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コンディショナルターゲティング法を用いた脳機能解析モデルマウスの作成

Research Project

Project/Area Number 17021014
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

Allocation TypeSingle-year Grants
Review Section Biological Sciences
Research InstitutionNiigata University

Principal Investigator

崎村 建司  新潟大学, 脳研究所, 教授 (40162325)

Project Period (FY) 2005
Project Status Completed (Fiscal Year 2005)
Budget Amount *help
¥4,600,000 (Direct Cost: ¥4,600,000)
Fiscal Year 2005: ¥4,600,000 (Direct Cost: ¥4,600,000)
KeywordsES細胞 / Cre / loxP組換え系 / C57BL / 6 / コンディショナルノックアウト / キメラマウス / 神経細胞
Research Abstract

本研究の目的は、Cre/loxP組換え系を用いたコンディショナルターゲティング法により脳機能解明をおこなうためのマウスを開発することである。このために、脳の各種細胞特異的にCreあるいは薬剤誘導型のCrePRを発現するマウスを樹立する。本年度は、アストログリアのマーカー遺伝子のGFAP、オリゴデンドログリアのマーカー遺伝子のNG2、発生過程の幼若神経細胞のマーカー遺伝子のβIII Tubulin、及び神経幹細胞マーカー遺伝子のNestinそれぞれに、Cre遺伝子をノックインしたマウスを作成した。また、時期特異的な神経細胞での遺伝子破壊を目指して、神経細胞マーカー遺伝子として認知されているNeuron Specific enolase(NSE)遺伝子に着目し、ステロイドホルモンで活性誘導が可能なCrePRをノックインしたマウスの作成を進めた。それぞれの遺伝子にCre遺伝子あるいはCrePR遺伝子をノックインしたベクターを作成し、我々が樹立したC57BL/6由来ES細胞株RENKAに導入した。標的組換えをおこした細胞からキメラマウスを作出し、生殖系列遺伝する5種類のマウス系統を樹立することに成功した。これらのCre発現マウスのうちβIII tubulin-Cre(Tb3Cre)とlacZを発現するレポーターマウスとを交配させ、両者の遺伝子を持つマウスを選択し、発達時期を追って細胞特異的なCre活性の存在とその組換え効率を検索した。その結果、生後4週のマウスではほぼ全ての神経細胞がβガラクトシダーゼ陽性を示したが、白質には陽性細胞像はほとんど認められなかった。一方、生後5日では、βガラクトシダーゼ陽性を示す細胞は、神経細胞あるいは神経前駆細胞と思われるものであったが、いずれも成体ほど多くなかった。また、Nestin-Cre(NesCre)マウスの組換え能力を検索した結果、このマウスでは神経細胞特異的な組換えが認められたが、全ての神経細胞ではなかった。この両者はいずれも神経細胞特異的な組換えマウスとして利用可能である。

Report

(1 results)
  • 2005 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All 2006 2005

All Journal Article (5 results)

  • [Journal Article] Effects of ketamine on acute somatic nociception in wild-type and N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor ε1 subunit knockout mice2006

    • Author(s)
      Petrenko, A.B.
    • Journal Title

      Neuropharmacology in press(Epub ahead of print, Jan 18)

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] Target-cell-specific left-right asymmetry of NMDA receptor content in Schaffer collateral synapses in ε 1/NR2A knock-out mice2005

    • Author(s)
      Wu, Y.
    • Journal Title

      Journal of Neuroscience 25(40)

      Pages: 9213-9226

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] Spatial diversity in gene expression for VDCCγ subunit family in developing and adult mouse brains2005

    • Author(s)
      Fukaya, M.
    • Journal Title

      Neuroscience Research 53(4)

      Pages: 376-383

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] Effect of agmatine on heteromeric N-methyl-D-aspartate receptor channels2005

    • Author(s)
      Askalany, A.R.
    • Journal Title

      Neuroscience Research 52(4)

      Pages: 387-392

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] The NR3B subunit does not alter the anesthetic sensitivities of recombinant N-methyl-D-aspartate receptors2005

    • Author(s)
      Yamakura, T.
    • Journal Title

      Anesthesia and Analgesia 100(6)

      Pages: 1687-1692

    • Related Report
      2005 Annual Research Report

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Published: 2005-04-01   Modified: 2018-03-28  

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