Studies on pathogenic mechanisms of cryptocaryoniasis for its control

• Project/Area Number: 17J08497
• Research Category: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 国内
• Research Field: Aquatic life science
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 渡邊 勇歩 東京大学, 農学生命科学研究科, 特別研究員(DC1)
• Project Period (FY): 2017-04-26 – 2020-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2019)
• Budget Amount: ¥2,800,000 (Direct Cost: ¥2,800,000); Fiscal Year 2019: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000); Fiscal Year 2018: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000); Fiscal Year 2017: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
• Keywords: 海産白点虫 / プロテアーゼ / ワクチン / Cryptocaryon irritans / RNA干渉法 / プロテアーゼ阻害剤 / in vitro アッセイ

Outline of Annual Research Achievements

昨年度までの研究から海産白点虫の感染および寄生ステージで高発現する４種のプロテアーゼが本虫の寄生プロセスに重要な役割を持つことが予測された。そこで本年度は、これらプロテアーゼの組換えタンパク質を作製、トラフグに接種し、感染防御抗原としての有効性を攻撃試験によって検討した。
その結果、いずれの組換えタンパク質を接種したトラフグにおいても、組換えタンパク質に対する血中抗体価は上昇し、対照区と比較して感染虫体数も減少した。特に、そのうちの１種のシステインプロテアーゼを接種した群については、感染虫体数が対照区の７２％（１回目）と６３％（２回目）となり、有意に減少した。このことから、海産白点虫のプロテアーゼは感染防御抗原として有効であることが示された。
さらに、組換えタンパク質接種魚の血中抗体はi-antigenの異なる株の虫体に対しても結合性を示したため、異なる株の虫体に対しても有効な感染防御抗原になることが示唆された。
さらなる研究が必要ではあるが、これらの成果は今後の海産白点病に対するワクチン開発の一助になる重要な結果であると考えられる。

Research Progress Status

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] Control of the daily rhythms by photoperiods in protomont detachment and theront excystment of the parasitic ciliate Cryptocaryon irritans (2020)
  • Author(s): Watanabe Yuho、How Kah Hui、Zenke Kosuke、Itoh Naoki、Yoshinaga Tomoyoshi
  • Journal Title: Fish Pathology Volume: -
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Characterization of the proteases in the parasitic stage of Cryptocaryon irritans, and in vitro and in vivo effects of protease inhibitors on cryptocaryoniasis (2019)
  • Author(s): Watanabe Yuho、How Kah Hui、Zenke Kosuke、Itoh Naoki、Yoshinaga Tomoyoshi
  • Journal Title: Aquaculture Volume: 512 Pages: 734311-734311
  • DOI: 10.1016/j.aquaculture.2019.734311
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Dormancy induced by a hypoxic environment in tomonts of Cryptocaryon irritans , a parasitic ciliate of marine teleosts (2018)
  • Author(s): Watanabe Yuho、How Kah Hui、Zenke Kosuke、Itoh Naoki、Yoshinaga Tomoyoshi
  • Journal Title: Aquaculture Volume: 485 Pages: 131-139
  • DOI: 10.1016/j.aquaculture.2017.11.026
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Functional analysis with RNA interference technique of highly expressed protease genes at the invasive and parasitic stages of Cryptocaryon irritans (2019)
  • Author(s): Watanabe Yuho、How Kah Hui、Zenke Kosuke、Itoh Naoki、Yoshinaga Tomoyoshi
  • Organizer: 19th International Conference on Diseases of Fish and Shellfish
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 海産白点虫Cryptocaryon irritansがもつプロテアーゼの感染への関与 (2019)
  • Author(s): 渡邊勇歩、How Kah Hui、善家孝介、伊藤直樹、良永知義
  • Organizer: 日本魚病学会
• [Presentation] Characterization of protease of trophont, parasitic stage of Cryptocaryon irritans (2018)
  • Author(s): Yuho Watanabe, Kah Hui How, Kosuke Zenke, Naoki Itoh, Tomoyoshi Yoshinaga
  • Organizer: The International Symposium on Aquatic Animal Health
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 海産白点虫Cryptocaryon irritans のトロホントがもつプロテアーゼの特性 (2018)
  • Author(s): 渡邊勇歩・How Kah Hui・善家孝介・伊藤直樹・良永知義
  • Organizer: 日本魚病学会春季大会
• [Presentation] Effects of dissolved oxygen concentration and photoperiod on the development and excystment of tomonts of Crytocaryon irrains, the causative agent of cryptocaryoniasis in marine teleosts (2017)
  • Author(s): Yuho Watanabe, Kah Hui How, Kosuke Zenke, Naoki Itoh, Tomoyoshi Yoshinaga
  • Organizer: 10th Symposium on Diseases in Asian Aquaculture
  • Int'l Joint Research