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スンクス空腹期モチリン分泌機構の解明‐約100分周期はどのように制御されるのか‐

Research Project

Project/Area Number 18J14399
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field Morphology/Structure
Research InstitutionSaitama University

Principal Investigator

竹見 祥大  埼玉大学, 理工学研究科, 特別研究員(PD)

Project Period (FY) 2018-04-25 – 2020-03-31
Project Status Discontinued (Fiscal Year 2019)
Budget Amount *help
¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2019: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 2018: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Keywordsモチリン / 小腸 / オルガノイド / CRISPR / Suncus murinus / 小腸オルガノイド / Dibenzazepine
Outline of Annual Research Achievements

本研究は、空腹時に胃から下部小腸へと約100分周期で伝播する伝播性空腹期収縮(Migrating Motor Contraction; MMC)がどのように制御されるか明らかにすることを目的としており、そのために平成31年度は昨年度に引き続き、MMCの強収縮を引き起こすモチリンの転写・分泌制御機構についてスンクス小腸オルガノイドを用いて検討した。これまで、モチリンはげっ歯類では偽遺伝子化していることから研究が進んでおらず、本研究ではモチリンを産生する小型実験動物であるスンクスを用いている。これまで、スンクスで初めて小腸からオルガノイドを作製することに成功し、また安定して長期間培養することにも成功した。
今年度は、モチリン産生株化細胞をスンクス小腸オルガノイドから作出するために、IRES-T antigen遺伝子をモチリン遺伝子下流にノックインすることを目的とした。IRES-T antigenを含むベクターコンストラクトを作製し、Cas9、guideRNAとともにスンクス小腸オルガノイドへトランスフェクションした。トランスフェクションしたベクター由来の蛍光タンパク質は確認できているが、未だモチリン遺伝子へのノックインは成功していない。
それに加えて、蛍光レポーターであるtdTomato遺伝子をモチリン遺伝子下流にノックインするため、tdTomato遺伝子及びネオマイシン耐性遺伝子を含むベクターを作製し、guideRNA、Cas9とともにスンクス小腸オルガノイドへトランスフェクションすることも試みた。ベクターの作製は終了したが、トランスフェクションは成功していない。

Research Progress Status

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2019 Annual Research Report
  • 2018 Annual Research Report
  • Research Products

    (4 results)

All 2018

All Presentation (4 results) (of which Int'l Joint Research: 3 results)

  • [Presentation] Identification of the origin of medium chain fatty acid in ghrelin.2018

    • Author(s)
      S. Takemi, C. Ikenoya, Z. Gong, D. Kondo, T. Tanaka, T. Sakai, I. Sakata
    • Organizer
      International Congress of Neuroendocrineology
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Corticotropin-releaseing factor receptor signaling in the brain stimulates ghrelin secretion in mice.2018

    • Author(s)
      N. Takakura, D. Kondo, S. Takemi, R.Wada, T. Sakai, I. Sakata
    • Organizer
      International Congress of Neuroendocrineology
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] The mechanism of motilin-induced strong gastric contraction in the Suncus murinus: Involvement of the ghrelin-mediated GABAergic pathway2018

    • Author(s)
      I. Sakata, S. Takemi, K. Koyama, A. Dudani, T. Sakai
    • Organizer
      International Congress of Neuroendocrineology
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Liraglutideによる胃運動/胃排出/適応性弛緩に対する影響の検討2018

    • Author(s)
      竹見 祥大、尾島汐海、中原千尋、日浦伸宏、坂田 一郎、坂井 貴文
    • Organizer
      第60回 日本平滑筋学会総会
    • Related Report
      2018 Annual Research Report

URL: 

Published: 2018-05-01   Modified: 2024-03-26  

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