バングラデシュにおけるポスト・カラ・アザール皮膚リーシュマニア症新規診断法の検証
Project/Area Number |
17H04649
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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Allocation Type | Single-year Grants |
Section | 海外学術 |
Research Field |
Parasitology (including sanitary zoology)
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Research Institution | Oita University |
Principal Investigator |
小林 隆志 大分大学, 医学部, 教授 (30380520)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
濱野 真二郎 長崎大学, 熱帯医学研究所, 教授 (70294915)
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Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2020)
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Budget Amount *help |
¥17,810,000 (Direct Cost: ¥13,700,000、Indirect Cost: ¥4,110,000)
Fiscal Year 2020: ¥3,900,000 (Direct Cost: ¥3,000,000、Indirect Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2019: ¥3,900,000 (Direct Cost: ¥3,000,000、Indirect Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2018: ¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2017: ¥5,720,000 (Direct Cost: ¥4,400,000、Indirect Cost: ¥1,320,000)
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Keywords | PKDL / バングラディッシュ / 診断技術 / 節足動物媒介感染症 / バングラデシュ / チクングニア熱 / ジカ熱 / 動物モデル / 内臓型リーシュマニア症 / ポスト・カラアザール皮膚リーシュマニア症 / Dry LAMP法 / Leishmania donovani |
Outline of Annual Research Achievements |
バングラデシュでは多くの節足動物媒介感染症が問題となっている。致命的な疾患である内臓型リーシュマニア症(VL)は、治療による全身症状寛解後に一部の患者がポスト・カラ・アザール皮膚リーシュマニア症(PKDL)を発症する。VLの制圧には、PKDLの発症機序を理解し、的確に診断・治療することが不可欠である。一方、ウイルスによる節足動物媒介感染症としては、チクングニア熱やジカ熱が問題となっている。これらは、蚊によって媒介され、日本でも輸入症例があり、迅速診断キットの開発が望まれる。 本研究では、バングラデシュにおいて、①VL患者のPKDL発症の原因となるリスクファクターの集積と解析を行い、②新規迅速診断キット(Dry LAMP)の現地での有用性を検証する。また、③チクングニア熱の新規迅速診断キットも開発しその有用性を検証する。④ジカ熱の増悪化因子の探求を行う。これらによりバングラデシュにおける節足動物媒介感染症の予防法・治療法・診断法の開発に応用する。 PKDLのリスクファクターを念頭に置きつつ、不顕性リーシュマニア症の感染率とリスク因子に関するメタ解析を行い、系統的レヴューの執筆を進めた。また、現地での実証試験において安定性が問題となったL. donovaniのDry LAMPの開発では、複数の新たなプライマーを検討した結果、感度と特異性の高いものが見つかり、次年度以降の実証試験に臨む体制が整った。一方、共同研究者の依頼によりチクングニア熱に対するCHIKV-Dry LAMPを開発し、実験室レベルでの試験を重ねた上、感度と特異性の高いものが得られた。さらに、現地での実証試験に臨み良好な結果が得られた。ジカ熱の増悪化因子の解析では、人工ウイルス粒子(SRIPs)を用いてジカウイルスの細胞侵入に必要なエンベロープ内のアミノ酸解析を行い、候補アミノ酸の絞り込みに成功した。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
①バングラデシュにおけるPKDL患者の検体を用いて、VL患者のPKDL発症の原因となるリスクファクターの集積と解析を行い、昨年度までにPKDL発症患者群において上昇したmicroRNAを8種類、減少したものを10種類同定した。本年度は、これら18種類のmicroRNAと免疫反応、代謝および細胞内シグナル伝達等の関連の解析を進めた。 ②L. donovaniの新規迅速診断キットの開発では、前年にDry LAMPを現地に持ち込んで行った実証試験において長期間保存したキットの安定性が問題となったため、新たにプライマーセットを検討し感度と特異性の高いものが得られた。 ③昨年度、共同研究者の依頼を受けチクングニア熱に対する新規診断法としてCHIKV-Dry LAMPの開発に取り組んだ。実験室レベルでの試験を重ねた上、高感度で特異性の高い診断法が開発され、現地での実証試験においても良好な結果が得られたので学術論文の執筆に着手した。 ④ジカ熱の増悪化因子の解析では、人工ウイルス粒子(SRIPs)を用いてジカウイルスの細胞侵入に必要なエンベロープ内のアミノ酸解析を行い、候補アミノ酸の絞り込みに成功した。
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Strategy for Future Research Activity |
①PKDLのリスクファクターについては、昨年度までの研究に引き続き、PKDL患者検体において免疫抑制性因子(IL-10,IL-27,TGF-β、STAT3,Foxp3)、免疫チェックポイント調節分子(CTLA-4,PD-1,SOCS3)、リーシュマニア原虫の定量的検出、末梢血白血球および皮膚パンチ生検中の宿主免疫関連分子の発現解析、血中サイトカイン、血漿および尿検体中の抗原、抗体等の定量、SNP解析を実施し、PKDL発症率との相関を解析し、PKDL発症の成否を規定する分子を特定する。 ②L. donovaniの新規迅速診断キットの開発については、前年度に検討した新規プライマーのさらなる条件検討を実験室で行った後、再びバングラデシュでの実証試験を行う。 ③CHIKV-Dry LAMPについては、研究論文を作成するとともにバングラデシュの共同研究者と社会実装の検討を進める。 ④前年度にジカ熱のprM+Eを有するSRIPsを構築し、細胞侵入に重要なエンベロープ内のアミノ酸を複数個絞り込んだので、そこから必要不可欠なアミノ酸を同定する。また、ジカ熱が宿主免疫応答に与える影響を解析し増悪化のリスクファクターを明らかにする。
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Report
(3 results)
Research Products
(138 results)
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[Journal Article] CLP1 acts as the main RNA kinase in mice2020
Author(s)
Fujinami H, Shiraishi H, Hada K, Inoue M, Morisaki I, Higa R, Shin T, Kobayashi T, Hanada R, Penninger JM, Mimata H, Hanada T.
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Journal Title
Biochemical and Biophysical Research Communications
Volume: 525
Pages: 129-134
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[Journal Article] Galectin-2 suppresses nematode development by binding to the invertebrate-specific galactoseβ1-4fucose glyco-epitope.2019
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Takeuchi, T. Tamura, M., Ishiwata, K., Hamasaki, M., Hamano, S., Arata, Y., Hatanaka, T.
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Journal Title
Glycobiology
Volume: 29
Pages: 504-512
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[Journal Article] Development of intestinal M cells and follicle-associated epithelium is regulated by TRAF6-mediated NF-κB signaling.2018
Author(s)
Kanaya T, Sakakibara S, Jinnohara T, Hachisuka M, Tachibana N, Hidano S, Kobayashi T, Kimura S, Iwanaga T, Nakagawa T, Katsuno T, Kato N, Akiyama T, Sato T, Williams IR, Ohno H.
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Journal Title
J. Exp. Med
Volume: 5;215(2)
Pages: 501-519
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[Journal Article] High-density lipoprotein suppresses tumor necrosis factor alpha production by mycobacteria-infected human macrophages.2018
Author(s)
Inoue M, Niki M, Ozeki Y, Nagi S, Chadeka EA, Yamaguchi T, Osada-Oka M, Ono K, Oda T, Mwende F, Kaneko Y, Matsumoto M, Kaneko S, Ichinose Y, Njenga SM, Hamano S, Matsumoto S.
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Sci Re
Volume: 8
Pages: 1-11
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Author(s)
Moriyasu, T., Nakamura, R., Deloer, S., Senba, M., Kubo, M., Inoue, M., Culleton, R., Hamano, S.
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Journal Title
PLOS Neglected Tropical Diseases
Volume: 12
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Kamiyama N, Soma R, Hidano S, Watanabe K, Umekita H, Fukuda C, Noguchi K, Gendo Y, Ozaki T, Sonoda A, Sachi N, Runtuwene LR, Miura Y, Matsubara E, Tajima S, Takasaki T, Eshita Y, Kobayashi T.
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Journal Title
Antiviral Research
Volume: 146
Pages: 1-11
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Deloer, S. Nakamura, R. Kikuchi, M. Moriyasu, T. Kalenda, Y. D. J. Mohammed, E. S. Senba, M. Iwakura, Y. Yoshida, H. Hamano, S.
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Journal Title
Parasitology International
Volume: 66
Pages: 817-823
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Chadeka EA, Nagi S, Sunahara T, Cheruiyot NB, Bahati F, Ozeki Y, Inoue M, Osada-Oka M, Okabe M, Hirayama Y, Changoma M, Adachi K, Mwende F, Kikuchi M, Nakamura R, Kalenda YDJ, Kaneko S, Hirayama K, Shimada M, Ichinose Y, Njenga SM, Matsumoto S, Hamano S.
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Journal Title
PLoS Negl Trop Dis.
Volume: 11
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