オンコジーン同定の新しい方法論の確立

• Project/Area Number: 20659150
• Research Category: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Hematology
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 北村 俊雄 The University of Tokyo, 医科学研究所, 教授 (20282527)
• Project Period (FY): 2008 – 2009
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2009)
• Budget Amount: ¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000); Fiscal Year 2009: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000); Fiscal Year 2008: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000)
• Keywords: 発現クローニング / がん / トランスフォーメーション / レトロウィルス / シグナル伝達

Research Abstract

種々の癌細胞株由来の発現型cDNAライブラリーをウイルスベクターを利用して作成した。これらのライブラリーをマウスIL-3依存性細胞株(Ba/F3、HF6、HF7)に導入し、IL-3非依存性の自律増殖を誘導する遺伝子の同定を試みた。この実験において、セリンスレオニン/チロシンキナーゼpim-1、pim-2、pim-3、転写因子PEPP2を同定したが、点突然変異などの活性型変異は認められなかった。このうち、PEPP2はノックダウンすると胃癌細胞の増殖を抑制した。PEPP2の下流で発現が増強あるいは減弱する遺伝子をDNAチップを利用した発現解析で探索し、興味深い遺伝子を複数同定した。シグナル伝達系を調べたところ、PEPP2の過剰発現はPI3K-AKTの経路を活性化することが判明した。種々のがん患者サンプルで調べたところ、肺がん、乳がん、胃がんなどで発現が亢進している症例が認められた。発現が高い患者と低い患者の予後を調べたところ、ある程度分化した癌でPEPP2高発現の症例が予後が悪いことが判明した。未分化癌ではもともと予後が悪いためか、差が認められなかった。
一方、骨髄細胞に発現した場合にトランスフォームに関与しうるかをマウス骨髄移植系を利用して検討したが、単独では白血病などの発症を誘導しなかった。現在、MLL融合蛋白質などクラス2変異との組み合わせで白血病などの疾患を発症しうるか検討中である。

Research Products

• [Journal Article] Hes1 immortalizes committed progenitors and plays a role in blast crisis transition in chronic myelogeneou leukemia.. (2010)
  • Author(s): Nakahara, F
  • Journal Title: Blood (in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] AID-induced T-lymphoma or B-leukemia/lymphoma in a mouse BMT model. (2010)
  • Author(s): Komeno, Y
  • Journal Title: Leukemia (in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Molecular bases of myelodysplastic syndromes : Lessons from animal models. (2009)
  • Author(s): Komeno, Y
  • Journal Title: J Cell.Physiol. 219 Pages: 529-534
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A Rac GTPase activating protein MgcRacGAP is an NLS-containing nuclear chaperone in the activation of STAY transcription factors. (2009)
  • Author(s): Kawashima, T
  • Journal Title: Mot Cell Biol. 29 Pages: 1796-1813
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Activating and inhibitory signals from an inhibitory receptor LMIR3/CLM-1 : LMIR3 augments LPS response through association with FcRg in mast cells. (2009)
  • Author(s): Izawa, K
  • Journal Title: J.Immunol. 183 Pages: 925-936
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A Rac GTPase activating protein MgcRacGAP is constitutively phosphorylated on serine 387 in the v-Src-transformed NIH3T3 cells. (2009)
  • Author(s): Doki, N
  • Journal Title: Cancer Science 100 Pages: 1675-1679
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Mixed-lineage-leukemia(MLL)fusion protein collaborates with Ras to induce a cute leukemia through aberrant Hox expression and Raf activation. (2009)
  • Author(s): Ono, R
  • Journal Title: Leukemia 23 Pages: 2197-209
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] (2009)
  • Author(s): 沖俊彦
  • Journal Title: 細胞工学(株式会社学研メディカル秀潤社) Pages: 209-214
• [Journal Article] (2009)
  • Author(s): 北村俊雄
  • Journal Title: 臨床血液(社団法人日本血液学会) Pages: 174-181
• [Journal Article] (2009)
  • Author(s): 加藤菜穂子
  • Journal Title: 日本臨床(株式会社日本臨牀社) Pages: 1875-1879
• [Journal Article] A Rac GTPase activaying protein MgcRacGAP is an NLS-containing nuclear chaperone in the activation of STAT transcdption factors (2009)
  • Author(s): Kawashima T
  • Journal Title: Molecular and Cellular Biology 29 Pages: 1796-1813
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Analysis of mouse LMIR5/CLM7 as an activating receptor: differential regulation of LMIR5/CLM7 between mouse and human. (2008)
  • Author(s): Yamanishi Y
  • Journal Title: Blood 111 Pages: 688-698
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] AML1 mutations induced MDS and MDS/AML in a mouse BMT model. (2008)
  • Author(s): Watanabe-Okochi N
  • Journal Title: Blood 111 Pages: 4297-4308
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Rac and Nuclear Translocation of STAT Transcription Factors (2008)
  • Author(s): Kawashima T
  • Journal Title: Metkods in Enzymology 439 Pages: 171-189
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Learning from mouse BMT models for MDS and MPD (2009)
  • Author(s): Kitamura, T
  • Organizer: MDS/MPN Meeting
  • Place of Presentation: USA,ヒューストン
• [Presentation] Wnt modulators, SFRP-1 and SFRP-2 differentially regulate hematopoietic stem cells. (2009)
  • Author(s): 中島秀明
  • Organizer: 第71回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 京都
• [Presentation] Constitutive phosphorylation of a RacGAP is involved in v-Src-induced transformation of NIH3T3 cells. (2009)
  • Author(s): 土岐典子
  • Organizer: 第71回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 京都
• [Presentation] Analysis of C/EBPA mutations in AML, MDS by a mouse BMT model. (2009)
  • Author(s): 加藤菜穂子
  • Organizer: 第71回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 京都
• [Presentation] Hes1 confers self-renewal capability on committed progenitors and induces CML BC-like disease. (2009)
  • Author(s): 中原史雄
  • Organizer: 第71回日本血液学会学術集会
  • Place of Presentation: 京都
• [Presentation] Hes1による骨髄前駆細胞への自己複製能付与と、慢性骨髄性白血病における急性転化の誘導. (2009)
  • Author(s): 中原史雄
  • Organizer: 第68回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 横浜
• [Presentation] MgcRacGAPの恒常的リン酸化はv-SrcによるNIH3T3細胞のtransformに関与する. (2009)
  • Author(s): 土岐典子
  • Organizer: 第68回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 横浜
• [Presentation] LMIR5のリガンドとしてTIM1およびTIM4を同定した。 (2009)
  • Author(s): 山西吉典
  • Organizer: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 大阪
• [Presentation] LMIR3ノックアウトマウスの解析;LMIR3欠損はマウス腹膜炎モデルにおける致死率を改善する。 (2009)
  • Author(s): 伊沢久未
  • Organizer: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 大阪
• [Presentation] ヒトLMIR/CD300ファミリー分子の解析:CD300CはFcRgammaと会合して活性化シグナルを伝達する。 (2009)
  • Author(s): 高橋まり子
  • Organizer: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 大阪
• [Presentation] LMIR8/CLM-6はpDCマーカーである。 (2009)
  • Author(s): 貝谷綾子
  • Organizer: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 大阪
• [Presentation] 活性化レセプターLMIR7とLMIR4の比較解析:FcRγとの会合から得られた知見。 (2009)
  • Author(s): 榎本豊
  • Organizer: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 大阪
• [Presentation] An activating and inhibitory signal from an inhibitory receptor LMIR3/CLM-1 : LMIR3 augments LPS response through association with FcRγ in mast cells. (2009)
  • Author(s): 前原明絵
  • Organizer: 第39回日本免疫学会総会・学術集会
  • Place of Presentation: 大阪
• [Presentation] 活性型レセプターLMIR5の機能解析:マウスおよびヒトLMIR5の相違. (2008)
  • Author(s): 山西吉典
  • Organizer: 第4回麟麟塾
  • Place of Presentation: 品川
• [Presentation] Analysis of mouse IM[R5/CLM-7 as an activating receptor: differential regulation of LMIR5/CLM7 in mouse versus human cells. (2008)
  • Author(s): Yamanishi Y
  • Organizer: The 15th East Asia Joint Conference
  • Place of Presentation: Korea.
• [Presentation] Overexpression of AID causes both T and B lymphoma in a mouse BMT model. (2008)
  • Author(s): Komeno Y
  • Organizer: ISEH 37th Annual Scientific Meeting
  • Place of Presentation: USA
• [Presentation] 白血病、骨髄増殖性疾患、骨髄異形成症候群発症の分子メカニズム (2008)
  • Author(s): 北村俊雄
  • Organizer: 第70回目本血液学会総会
  • Place of Presentation: 京都
• [Presentation] AML,MDSでみられたC/EBPα変異体のマウスBMT mode1. (2008)
  • Author(s): 加藤菜穂子
  • Organizer: 第70回日本血液学会総会
  • Place of Presentation: 京都
• [Presentation] BMTモデルを用いたAID高発現による白血病・リンパ腫の解析. (2008)
  • Author(s): 米野由希子
  • Organizer: 第70回日本血液学会総会
  • Place of Presentation: 京都
• [Presentation] 新しいメカニズムでJAK/STATシグナルを抑制する阻害剤の同定. (2008)
  • Author(s): 川島敏行
  • Organizer: 第70回日本血液学会総会
  • Place of Presentation: 京都
• [Presentation] Robo4の造血幹細胞における生理学的機能. (2008)
  • Author(s): 中島秀明
  • Organizer: 第70回目本血液学会総会
  • Place of Presentation: 京都
• [Presentation] BMTモデルを用いたAID高発現による白血病・リンパ腫の解析. (2008)
  • Author(s): 米野由希子
  • Organizer: 第67回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋
• [Presentation] 可溶性LMIR5はLPSによる炎症反応を増強する. (2008)
  • Author(s): 山西吉典
  • Organizer: 第38回日本免疫学会総会
  • Place of Presentation: 京都
• [Presentation] 活性化レセプターLMIR7の機能解析 (2008)
  • Author(s): 榎本豊
  • Organizer: 第38回日本免疫学会総会
  • Place of Presentation: 京都
• [Presentation] LMIR3はマスト細胞において細胞内領域のITIMを介した抑制化シグナルとITAMを有するFcRgammaとの会合を介した活性化シグナルを伝達する (2008)
  • Author(s): 伊沢久未
  • Organizer: 第38回日本免疫学会総会
  • Place of Presentation: 京都
• [Presentation] 活性化レセプターのLMIR6は末梢血の樹状細胞に高発現する. (2008)
  • Author(s): 杉内正弘
  • Organizer: 第38回日本免疫学会総会
  • Place of Presentation: 京都
• [Presentation] インターロイキン6(IL-6)阻害剤のスクリーニング法の開発と阻害剤の評価. (2008)
  • Author(s): 土屋秋穂
  • Organizer: 第31回日本分子生物学会年会・第81回日本生化学会大会合同大会
  • Place of Presentation: 神戸
• [Presentation] Analysis of Mouse LMIR5/CLM-7 as An Activating Receptor: Differential Regulation of LMIR5/CLM-7 in Mouse Versus Human Cells (2008)
  • Author(s): Yamanishi Y
  • Organizer: 50th American Society of Hematology (ASH) Amual Meeting and Exposition
  • Place of Presentation: San Francisco