急性肝炎症例からの病原ウイルス検索 (2017)
  • Author(s): 鈴木高子、川田潤一、堀場千尋、梅津守一郎、十河剛、奥村俊彦、武内俊、鳥居ゆか、乾あやの、伊藤嘉規
  • Organizer: 第49回日本小児感染症学会
• [Presentation] Risk Factors for Viral Infections in Pediatric Patients Undergoing Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation. (2017)
  • Author(s): Atsushi Narita, Yoshinori Ito, Yuka Torii, Juinichi Kawada,, Kyogo Suzuki, Eri Nishikawa, Nozomu Kawashima, Yusuke Okuno, Hideki Muramatsu, Nobuhiro Nishio, Asahito Hama, Seiji Kojima, Yoshiyuki Takahashi et al
  • Organizer: 59th ASH Annual Meeting and Exposition
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 小児血流感染症における病原微生物診断への次世代シーケンサーの応用 (2016)
  • Author(s): 堀場千尋、川田潤一、奥野友介、手塚宜行、鈴木高子、安藤将太郎、神谷泰子、鳥居ゆか、高橋義行、伊藤嘉規
  • Organizer: 第48回日本小児感染症学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 岡山コンベンションセンター（岡山県岡山市）
  • Year and Date: 2016-11-19
• [Presentation] 小児肝移植症例への不活性化4価インフルエンザワクチン接種の検討 (2016)
  • Author(s): 鈴木高子、鳥居ゆか、鈴木道雄、神谷泰子、安藤将太郎、堀場千尋、川田潤一、伊藤嘉規
  • Organizer: 第48回日本小児感染症学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 岡山コンベンションセンター（岡山県岡山市）
  • Year and Date: 2016-11-19
• [Presentation] 生後３ヶ月でMSSAによる右前腕部蜂窩織炎・筋炎・骨髄炎を発症した１例 (2016)
  • Author(s): 安藤将太郎、神谷泰子、堀場千尋、鈴木高子、鳥居ゆか、川田潤一、伊藤嘉規
  • Organizer: 第20回東海小児感染症研究会
  • Place of Presentation: キャッスルプラザ（愛知県名古屋市）
  • Year and Date: 2016-10-29
• [Presentation] Next-generation sequencing for the identification of viruses in pediatric acute encephalaitis and encephalaopathy. (2016)
  • Author(s): Jun-ichi Kawada, Yusuke Okuno, Yuka Torii, Kazuhiro Horiba, Takako Suzuki, Shotaro Ando, Yasuko Kamiya, Yoshinori Ito
  • Organizer: IDSA
  • Place of Presentation: New Orleans (USA)
  • Year and Date: 2016-10-23
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 肝移植後小児症例における不活性化4価インフルエンザワクチン接種の経験 (2016)
  • Author(s): 鈴木高子、鳥居ゆか、鈴木道雄、神谷泰子、安藤将太郎、堀場千尋、川田潤一、伊藤嘉規
  • Organizer: 第20回日本ワクチン学会学術集会
  • Place of Presentation: 京王プラザホテル（東京都新宿区）
  • Year and Date: 2016-10-22
• [Presentation] EBV関連TおよびNKリンパ腫におけるトファシチニブの抗腫瘍効果の検討 (2016)
  • Author(s): 安藤将太郎、川田潤一、渡辺崇宏、佐藤好隆、鳥居ゆか、五島典、清水則夫、村田貴之、伊藤嘉規、木村宏
  • Organizer: 第30回ヘルペスウイルス研究会
  • Place of Presentation: クロス・ウェーブ府中（東京都府中市）
  • Year and Date: 2016-06-16
• [Presentation] 次世代シーケンサーを用いた急性脳炎・脳症の病原ウイルスの検出 (2016)
  • Author(s): 川田潤一、鳥居ゆか、安藤将太郎、鈴木高子、神谷泰子、小島勢二、伊藤嘉規
  • Organizer: 第119回日本小児科学会学術集会
  • Place of Presentation: ロイトン札幌（北海道札幌市）
  • Year and Date: 2016-05-13
• [Presentation] 先天性サイトメガロウイルス感染症に対するバルガンシクロビル治療効果の検討 (2016)
  • Author(s): 鳥居ゆか
  • Organizer: 第47回東海抗菌化学療法研究会
  • Place of Presentation: 名鉄ニューグランドホテル（愛知県名古屋市）
  • Year and Date: 2016-03-12
• [Presentation] EBV関連腫瘍におけるトファシチニブの抗腫瘍効果の検討 (2015)
  • Author(s): 安藤将太郎、川田潤一、鈴木道雄、渡辺崇広、鳥居ゆか、吉山裕規、清水則夫、木村宏、伊藤嘉規
  • Organizer: 第63回日本ウイルス学会学術集会
  • Place of Presentation: 福岡国際会議場（福岡県福岡市）
  • Year and Date: 2015-11-22
• [Presentation] 過去9シーズンの肝移植後小児例に対するインフルエンザワクチン接種経験 (2015)
  • Author(s): 鈴木道雄、鳥居ゆか、鈴木高子、安藤将太郎、神谷泰子、川田潤一、木村宏、伊藤嘉規
  • Organizer: 第19回日本ワクチン学会
  • Place of Presentation: 名鉄犬山ホテル（愛知県犬山市）
  • Year and Date: 2015-11-14
• [Presentation] 次世代シーケンサーを用いた急性脳炎・脳症患者からの網羅的ウイルス検出の試み (2015)
  • Author(s): 川田潤一、鳥居ゆか、堀場千尋、安藤将太郎、鈴木高子、神谷泰子、伊藤嘉規
  • Organizer: 第47回日本小児感染症学会
  • Place of Presentation: ホテル福島グリーンパレス（福島県福島市）
  • Year and Date: 2015-10-31
• [Presentation] Antitumor activity of Tofacitinib on Epstein-Barr virus-associated lymphoma cells. (2015)
  • Author(s): Shotaro Ando, Jun-ichi Kawada, Michio Suzuki, Takahiro Watanabe, Yuka Torii, Takayuki Murata, Hiroshi Kimura, Yoshinori Ito
  • Organizer: 40th Annual International Hepesvirus Workshop
  • Place of Presentation: Boise, USA
  • Year and Date: 2015-07-25
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] EBV infection of human monocytes induces AIM2 inflammasome activation. (2015)
  • Author(s): Jun-ichi Kawada, Yuka Torii, Michio Suzuki, Takayuki Murata, Hironori Yoshiyama, Hiroshi Kimura, Yoshinori Ito.
  • Organizer: 40th Annual International Hepesvirus Workshop
  • Place of Presentation: Boise, USA
  • Year and Date: 2015-07-25
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] EBウイルス初感染時のヒト単球細胞におけるインフラマソーム活性 (2015)
  • Author(s): 鳥居ゆか、安藤将太郎、神谷泰子、川田潤一、村田貴之、吉山裕規、木村宏、伊藤嘉規
  • Organizer: 第29回ヘルペス研究会
  • Place of Presentation: 長崎にっしょうかん（長崎県長崎市）
  • Year and Date: 2015-06-05
• [Presentation] EBV関連腫瘍におけるJAK3阻害薬の抗腫瘍効果の検討 (2015)
  • Author(s): 安藤将太郎、川田潤一、鈴木道雄、渡辺崇広、鳥居ゆか、村田貴之、木村宏、伊藤嘉規
  • Organizer: 第29回ヘルペス研究会
  • Place of Presentation: 長崎にっしょうかん（長崎県長崎市）
  • Year and Date: 2015-06-05