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ニトリル代謝の全貌解明と物質生産への応用

Research Project

Project/Area Number 19688005
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Applied microbiology
Research InstitutionUniversity of Tsukuba

Principal Investigator

橋本 義輝  筑波大, 生命環境科学研究科, 講師 (00323254)

Project Period (FY) 2007 – 2009
Project Status Completed (Fiscal Year 2009)
Budget Amount *help
¥25,480,000 (Direct Cost: ¥19,600,000、Indirect Cost: ¥5,880,000)
Fiscal Year 2009: ¥6,500,000 (Direct Cost: ¥5,000,000、Indirect Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2008: ¥8,970,000 (Direct Cost: ¥6,900,000、Indirect Cost: ¥2,070,000)
Fiscal Year 2007: ¥10,010,000 (Direct Cost: ¥7,700,000、Indirect Cost: ¥2,310,000)
Keywordsニトリル / 代謝 / 微生物 / 酵素
Research Abstract

Pseudomonas chlororaphis B23(以下、B23菌と略)のニトリル合成・分解・利用系に関わるプロモーター・酵素・機能性タンパク質の中で、(他に関しては継続して研究を進めているが)現在、ニトリル代謝に関与する遺伝子クラスターの調節タンパク質に関して得られている成果について以下に記載する。
本菌は、様々なニトリルをNitrile hydratase (NHase)とAmidaseにより酸とアンモニアに分解する。両酵素は、ニトリルを合成する酵素Aldoxime dehydratase (OxdA)などのニトリル代謝関連酵素群とともに遺伝子クラスターを構成している。本クラスター上流に存在するNhpRにより転写調節されると示唆される(本クラスター中の)oxdA, amiA, nhpA, nhpB, nhpCの5つの遺伝子と、nhpSとacsAの二つの遺伝子がそれぞれオペロンとして転写されていることをreverse transcription (RT)-PCR法によって明らかにした。さらに、プライマー伸長法によって本クラスター内から、oxdA上流、nhpA上流、nhpS上流、nhpR上流の合計4つの転写開始点を発見し、いずれの転写開始点の上流にも(RNAポリメラーゼのシグマN因子が認識する)-12,-24コンセンサス配列を見いだした。一連の結果を踏まえ、(現在アクリルアミドの工業生産に使用されている)Rhodococcus rhodochrous J1菌のNHaseの発現機構とは全く異なる新規転写調節機構を発見した。

Report

(2 results)
  • 2008 Annual Research Report
  • 2007 Annual Research Report
  • Research Products

    (7 results)

All 2008 2007

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (4 results)

  • [Journal Article] Transcriptional regulation of the nitrile hydratase gene cluster in Pseudomonas chlororaphis B232008

    • Author(s)
      Sakashita, T., Hashimoto, Y., Oinuma, K-I., Kobayashi, M.
    • Journal Title

      J.Bacteriol. 190

      Pages: 4210-4217

    • NAID

      120007138751

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Discovery of amide (peptide) bond synthetic activity in acyl-CoA synthetase2008

    • Author(s)
      Abe, T., Hashimoto, Y., Hosaka, H., Tomita-Yokotani, K, Kobayashi, M.
    • Journal Title

      J.Biol.Chem. 283

      Pages: 11312-11321

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] イソニトリル・ニトリルの新規代謝経路の発見と新規酵素の分子機能解析2007

    • Author(s)
      橋本義輝
    • Journal Title

      生化学 79

      Pages: 929-940

    • NAID

      10019771773

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] ニトリルヒドラターゼ遺伝子クラスターの転写様式に関する研究2008

    • Author(s)
      坂下俊秀、老沼研一、橋本義輝、小林達彦
    • Organizer
      BMB 2008
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      2008-12-06
    • Related Report
      2008 Annual Research Report
  • [Presentation] Enzymes involved in overall nitrile pathway : Regulatory expression and unique functions2008

    • Author(s)
      Michihiko Kobayashi, Tomoko Abe, Toshihide Sakashita, Yoshiteru Hashimoto
    • Organizer
      4th Japan-Finland Biotechnology Symposium
    • Place of Presentation
      札幌
    • Year and Date
      2008-10-02
    • Related Report
      2008 Annual Research Report
  • [Presentation] Transcription regulation of the microbial nitril hydratase gene cluster2008

    • Author(s)
      T.Sakashita, Y.Hashimoto, K-I.Oinuma, M.Kobayashi
    • Organizer
      FEBS&IUBMB
    • Place of Presentation
      アテネ(ギリシャ)
    • Year and Date
      2008-06-29
    • Related Report
      2008 Annual Research Report
  • [Presentation] ニトリル合成・分解・代謝に関わる遺伝子クラスターの転写調節機構解析2008

    • Author(s)
      坂下俊秀、橋本義輝、老沼研一、小林達彦
    • Organizer
      日本農芸化学会
    • Place of Presentation
      名古屋
    • Year and Date
      2008-03-28
    • Related Report
      2007 Annual Research Report

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Published: 2007-04-01   Modified: 2016-04-21  

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