抗インフラマソーム能欠失型ウイルスを利用した新しいウイルス予防・治療法の研究
| Project/Area Number |
20K08830
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
|
| Allocation Type | Multi-year Fund |
|---|
| Section | 一般 |
|---|
| Review Section |
Basic Section 54030:Infectious disease medicine-related
|
|---|
| Research Institution | Aichi Medical University |
|---|
Principal Investigator |
小松 孝行 愛知医科大学, 医学部, 教授 (20215388)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田中 幸枝 福井大学, 学術研究院医学系部門, 助教 (10197486)
森田 奈央子 愛知医科大学, 医学部, 助教 (20815881)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2020-04-01 – 2024-03-31
|
| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
|
| Budget Amount *help |
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
|
|---|
| Keywords | インフラマソーム / パラミクソウイルス / ニューモウイルス / アクセサリー蛋白質 |
|---|
| Outline of Research at the Start |
パラインフルエンザウイルス(PIV)の重症呼吸器感染症，ニパウイルスの致死的新興感染症など，幅広いパラミクソウイルス(PMV)の予防・治療法が望まれている．私は，アクセサリー蛋白質Vに，インフラマソーム抑制能(抗FM能)が保存されていることを明らかにした．V欠損ウイルス[V(-)]は弱毒化するため，V蛋白質やそれが関わる宿主因子は予防・治療法の標的となる．しかし，現在のV(-)は抗FM能以外の機能まで喪失するため，その役割の解明は難しい．本研究では，先ずⅠ型PIVを用いて全容を解明し，その情報をもとに，抗FM能のみを欠失した組換えPMVをデザインし，FM能が予防・治療法の標的となるか検討する．
|
| Outline of Annual Research Achievements |
インフラマソームは，自然免疫細胞を中心に発現する細胞質多タンパク質複合体で，感染に伴う危険シグナルに察知して活性化しIL-1βやIL-18を分泌させ抗ウイルス免疫を誘導する．そのため，ウイルスはインフラマソームの活性化を抑制する方が増殖に有利である．私達はこれまでに，インフラマソームの再構成実験を用いて，「パラミクソウイルスのアクセサリー蛋白質に，インフラマソームの活性化を抑制する能力（抗インフラマソーム 能）が保存されている」ことを明らかにした．アクセサリー蛋白質を発現しない組換えウイルスは弱毒化する．そのため，アクセサリー蛋白質やそれが関わる宿主因子はワクチンや治療薬の標的となる．しかし，現在のアクセサリー蛋白質欠損パラミクソウイルスは抗インフラマソーム能以外の重要な機能（抗インターフェロン能や増殖調節能）まで喪失しているため，抗インフラマソーム能の役割を解明することは難しい．本研究では，パラミクソウイルスとニューモウイルスを用いて，抗インフラマソーム能のみを欠失した変異組換えウイルスを作出し，ウイルスの病原性における抗インフラマソーム能の役割，抗ウイルス免疫におけるインフラマソームの重要性を明らかにすることを目的とした．これまでに，上記ウイルスのアクセサリー蛋白質に変異を施し，抗インフラマソーム能のみを欠失した変異アクセサリー蛋白質をコードするウイルス遺伝子cDNAを作製した．さらに，作製したcDNAを用いて目的のウイルスを回収した．
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
最初にデザインした変異では，目的の変異アクセサリー蛋白質をコードするウイルス遺伝子cDNAが得られなかったため，組換えウイルスの作製に取りかかるまでに時間を要した．これまでの経過は，2020-2021年度に，ウイルスのアクセサリー蛋白質の欠失変異体，点置換変異体をコードするcDNAを作製した．再構成実験を用いて，抗インフラマソーム能に加えて抗インターフェロン能，ウイルスの増殖調節能を評価したところ，抗インターフェロン能，ウイルスの増殖調節能に変化はなく，抗インフラマソーム能のみを欠失した変異アクセサリー蛋白質をコードするcDNAを複数得ることができた．2022年度は，得られたcDNAを組み換えることによって抗インフラマソーム能のみを欠失した変異アクセサリー蛋白質を発現する組換えウイルスを回収した．それぞれの組換えウイルスについて，培養細胞を用いて抗インフラマソーム能，抗インターフェロン能，増殖について評価したところ，抗インフラマソーム能のみを欠失した組換えウイルスを作製することができた．
|
| Strategy for Future Research Activity |
2023年度は，2022年度に作製した抗インフラマソーム能のみを欠失した変異アクセサリー蛋白質を発現する組換えウイルスを用いて，マウスでの増殖，病原性，抗体誘導能等を調べ，ワクチンとして有効かどうか検討する．
|
Report
(3 results)
Research Products
(7 results)
