マボヤ卵内遺伝情報の網羅的解析による比較ゲノムのための物理遺伝地図の作成

Research Project

Project/Area Number	16011242
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Review Section	Biological Sciences
Research Institution	The University of Tokushima
Principal Investigator	真壁和裕徳島大学, 総合科学部, 助教授 (60222288)
Project Period (FY)	2004
Project Status	Completed (Fiscal Year 2004)
Budget Amount *help	¥6,500,000 (Direct Cost: ¥6,500,000) Fiscal Year 2004: ¥6,500,000 (Direct Cost: ¥6,500,000)
Keywords	ホヤ / 母性因子 / RNA / ゲノム / BAC / EST
Research Abstract	脊索動物であるにも関わらずゲノムの重複のないホヤは脊椎動物のゲノムの機能研究の優れたモデル生物だと考えられる。本研究では、実験発生学的知見の最も多いマボヤの母性cDNAの塩基配列及び初期発生過程での発現パターンの解析を行いつつ、その結果を利用してゲノム上に遺伝子をマッピングしていくことでマボヤゲノム全体を俯瞰し、カタユウレイボヤのゲノム構造や発現パターンなどとの比較を可能にすることを目的とする。マボヤ受精卵cDNAのアレイドライブラリーの両側約500bpずつの塩基配列を決定し、約2万5千クローンの塩基配列の解析によって8千以上の遺伝子が数えられた。ホヤゲノム中には16,000程度の遺伝子がコードされていると推定され、卵内にはその半数弱の遺伝子が発現していると推測されるので、当初の目的の成果を挙げたことになる。発現パターンの解析についても、独自に開発した多検体同時処理可能なWMISH法を駆使して、約4,000クローンの発現プロファィルを収集した。その結果、大多数のものは胚全体に分布するものの,胚前方に隔離されるRNA、主に表皮に分化する動物半球に隔離されていくRNA、動物半球でも前側の細胞だけに局在するRNAや、筋肉や前後軸の形成に関する決定因子のある胚の後極に局在する多数のRNA、逆に後極を含む植物極側後方の細胞以外の細胞に受け継がれていくRNAなどがそれぞれ多数あることが見出された。そこで今年度は原腸胚のEST解析を新たに立ち上げ、胚性に発現してくる遺伝子について解析を開始した。さらにマボヤ単個体の精子DNA由来のBACライブラリー(20ゲノムイクイバレントカバレージ)を3Dプール化したものを用いて、上述のクローンの配列によるマッピングをしつつある。