Septic myopathy: Cross-talk between skeletal muscle and resident macrophages
| Project/Area Number |
19K18318
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 55060:Emergency medicine-related
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
池尻 薫 三重大学, 医学部附属病院, 助教 (90813014)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2020)
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| Budget Amount *help |
¥3,380,000 (Direct Cost: ¥2,600,000、Indirect Cost: ¥780,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
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| Keywords | ICU-AWミオパチー / 骨格筋萎縮 / C2C12 / 骨格筋レジデントマクロファージ / PICS / miR-133a / 敗血症性ミオパチー / 骨格筋 / レジデントマクロファージ / エクソソーム |
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| Outline of Research at the Start |
敗血症でしばしば見られる骨格筋の萎縮は、人工呼吸器からの離脱を困難にし、集中治療室(ICU)からの退室を遅らせる重篤な合併症である。単なる廃用性萎縮と異なり、過剰な炎症の波及やエネルギー代謝異常に起因するICU関連筋力低下（ICU-AW：ICU-acquired weakness)という新規疾患単位(entity)と考えられるが、本ミオパチー発生機序には不明な点が多く治療も困難である。本研究では骨格筋内に散在するレジデントマクロファージに注目し、骨格筋とレジデントマクロファージの相互作用により形成される微小環境が、ICU-AWミオパチー病態に果たす役割を解明する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
白血球THP-1細胞にPMA刺激を与え、細胞培養上清に放出されたエキソソームの回収を行いエキソソーム表面抗原の同定(CD9, CD63, CD81)を行った。さらにわれわれはマウス骨格筋細胞株のC2C12の上清から遠心分離によりエキソソームの回収を行い、エキソソーム表面抗原の同定を同様に行った。
同定方法としては、エキソソームをビーズアッセイ法（ビーズ表面にエキソソームを付着させる方法）を用いて表面抗原とエキソソームに発現する蛋白質の同定を行った。
本研究のテーマである「炎症により発現が亢進する骨格筋特異的マイクロRNAであるがエクソソームにより、レジデントマクロファージに伝搬されM1分化を誘導し、マクロファージM1サイトカインが骨格筋のマイクロRNA発現を強化する、すなわち「骨格筋とレジデントマクロファージの相互作用により形成される微小環境が、ICU-AWミオパチー病態に影響を及ぼす」という仮説を検証するための基礎的研究を行った。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
マクロファージおよび筋肉エキソソームの抽出に成功した。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後はこれらのエキソソームをもちいて骨格筋とマクロファージの相互作用について検証する。
具体的には、骨格筋細胞株を用いたM1型マクロファージを誘導するmyomiRNAのin vitro解析。さらにin vitro実験系で観察される骨格筋とマクロファージの遺伝子発現変化や表現型変化が、マウス敗血症モデルでin vivoでも観察できることを確認し、病態関与へのエビデンスを確立する。
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Report
(2 results)
Research Products
(6 results)
