アペリン受容体とアドレナリン受容体の二量体形成による血管異常収縮の解析
| Project/Area Number |
18J11045
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| Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 国内 |
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| Research Field |
Integrative animal science
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| Research Institution | University of Tsukuba |
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Principal Investigator |
権 哲源 筑波大学, 生命環境科学研究科, 特別研究員(DC2)
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| Project Period (FY) |
2018-04-25 – 2020-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2019)
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| Budget Amount *help |
¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2019: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 2018: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
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| Keywords | α1A-AR / APJ / 血管平滑筋細胞 / 遺伝子改変マウス / CRISPR/Cas9 / 血管収縮力測定（マグヌス法） / SPring-8 / Gタンパク質共役型受容体 / アペリン受容体 / アドレナリン受容体 / 血管収縮 / 冠動脈収縮 / 遺伝子欠損マウス / ゲノム編集技術 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度は、主に以下の3つの実験を行った後、研究成果をまとめ、国際科学誌に論文を投稿した。
【1. 血管平滑筋細胞（VSMCs）におけるアペリン受容体（APJ）の免疫蛍光染色】論文を投稿するにあたり、樹立したVSMCs特異的APJ過剰発現(SMA-APJ)マウスについて、血管におけるAPJのタンパク質発現を免疫蛍光染色によって観察した。当研究室で開発した抗APJ抗体を用いて、WT血管と比較して、SMA-APJ血管でAPJのタンパク質発現が顕著に亢進することを証明した。
【2. α1-アドレナリン受容体（AR）とAPJの細胞内タンパク質間相互作用の観察】 HEK293T細胞にα1-AR各サブタイプとAPJの発現プラスミドをトランスフェクションし、二分子蛍光補完（BiFC）法で、両者のタンパク質間相互作用を確認した。その結果、α1A-サブタイプは主に細胞膜において強く局在し、APJとの間で共局在することが判明した。ARやAPJを始めとするGタンパク質共役型受容体は、主に細胞膜で、リガンドを受容し、細胞内シグナルを伝達する。この研究結果は、α1A-ARとAPJが細胞レベルで協調的にシグナル伝達に関与する可能性を支持している。
【3. α1-AR阻害剤投与時の、心拍数変化の測定】アペリンの腹腔内投与時、SMA-APJマウスでは、急性の心拍数低下が観察される。このアペリン誘導性の心拍数低下に対して、α1A-AR阻害剤はα1D-AR阻害剤よりも効果的に心拍数を改善させた。以上の結果は、α1A-ARがSMA-APJのアペリン誘導性の徐脈に対して、重要な役割を担うことを示している。
本研究の成果は、J. Biochem誌に筆頭共著者として掲載され、血管の狭窄を示す図が、掲載号の表紙として採用された。更に、社会的関心の指標となるAltmetric スコアが「40」となり、大きな注目を集めた。
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| Research Progress Status |
令和元年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和元年度が最終年度であるため、記入しない。
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Report
(2 results)
Research Products
(11 results)
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[Journal Article] Cooperative action of APJ and α1A-adrenergic receptor in vascular smooth muscle cells induces vasoconstriction2019
Author(s)
Nagano K, Kwon C, Ishida J, Hashimoto T, Kim JD, Kishikawa N, Murao M, Kimura K, Kasuya Y, Kimura S, Chen YC, Tsuchimochi H, Shirai M, Pearson J, and Fukamizu A
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Journal Title
The Journal of Biochemistry
Volume: 166
Issue: 5
Pages: 383-392
DOI
Related Report
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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