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分泌細胞を基盤としたマイクロDDSマシンの開発

Research Project

Project/Area Number 18659010
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Physical pharmacy
Research InstitutionNagoya City University

Principal Investigator

平嶋 尚英  Nagoya City University, 大学院・薬学研究科, 教授 (10192296)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 田中 正彦  名古屋市立大学, 大学院・薬学研究科, 准教授 (60267953)
Project Period (FY) 2006 – 2007
Project Status Completed (Fiscal Year 2007)
Budget Amount *help
¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
Fiscal Year 2007: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
KeywordsDDS / 開口放出 / マイクロマシン / エクソサイトーシス / 免疫学 / 分泌細胞 / 膜融合 / 生体機能利用
Research Abstract

ラット好塩基球株(RBL2H3細胞)は、細胞表面にIgE受容体をもち、この受容体DNP
(dinitrophenyl)基を認識するIgEを結合させることによって、DNP基で修飾したCHO細胞を特異的に認識し、それに向かって分泌する系を構築した。CHO細胞にはあらかじめ分泌されたヒスタミンに応答するようにヒスタミン受容体(H1受容体)を発現させた。。
ヒスタミン受容体(H1受容体)を発現させたCHO細胞は、ヒスタミンに反応し、細胞内のCaイオン濃度上昇がおきることを確認した。
CHO細胞のDNP基修飾は、弱アルカリ性存在下に、DNBS(dinitro-benzene-sulfonic acid)と混ぜ、37℃でインキュベーションすることによって、細胞表面のアミノ基にラベルすることによって行ったが、細胞毒性が強くラベルできなかった。そこで、リン脂質であるホスファチジルエタノールアミン(PE)にDNP基を修飾し、CHO細胞の細胞膜に取り込ませる方法を試みた。その結果、細胞膜をほぼ均一にDNP-PE修飾できた。
そこで、あらかじめFura-RedをロードしたDNP修飾したヒスタミン受容体安定発現CHO細胞とDNP修飾をしていないヒスタミン受容体安定発現CHO細胞に対して、抗DNP-IgEを結合させたRBL2H3細胞を加えた。しかしながら、DNP修飾したCHO細胞において、RBL細胞から分泌されたヒスタミンによって細胞内のCa濃度上昇が見られた細胞は検出できなかった。
ラベルしたDNP量や細胞間のコンタクトの強度を考慮して再検討を行う必要がある。

Report

(2 results)
  • 2007 Annual Research Report
  • 2006 Annual Research Report
  • Research Products

    (6 results)

All 2008 2007

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 2 results)

  • [Journal Article] Membrane fusion between liposomes containing SNARE proteins involved in mast cell exocytosis2008

    • Author(s)
      H. Sakiyama, et. al.
    • Journal Title

      Inflammation Research (印刷中)

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] NBD-conjugated biosurfactant(MEL-A)shows the new pathway for gene transfection2007

    • Author(s)
      Y. Ueno, et. al.
    • Journal Title

      Journal of Controlled Release 123

      Pages: 247-253

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Effects of Cot expression on the nuclear translocation of NF-κB in RBL-2H3 cells2007

    • Author(s)
      S.Chikamatsu et al.
    • Journal Title

      Molecular Immunology 44

      Pages: 1490-1497

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Characterization of biosurfactant-containing liposomes and their transfection efficiency for gene transfection2007

    • Author(s)
      Y.Ueno et al.
    • Journal Title

      Biological and Pharmaceutical Bulletin 30

      Pages: 169-172

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Anchoring Cationic Amphiphiles for Nucleotide Delivery Significance of DNA Release from Cationic Liposomes for Transfection2007

    • Author(s)
      N.Hirashima et al.
    • Journal Title

      Biological and Pharmaceutical Bulletin (印刷中)

    • NAID

      110006278402

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Munc18-2 regulates exocytotic membrane fusion positively interacting with syntaxin 3 in RBL-2H3 cells2007

    • Author(s)
      S.Tadokoro et al.
    • Journal Title

      Molecular Immunology (印刷中)

    • Related Report
      2006 Annual Research Report

URL: 

Published: 2006-04-01   Modified: 2016-04-21  

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