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雄性単為発生胚の作出による、父母由来ゲノム識別機構の解明

Research Project

Project/Area Number 19658103
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Applied animal science
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

青木 不学  The University of Tokyo, 大学院・新領域創成科学研究科, 准教授 (20175160)

Project Period (FY) 2007 – 2008
Project Status Completed (Fiscal Year 2008)
Budget Amount *help
¥3,500,000 (Direct Cost: ¥3,500,000)
Fiscal Year 2008: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 2007: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
Keywords単為発生 / 雄性単為発生胚 / 着床前初期胚 / 卵 / ゲノム / 初期胚 / 核移植 / ヒストンメチル化
Research Abstract

本実験の全体の手順は以下のものである。(1)1細胞G2期の胚から雄性前核を取り出し、それをあらかじめ除核しておいた卵殻胞期卵に移植する。(2)IBMXを含む培養液で減数分裂の開始を抑制しながら、数時間培養する。(3)IBMXを除いた培養液に移し、減数分裂を促す。(4)卵が第1極体を放出してMII期に到達したところで、単為発生を促す。その際、サイトカラシンを培養液に加えて、第2極体の放出を抑える。(5)その後の発生を調べる。
以上の実験手順の中で、本年度は最も問題が生じることが懸念される(4)のプロセスについての検討を行った。すなわち、第1減数分裂の際、移植された前核が正しく染色体を極体に分配するかどうかという問題である。そこで、第1分裂の後、第2分裂中期に到達した時点で染色体数をカウントし、分配が正しく行われたかどうかの確認を行ったところ、73%の卵において正常な染色体数20本が確認された。さらに、第1減数分裂によって相同染色体の分離が正常に行われているかをY染色体特異的なプローブを用いたFISH法により調べたところ、すべてのサンプルおいてY染色体は卵細胞質と第1極体に別れて存在しており、正常に染色体分配が行われていることが確認された。次に雄性前核移植卵に単為発生を促したところ、38%の卵で前核の形成が認められ、そのすべてが2細胞期まで発生した。
上のように、計画した雄性単為発生胚作出のための実験系は有効であることが確認されたが、前核形成率が38%とかなり低く、さらに実験系の改良が必要であることが示唆された。

Report

(2 results)
  • 2008 Annual Research Report
  • 2007 Annual Research Report
  • Research Products

    (8 results)

All 2008 2007

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 6 results) Presentation (2 results)

  • [Journal Article] Roles of the first and second round of DNA replication in the regulation of zygotic gene activation in mice.2008

    • Author(s)
      Sonehara H
    • Journal Title

      I. Reprod. Dev. 54

      Pages: 381-384

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Contribution of the oocyte nucleus and cytoplasm to the determination of meiotic and developmental competece in mice.2008

    • Author(s)
      Inoue A
    • Journal Title

      Hum. Reprod. 23

      Pages: 1377-1384

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Changes in H3K79 methylation during preimplantation development in mice.2008

    • Author(s)
      Ooga M
    • Journal Title

      Biol. Reprod. 78

      Pages: 413-424

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Changes in H3K79 methylation during preimplantation development in mice.2008

    • Author(s)
      Ooga, M
    • Journal Title

      Biology of Reproduction 78

      Pages: 413-424

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Deficiency in the response to DNA double-strand breaks in mouse early preimplantation embryos.2007

    • Author(s)
      Yukawa, M
    • Journal Title

      Biochem. Biophys. Res. Comm. 358

      Pages: 578-584

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Alterations in epigenetic modifications during oocyte growth in mice.2007

    • Author(s)
      Kageyama
    • Journal Title

      Reproduction 133

      Pages: 85-94

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 受精前後における遺伝子発現リプログラミング機構の解明2008

    • Author(s)
      青木不学
    • Organizer
      「生殖細胞の発生プロセス・再プログラム化とエピジェネティクス」公開シンポジウム
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2008-03-04
    • Related Report
      2008 Annual Research Report
  • [Presentation] 減数分裂におけるヒストン修飾の機能.2007

    • Author(s)
      青木不学
    • Organizer
      日本疾患モデル学会
    • Place of Presentation
      筑波
    • Year and Date
      2007-08-31
    • Related Report
      2007 Annual Research Report

URL: 

Published: 2007-04-01   Modified: 2016-04-21  

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