心停止後意識障害における低侵襲的細胞医薬治療の有効性評価：患者社会復帰を目指して

Research Project

Project/Area Number	20K09274
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 55060:Emergency medicine-related
Research Institution	Nippon Medical School
Principal Investigator	横堀将司日本医科大学, 大学院医学研究科, 大学院教授 (70449271)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	須田智埼玉医科大学, 医学部, 教授 (00366733) 佐々木和馬獨協医科大学, 医学部, 助教 (30832266) 山田真吏奈日本体育大学, 保健医療学部, 准教授 (70508621) 阪本太吾日本医科大学, 医学部, 助教 (90587073)
Project Period (FY)	2020-04-01 – 2024-03-31
Project Status	Completed (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help	¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000) Fiscal Year 2022: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000) Fiscal Year 2021: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000) Fiscal Year 2020: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
Keywords	びまん性脳損傷 / 心停止後症候群 / ラットモデル / 頭部外傷 / 脳損傷 / 神経幹細胞移植 / 行動実験 / 蘇生後脳症 / 神経再生医療
Outline of Research at the Start	①蘇生後脳症モデルにおいて神経幹細胞（SB623）移植の有効性を検討する ②幹細胞移植のIn situ transplantationと、経鼻的接種との比較を行い、行動実験および病理学的、電気生理学的有効性を明確にする。
Outline of Annual Research Achievements	蘇生後脳症ラットモデルを作成した。Sprague-Dawley ラット（8週齢雄 300－350g）を用いたVF誘導の蘇生後脳症ラットモデルを作成する予定であったが、モデルが安定せず、気管挿管を用いた窒息誘導心停止モデルを作成することとした。まず、麻酔下に気管挿管を行い筋弛緩薬を投与し、人工呼吸管理（0.65ml/100g Weight）を行った。左大腿動脈より連続動脈圧モニタリング用カテーテル、同静脈より投薬ラインを挿入。気管挿管をクランプし、心停止を誘導した。３分後、200回/分の用手的胸部圧迫と人工呼吸を開始し蘇生した。上記の如く作成した蘇生後脳症ラットモデルに神経幹細胞（SB623）を調整し、脳室内にIn situに投与し、ラットの生存を保つことができた。今後はさらに行動実験をすすめていく。また、より安定した全脳損傷モデルを作成するために、マイクロ波照射装置(Model MMW8209;05, Muromachi microwave fixation system)を用いて、2.45GHzのマイクロ波を3.0kW、0.10秒間、ラット頭部に照射し損傷を作成した。照射後30分以内に鎮痛・鎮静下に断頭し脳を摘出しHPLCによる脳組織の生化学的評価を行った。ラット脳海馬から得られたサンプルのアミノ酸およびGABAをHPLCにて測定し、損傷作成群とコントロール群にて比較することで、GABAと17のアミノ酸を測定した。これによりグルタミン酸の脳細胞内の低下を認め、全脳障害急性期におけるExcitotoxityを確認することができた。今後は免疫組織染色および行動実験を進める予定である。また、すでに我が国で使用可能となっているグルタミン酸チャネルブロッカーであるAMPA Chennel blockerの有効性を確認する予定である。

Report

(4 results)