腫瘍におけるBRCA２の変異と結合分子群の機能解明を目的とした新規モデルの作出
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18H02334
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 42020:Veterinary medical science-related
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
森松 正美 北海道大学, 獣医学研究院, 准教授 (70241370)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
落合 和彦 日本獣医生命科学大学, 獣医学部, 准教授 (30550488)
安居院 高志 北海道大学, 獣医学研究院, 教授 (00212457)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2022-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2021)
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| Budget Amount *help |
¥16,640,000 (Direct Cost: ¥12,800,000、Indirect Cost: ¥3,840,000)
Fiscal Year 2021: ¥2,470,000 (Direct Cost: ¥1,900,000、Indirect Cost: ¥570,000)
Fiscal Year 2020: ¥3,640,000 (Direct Cost: ¥2,800,000、Indirect Cost: ¥840,000)
Fiscal Year 2019: ¥3,380,000 (Direct Cost: ¥2,600,000、Indirect Cost: ¥780,000)
Fiscal Year 2018: ¥7,150,000 (Direct Cost: ¥5,500,000、Indirect Cost: ¥1,650,000)
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| Keywords | 腫瘍発症機構 / ゲノム不安定化 / 疾患モデル / 分子間相互作用 / BRCA2 / RAD51 / 乳腺腫瘍 / PALB2 / ゲノム不安定 / BRCAl2 / p53 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
イヌの乳腺腫瘍および前立腺腫瘍について、癌抑制タンパク質BRCA2が腫瘍の発症に及ぼす影響を解明するため、新規の実験モデルを作製するとともに、BRCA2結合分子群、すなわちRAD51、PALB2などに焦点をあてて、これら分子の相互作用の影響も解析して腫瘍発症におけるこれらの分子の役割を明らかにすることを目的とした。
BRCA２と結合するRAD51は、真核生物に広く存在するDNA損傷修復に必須の分子であってこれらの分子間相互作用の破綻が腫瘍発症の引きがねとなることが知られている。最近、RAD51の変異がイヌの乳腺腫瘍で報告されたがこの変異のRAD51分子における意義は不明だったため、変異体を作製して機能解析を行った。既報のA209S及びT225S変異はともにRAD51ホモ会合体結合面付近に位置することがin silico解析により分かった。そのうちT225S変異は同一分子内での構造変化を予測させる結果となった。ツーハイブリッド法およびプルダウン法の結果、A209S、T225S変異ともにホモ会合体形成能低下が観察された。PALB2との相互作用についてはA209Sでより強い低下が観察された。これらより、乳腺腫瘍罹患イヌから同定されたRAD51変異A209SおよびT225SはRAD51分子機能に影響をおよぼすことが予測された。
BRCA2ではC末端にRAD51結合領域（CTRBD）が同定されているが、この領域のイヌでの機能には不明な点が多い。この領域より下流のアミノ酸配列が存在するとRAD51との結合性が減弱したため、この下流配列は結合を抑制することが示唆された。イヌとヒトBRCA2のCTRBDのRAD51への結合性を比較した結果、イヌのCTRBDはRAD51への結合性が低く、両者で保存されていないアミノ酸配列がRAD51との結合に影響すると考えられた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
イヌのBRCA2やRAD51の機能について新規の知見を得られたことや、それを学会や論文で報告できたことは評価に値する。しかし、さらに踏み込んで新規の会合分子を同定したり、遺伝子改変動物を作成して解析する実験の進行状況が予定よりも遅れているため、「やや遅れている」とした。
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| Strategy for Future Research Activity |
イヌの乳腺腫瘍および前立腺腫瘍について、癌抑制タンパク質BRCA2が腫瘍の発症に及ぼす影響を解明するため、新規のin vivo実験モデルの作製を目指しているので、それを進めたい。ラットではマウスに比べて発生工学的手法の普及が進んでおらず、それが研究を進める上て支障となっているが、最近、ラットで高効率ゲノム編集法を開発した研究者から手法を直接、習うことが出来たため、今後はその方法により研究を展開したい。BRCA2結合分子群の解析については、これまで着手できていない分子にも研究を展開したい。
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Report
(2 results)
Research Products
(9 results)
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[Journal Article] The canine RAD51 mutation leads to the attenuation of interaction with PALB2.2019
Author(s)
Uemura M, Ochiai K, Morimatsu M, Michishita M, Onozawa E, Azakami D, Uno Y, Yoshikawa Y, Sasaki T, Watanabe M, Omi T.
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Journal Title
Veterinary and Comparative Oncology
Volume: -
Pages: 1-9
DOI
Related Report
Peer Reviewed
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[Journal Article] Endogenous Leu332Gln mutation in p53 disrupts the tetramerization ability in a canine mammary gland tumor cell line.2018
Author(s)
Ochiai K, Azakami D, Morimatsu M, Hirama H, Kawakami S, Nakagawa T, Michishita M, Egusa AS, Sasaki T, Watanabe M, Omi T.
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Journal Title
Oncology Reports
Volume: 40
Pages: 488-494
DOI
NAID
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
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