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転写技術を用いた細胞シートの眼再生医療への応用

Research Project

Project/Area Number 19659445
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Ophthalmology
Research InstitutionTokyo Medical and Dental University

Principal Investigator

大野 京子  Tokyo Medical and Dental University, 大学院・医歯学総合研究科, 准教授 (30262174)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 森田 育男  東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (60100129)
望月 學  東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (10010464)
Project Period (FY) 2007 – 2008
Project Status Completed (Fiscal Year 2008)
Budget Amount *help
¥2,900,000 (Direct Cost: ¥2,900,000)
Fiscal Year 2008: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Fiscal Year 2007: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000)
Keywords角膜内皮細胞 / 転写 / 基板 / 免疫染色 / 光学顕微鏡 / 電子顕微鏡 / Na-K-ATPase / マトリックス / コラーゲン / フィブロネクチン / ラミニン
Research Abstract

本年はブタ角膜内皮細胞を用いてこれを基盤上に播種し、confluentになった状態において、ブタの角膜実質に転写させた。具体的にはブタの角膜を摘出し、Descmet膜ごと、角膜内皮細胞を除去し、露出した実質に基盤を接着させ、転写を行った。角膜内皮細胞を転写させたブタの角膜を光学顕微鏡、および電子顕微鏡にて観察を行ったところ、角膜内皮細胞は円柱状でDescmet膜とよく接着していた。また、tight junction, adherence junctionなどの細胞間接着装置も発達していた。さらに、Na-K-ATPaseを用いた免疫染色においても、転写した角膜内皮細胞にNa-K-ATPaseの発現が認められ、転写した角膜内皮細胞が機能していることが明らかになった。そこでつぎの段階として、実際にin vivoでの転写を行うために、家兎の角膜内皮細胞の培養条件の確立を行った。ブタの内皮細胞の培養と同じ条件でDescmet膜からtrypsinにて内皮細胞を単離し、培養を行ったところ、家兎の角膜内皮細胞もブタ角膜内皮細胞と同様の培養条件でよく増殖し、基板上で容易にconf1uentに達することを確認できた。来年度は、実際に家兎眼において、熱処置による角膜内皮障害モデルを作成した上で、つぎにこのモデルに対して、基盤上に作成した角膜内皮細胞シートをin vivoで転写させ、転写した角膜内皮細胞の機能を解析し、臨床応用への基礎を固める予定である。

Report

(2 results)
  • 2008 Annual Research Report
  • 2007 Annual Research Report
  • Research Products

    (3 results)

All 2008 2007

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (1 results)

  • [Journal Article] Connexin 43 contributes to differentiationof retinal pigment epithelia]L cells viacyclic AMP sic2008

    • Author(s)
      Koj ima A, Nakahama KI, Ohno-Matsui K, Shimada N, Mori K, Iseki S, Sato T, Mochizuki M, Morita I
    • Journal Title

      Biochem Biophys Res Commun 366

      Pages: 532-538

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Connexin 43 contributes to differentiation of retinal pigment epithelial cells via cyclic AMP signaling.2008

    • Author(s)
      Kojima A, Ohno-Matsui K, et. al.
    • Journal Title

      Biochem Biophys Res Commun 366

      Pages: 532-538

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Inhibition of cathepsin L causes a reduced neovascularization in the retina and choroid.2007

    • Author(s)
      Shimada N, Ohno-Matsui K, et. al.
    • Organizer
      ARVO
    • Place of Presentation
      Fort Lauderdale, USA
    • Year and Date
      2007-05-06
    • Related Report
      2007 Annual Research Report

URL: 

Published: 2007-04-01   Modified: 2016-04-21  

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