| Project/Area Number |
16590937
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 一般 |
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| Research Field |
Hematology
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
菅原 浩之 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (40362701)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
金倉 譲 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (20177489)
松村 到 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (00294083)
水木 満佐央 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (80283761)
柴山 浩彦 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (60346202)
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| Project Period (FY) |
2004
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2004)
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| Budget Amount *help |
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 2004: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
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| Keywords | 造血幹細胞 / 細胞周期 / 自己複製 / c-myc / Notch / HOXB4 |
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| Research Abstract |
従来よりNotchやHOXB4が造血幹細胞に自己複製をもたらすことが報告されてきた。本研究では、この際の細胞周期制御分子の発現を解析した。具体的には4-hydroxytamoxifen(4-HT)によってNotchの活性が誘導できるNotchと変異型エストロゲン受容体のキメラ分子Notch/ERT及びホメオボックス転写因子群の一つであるHOXB4遺伝子をc-Kit+Lin-Sca-1+の造血幹/前駆細胞に導入し、自己複製を誘導した際の細胞周期制御分子の発現を半定量的RT-PCR法により解析した。その結果、4-HT処理によりNotchの活性を誘導した場合、c-myc、E2F1、サイクリンEの発現が強く誘導されることが明らかとなった。同様に、HOXB4を導入した造血幹細胞においても、c-myc、E2F1の発現の著明な増強が認められた。これらの結果から、Notch、HOXB4による造血幹細胞の自己複製にはc-mycとE2F1の発現誘導が関与している可能性が考えられた。
4-HTによってc-Myc活性が誘導できるc-Mycと変異型エストロゲン受容体のキメラ分子(Myc/ERT)をマウスLin-Sca-1+細胞に導入すると、Myc/ERT導入細胞は、4-HT添加によって表面マーカー上未分化性を保持したまま28日以上増殖を続けた。また、4-HT処理したMyc/ERT導入細胞ではコロニー形成能の上昇とテロメレース活性の上昇が認められた。移植実験では、c-Mycにより増幅した造血幹細胞は6ヶ月以上にわたり造血に貢献した。
c-mycのプロモーター解析では、Notchの下流で働くRBP-Jがc-mycプロモーター内の35bpの領域を活性化した。
以上の結果よりc-MycはNotch、HOXB4の下流分子として造血幹細胞の自己複製を促すことが示唆された。
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