分泌蛋白プロファイリング(secretome)によるマウス初期胚の機能評価
| Project/Area Number |
19659426
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Exploratory Research
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Obstetrics and gynecology
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
丸山 哲夫 Keio University, 医学部, 講師 (10209702)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
梶谷 宇 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (60407111)
長島 隆 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (40338116)
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| Project Period (FY) |
2007 – 2008
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2008)
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| Budget Amount *help |
¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000)
Fiscal Year 2008: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 2007: ¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
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| Keywords | マウス / 胚 / プロテオミクス / 体外受精 / セクレトーム |
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| Research Abstract |
昨年度に引き続き本年度は、哺乳類胚発生のメカニズムならびに胚の個体発生能を含めた質的ポテンシャルを、非侵襲的に解明し評価することを目的とした。そのために、マウス胚発生過程において培養液中に分泌されるタンパク質のプロファイル(secretome)を明らかにし、そのデータベース構築を目指すとともに、agingや機械的受精操作などがsecretomeにどのような影響を及ぼすかについて検討するための実験システムの整備を行った。まず、secretomeと胚発生・発育の関連を検討する際に、十分な胚盤胞到達率が得られなければならない。一方、プロテインチップ解析に供するためには、出来るだけ少量の培養液で行う必要があり、これは胚発生・発育にとって厳しい環境となる。このように、両者は相反するため、至適条件の確立が極めて重要である。そこで、培養液の変更など種々の検討を行った結果、60μ1の培養液量で約90%の胚盤胞到達率を再現性良く得られる培養システムを確立し、引き続いてその実験システムにより得られた各時期の培養液をプロテインチップ解析に供した。その結果、コントロール培養液に比較して、胚存在下の培養液では、複数の特異的蛋白ピークが検出され、また時期に応じてそのプロファイルは変化した。これらの一連のsecretomeのプロファイリングと胚盤胞到達率との関連を検討するとともに、今回検出された複数の特異的蛋白の同定を目指し、MALDI/TOF-MS質量分析計への解析に供するに必要な実験システムの更なる構築を行った。昨年度より引き続いて本年度得られた上記の成果は、マウスのみならずヒト胚のqualityの非侵襲的評価システムを確立するうえで、重要な基盤データになると考えられる。
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Report
(2 results)
Research Products
(48 results)
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[Journal Article] The UDP-glucose receptor P2RY14 triggers innate mucosalimmunity in the female reproductive tract by inducing IL-8.2009
Author(s)
Arase T, Uchida H, Kajitani T, Ono M, Tamaki K, Oda H, Nishikawa S, Kagami M, Nagashima T, Masuda H, Asada H, Yoshimura Y, Maruyama T
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Journal Title
The Journal of Immunology (In press)
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[Journal Article] Analysis of serum FSH bioactivity in a patient with an FSH-secreting pituitary microadenoma and multicystic ovaries : A case report.2008
Author(s)
Kajitani T, Liu S, Maruyama T, Uchida H, Sakurai R, Masuda H, Nagashima T, Ono M, Arase T, Yoshimura Y
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Journal Title
Human reproduction (Oxford, England) 23
Pages: 435-439
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[Journal Article] Activation of SRC kinase and phosphorylation of signal transducer and activator of transcription-5 are required for decidual transformation of human endometrial stromal cells.2008
Author(s)
Nagashima T, Maruyama T, Uchida H, Kajitani T, Arase T, Ono M, Oda H, Kagami M, Masuda H, Nishikawa S, Asada H, Yoshimura Y
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Journal Title
Endocrinology 149
Pages: 1227-1234
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[Journal Article] 精査により診断に至った重症慢性骨盤痛を伴う異所性子宮内膜症の2例.2008
Author(s)
古谷正敬, 浅田弘法, 内田 浩, 久慈直昭, 丸山哲夫, 青木大輔, 吉村泰典, 大東貴志, 木挽貢慈, 升田博隆, 青木 類, 中村修三
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Journal Title
エンドメトリオージス研究会会誌 29
Pages: 147-151
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[Journal Article] 妊娠子宮における子宮筋Side Population細胞の役割.2008
Author(s)
小野政徳, 丸山哲夫, 梶谷 宇, 内田 浩, 荒瀬 透, 各務真紀, 小田英之, 西川明花, 升田博隆, 長島 隆, 太田邦明, 伊藤 守, 浅田弘法, 岡野栄之, 松崎有未, 吉村泰典
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Journal Title
日本生殖内分泌学会雑誌 13
Pages: 25-29
NAID
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[Journal Article] Noninvasive and real-time assessment of reconstructed functional human endometrium in NOD/SCID/□ cnull immunodeficient mice2007
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Masuda H, Maruyama T^*, Hiratsu E, Yamane J, Iwanami A, Nagashima T, Ono M, Miyoshi H, Okano HJ, Ito M, Tamaoki N, Nomura T, Okano H, Matsuzaki Y, Yoshimura Y
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Journal Title
Proc Natl Acad Sci USA 104
Pages: 1925-1930
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[Journal Article] Side population in human uterine myometrium displays phenotypic and functional chafacteristics of myometrial stem cells2007
Author(s)
Ono M, Maruyama T^*, Masuda H, Kajitani T, Nagashima T, Arase T, Ito M, Ohta K, Uchida H, Asada H, Yoshimura Y, Okano H, Matsuzaki Y
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Journal Title
Proc Natl Acad Sci USA 104
Pages: 18700-18705
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[Presentation] The role of uterine smooth muscle stem cells, isolated based on cell surface markers, in myometrial remodeling in the pregnant uterus.2009
Author(s)
Ono M, Maruyama T, Kajitani T, Uchida H, Oda H, Nishikawa S, Kagami M, Arase T, Nagashima T, Masuda H, Morikawa S, Mabuchi Y, Okano Y, Matsuzaki Y, Yoshimura Y
Organizer
56th Society for Gynecologic Investigation
Place of Presentation
Glasgow, Scotland
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[Presentation] 表面抗原を用いたヒト子宮平滑筋幹細胞の新しい分離法の開発とその妊娠至急リモデリングにおける役割.2009
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小野政徳, 丸山哲夫, 梶谷 宇, 内田 浩, 荒瀬 透, 小田英之, 西川明花, 各務真紀, 浅田弘法, 升田博隆, 岡野栄之, 松崎有未, 吉村泰典
Organizer
第8回 日本再生医療学会
Place of Presentation
東京都千代田区
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第30回 日本エンドメトリオーシス学会
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宮城県仙台市
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浅田弘法, 古谷正敬, 梶谷 宇, 内田 浩, 丸山哲夫, 吉村泰典, 升田博隆, 岸 郁子, 田島敏秀, 寺西貴英, 木挽貢慈
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第30回 日本エンドメトリオーシス学会
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宮城県仙台市
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辻 紘子, 浅田弘法, 浅井 哲, 古谷正敬, 内田 浩, 浜谷敏生, 丸山哲夫, 小崎健次郎, 柳橋達彦, 羽田智則, 安藤正明, 木挽貢慈, 吉村泰典
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第30回 日本エンドメトリオーシス学会
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宮城県仙台市
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[Presentation] 子宮平滑筋幹細胞の新しい分離法とその機能解析.2008
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小野政徳, 丸山哲夫, 梶谷 宇, 内田 浩, 荒瀬 透, 小田英之, 西川明花, 長島 隆, 升田博隆, 馬渕 洋, 森川 暁, 岡野栄之, 松崎有未, 吉村泰典
Organizer
第81回 日本内分泌学会学術総会
Place of Presentation
青森県弘前市
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