肺炎マイコプラズマにおける抗菌薬に対する耐性菌の増殖様式と耐性機構の解明

• Project/Area Number: 16K10046
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Research Field: Pediatrics
• Research Institution: Kawasaki Medical School
• Principal Investigator: 大石 智洋 川崎医科大学, 医学部, 准教授 (80612770)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 宮田 一平 川崎医科大学, 医学部, 講師 (20600969) ; 赤池 洋人 川崎医科大学, 医学部, 講師 (40454813) [Withdrawn] ; 田中 孝明 川崎医科大学, 医学部, 講師 (40598091) ; 尾内 一信 川崎医科大学, 医学部, 教授 (80351899) ; 田中 悠平 川崎医科大学, 医学部, 助教 (70446102) [Withdrawn]
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2020-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2018)
• Budget Amount: ¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000); Fiscal Year 2018: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000); Fiscal Year 2017: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000); Fiscal Year 2016: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
• Keywords: マイコプラズマ / 増殖 / 感染症

Outline of Annual Research Achievements

これまで、検出されたM.pneuomoniaeにおけるダイレクトシークエンス法によるM.pneuomoniae
耐性遺伝子保有の有無、P1血清型のタイピングとしてのRFLP-PCR方の施行、耐性機構解明の手掛かりとして施行した、M.pneumoniaeにおける標準株およびマクロライド感受性株とマクロライド耐性株とにおける増殖速度実験、各種抗菌薬の対する薬剤感受性試験の施行により、以下のことが判明した。①マクロライド耐性株のマクロライド耐性遺伝子変異箇所（全6タイプ）のうちA2063G変異株（構成する遺伝子の2063番目のアデニン(A)はグアニン（G）に変異）が90％以上。②マクロライド耐性に関わる遺伝子変異のタイプにより菌の増殖スピードが異なる。③M.pneumoniaeの分子疫学的分類の一つであるP1蛋白（接着蛋白）の構造遺伝子のタイプ分類において、2011-2012年の大流行時は殆どがType1であったが、2016年以降では、Type2とその亜型が増加し（図2）Type2とその亜型では殆どの株でマクロライド耐性遺伝子変異がなかった一方で、Type1では、殆どの株がA2063G変異。④ M.pneumoniaeにおけるキノロン系薬やテトラサイクリン系薬の耐性菌を認めなかった。また、既に抗菌薬の薬剤感受性についてはAntimicrobial Agents and Chemotherapyに投稿し
acceptされ、掲載が決まった。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

当初、薬剤耐性出現の理由の解明を目標としていた。
そのその一つとして、P1血清型のタイプが関係していることを突き止めた。
また、増殖速度の違いも考えたが、あまり関連がないこともほぼ判明した。
しかしながら、各種抗菌薬間による違いおよび感受性菌と耐性菌とのかかわり
（混在の有無など）についてはまだ概要を把握できていないため。

Strategy for Future Research Activity

M.pneuomoniaeの耐性機構に関わる因子の解明として
①増殖速度の検索をさらに進めていく②抗菌薬を用いた各種抗菌薬に対する耐性株検出実験を行う③ゲノムライブラリーを作成し、分子生物学的にそれぞれの株の違いを検討する
①に関しては、現在の推論を確実にする。②に関しては、既に方法論は確立しているので、どんどん進めていく。③に関しては、費用も掛かるため、株を選定し、少しづつ進めていく。

Research Products

• [Journal Article] Comparing Antimicrobial Susceptibilities among Mycoplasma pneumoniae Isolated from Pediatric Patients in Japan between Two Recent Epidemic Periods. (2019)
  • Author(s): Oishi T, Takahashi K, Wakabayashi S, Nakamura Y, Ono S, Kono M, Kato A, Saito A, Kondo E, Tanaka Y, Teranishi H, Akaike , Tanaka T, Miyata I, Ogita S, Ohno N, Nakano T, Ouchi K
  • Journal Title: Antimicrobial Agents and Chemotherapy Volume: 印刷中
  • DOI: 10.1128/aac.02517-18
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Macrolide-Resistant Mycoplasma pneumoniae Infection, Japan, 2008-2015 (2017)
  • Author(s): Tanaka Takaaki、Oishi Tomohiro、Miyata Ippei、Wakabayashi Shoko、Kono Mina、Ono Sahoko、Kato Atsushi、Fukuda Yoko、Saito Aki、Kondo Eisuke、Teranishi Hideto、Tanaka Yuhei、Wakabayashi Tokio、Akaike Hiroto、Ogita Satoko、Ohno Naoki、Nakano Takashi、Terada Kihei、Ouchi Kazunobu
  • Journal Title: Emerging Infectious Diseases Volume: 23 Pages: 1703-1706
  • DOI: 10.3201/eid2310.170106
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] THE EPIDEMICAL FEATURES OF MYCOPLASMA PNEUMONIA INFECTION AMONG CHILDREN THROUGHOUT JAPAN IN THE RECENT 10 YEARS (2018)
  • Author(s): Tomohiro Oishi, Yuhei Tanaka, Takaaki Tanaka, Ippei Miyata, Kazunobu Ouchi
  • Organizer: the asian congress of pediatric infectious diseases
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Clinical aspects of Mycoplsma pneumoniae pneumonia The epidemical features of Mycoplasma pneumoniae infection among children throughout Japan in recent 10 years (2018)
  • Author(s): Tomohiro Oishi, Yuhei Tanaka, Takaaki Tanaka, Ippei Miyata, Kazunobu Ouchi
  • Organizer: The 7th Meeting of the Asian Organization for Mycoplasmology
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Nationwide survey of Mycoplasma pneumoniae infections and Chlamydia pneumoniae infections in children in Japan 2008-2017 (2018)
  • Author(s): Kazunobu Ouchi, Shintaro Goto, Yoko Fukuda, Tomohiro Oishi, Ippei Miyata, Shoko Wakabayashi, Mina Kono, Sahoko Ono, Aki Saito, Atsushi Kato, Eisuke Kondo, Yuhei Tanaka, Hideto Teranishi, Hiroto Akaike, Takaaki Tanaka, Satoko Ogita, Naoki Ohno, Takashi Nakano
  • Organizer: Pediatric Academic Societies Meeting
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 小児肺炎マイコプラズマ感染症の現況 ～診断と治療を中心に～ (2018)
  • Author(s): 大石智洋
  • Organizer: 第93回日本感染症学会総会・学術講演会
  • Invited
• [Presentation] 日本全国における小児マイコプラズマ感染症の近年の動向 (2018)
  • Author(s): 中村祥崇, 大石智洋, 高橋研斗, 若林尚子, 小野佐保子, 河野美奈, 加藤敦, 近藤英輔, 田中悠平, 寺西英人, 赤池洋人, 田中孝明, 宮田一平, 大野直幹, 中野貴司, 尾内一信
  • Organizer: 第50回日本小児感染症学会総会・学術集会
• [Presentation] 小児肺炎マイコプラズマ感染症の近況 (2018)
  • Author(s): 大石 智洋
  • Organizer: 第29回日本小児科医会総会フォーラム
  • Invited
• [Presentation] 日本全国における小児マイコプラズマ感染症の動向 (2018)
  • Author(s): 田中悠平, 大石智洋, 若林尚子, 小野佐保子, 河野美奈, 加藤敦, 齋藤亜紀, 近藤英輔, 寺西英人, 赤池洋人, 田中孝明, 宮田一平, 荻田聡子, 大野直幹, 升野光雄, 松田純子, 中野貴司, 寺田喜平, 尾内一信
  • Organizer: 第121回日本小児科学会学術集会
• [Presentation] 2016年に、日本全国の小児マイコプラズマ感染症罹患児より分離されたMycoplasma pneumoniaeの検討 (2018)
  • Author(s): 大石智洋, 宮田一平, 田中孝明, 田中悠平, 小野佐保子, 河野美奈, 福田陽子, 齋藤亜紀, 近藤英輔, 加藤敦, 寺西英人, 中野貴司, 寺田喜平, 尾内一信
  • Organizer: 日本マイコプラズマ学会 第44回学術集会
• [Presentation] ステロイド投与後に再燃を来したマイコプラズマ肺炎の検討 (2018)
  • Author(s): 田中悠平, 大石智洋, 長谷川俊史, 小野佐保子, 河野美奈, 福田陽子, 加藤敦, 齋藤亜紀, 田中孝明, 宮田一平, 大野直幹, 中野貴司, 寺田喜平, 尾内一信
  • Organizer: 第49回日本小児感染症学会 総会・学術集会
• [Presentation] 肺炎における非定型病原体の役割を再考する 小児でのニューキノロン、テトラサイクリンならびにステロイド使用について<Pros側> (2017)
  • Author(s): 大石智洋
  • Organizer: 第91回日本感染症学会総会・学術講演会、第65回日本化学療法学会学術集会
• [Presentation] ヒトの臨床におけるマイコプラズマ感染症の多様性と課題 小児科医の立場からみたマイコプラズマ感染症の多様性と課題 (2017)
  • Author(s): 大石智洋
  • Organizer: 第44回日本マイコプラズマ学会学術集会
• [Presentation] 小児マイコプラズマ（Mycoplasma pneumoniae）感染症における薬剤感受性試験と臨床経過からみた治療薬の検討（多施設共同研究） (2016)
  • Author(s): 大石智洋。田中孝明1、赤池洋人、宮田一平、尾内一信
  • Organizer: 第64回日本化学療法学会総会
  • Place of Presentation: 神戸国際会議場(兵庫県神戸市）
• [Presentation] 小児科医の立場からみたマイコプラズマ感染症の多様性と課題 (2016)
  • Author(s): 大石智洋
  • Organizer: 日本マイコプラズマ学会第43回学術集会
  • Place of Presentation: 長崎県医師会館（長崎県長崎市）
  • Invited
• [Presentation] 小児マイコプラズマ感染症に関する最近の話題 (2016)
  • Author(s): 大石智洋
  • Organizer: 第26回 日本外来小児科学会学術集会年次集会
  • Place of Presentation: JRホテルクレメント高松（香川県高松市）
  • Invited
• [Presentation] 小児マイコプラズマ感染症における現況について (2016)
  • Author(s): 大石智洋
  • Organizer: 第48回 日本小児感染症学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 岡山コンベンションセンター（岡山県岡山市）
  • Invited
• [Presentation] 小児マイコプラズマ肺炎の診断と治療 (2016)
  • Author(s): 大石智洋
  • Organizer: 第48回 日本小児感染症学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 岡山コンベンションセンター（岡山県岡山市）
  • Invited
• [Presentation] Epidemiological And Clinical Investigation Of Mycoplasma pneumonia Infection In Children Throughout Japan Between 2008 And 2014 (2016)
  • Author(s): Tomohiro Oishi
  • Organizer: 21st Congress of the International Organization for Mycoplasmology
  • Place of Presentation: Brisbane University （Brisban, Queensland, Australia)