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Gene expression analysis of human spermatogonial stem cell niche using single cell RNA-sequence

Research Project

Project/Area Number 16K11067
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Research Field Urology
Research InstitutionNagoya City University

Principal Investigator

MORITOKI yoshinobu  名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 研究員 (50595395)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 安井 孝周  名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 教授 (40326153)
林 祐太郎  名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 教授 (40238134)
水野 健太郎  名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 准教授 (70448710)
西尾 英紀  名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 助教 (10621063)
中根 明宏  名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 講師 (70464568)
神沢 英幸  名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 研究員 (00551277)
Project Period (FY) 2016-04-01 – 2019-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2018)
Budget Amount *help
¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000)
Fiscal Year 2018: ¥390,000 (Direct Cost: ¥300,000、Indirect Cost: ¥90,000)
Fiscal Year 2017: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
Fiscal Year 2016: ¥2,470,000 (Direct Cost: ¥1,900,000、Indirect Cost: ¥570,000)
Keywords精子幹細胞 / RNA-sequence / 停留精巣 / 造精機能障害 / 幹細胞ニッチ / 1細胞RNA-sequence
Outline of Final Research Achievements

"Development of mouse model for undescended testes". We have established robust undescended testes model by rats. However, rodent model for spermatogonial stem cell research has been performed using mainly mice, not rats. Therefore, as a preliminary experiment before running RNA-sequence for human testis, we decided to perform RNA-sequence for mouse testis. We established robust mouse undescended testis model, not by hormonal deprivation, by surgical approach. Using this model, we will next perform molecular analysis of atrophic process of undescended testis.

"Amplification of tiny volume of mRNA". We have developed robust mRNAs amplification method in the laboratory. Finally we have amplified as small as 20 copies per cell of mRNAs. We next tried to run RNA-sequence, but have not yet established stable protocol.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

ヒト停留精巣では手術時の精子幹細胞数が、将来の妊孕性と相関している。しかし幼少期になぜ精子幹細胞数が著明に減少するかは明らかではない。私たちのグループはラット停留精巣モデルを開発したが、これまでは精巣全体での大規模解析に留まっている。その理由は、精子幹細胞が精巣の中で0.2~0.3%と非常に少なく、機能的な解析が極めて困難であるためである。精子幹細胞の研究は、妊孕性の改善など臨床に直結するにも関わらず、研究は遅れている。私たちは近年開発された1細胞RNA-seqを用いれば、サンプル量が限られるヒト精巣においても、精子幹細胞維持のメカニズムが解明できるのではないかと考えた。

Report

(4 results)
  • 2018 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2017 Research-status Report
  • 2016 Research-status Report
  • Research Products

    (2 results)

All 2019 2017

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (1 results)

  • [Journal Article] Testicular teratoma demanded in‐depth pathological exploration to rule out malignancy: A pediatric case report2019

    • Author(s)
      Yoshinobu Moritoki Kentaro Mizuno Taiki Kato Shuzo Hamamoto Hideo Hattori Yasuhiko Ito Shinji Saitoh Takahiro Yasui Yutaro Hayashi
    • Journal Title

      IJU case reports

      Volume: 02 March

    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 精子幹細胞維持に関与するmiR-135aの同定と機能解析2017

    • Author(s)
      守時 良演、水野 健太郎、西尾 英紀、加藤 大貴、田口 和己、岡田 淳志、内木 拓、戸澤 啓一、林 祐太郎、安井 孝周
    • Organizer
      第26回泌尿器科分子・細胞研究会
    • Place of Presentation
      全労済ソレイユ(大分県大分市)
    • Related Report
      2016 Research-status Report

URL: 

Published: 2016-04-21   Modified: 2020-03-30  

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