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Construction of high resolution separation analysis and function control methods for natural supramolecules

Research Project

Project/Area Number 21K05128
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 34020:Analytical chemistry-related
Research InstitutionEhime University

Principal Investigator

島崎 洋次  愛媛大学, 理工学研究科(理学系), 准教授 (80284389)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 座古 保  愛媛大学, 理工学研究科(理学系), 教授 (50399440)
Project Period (FY) 2021-04-01 – 2025-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥4,290,000 (Direct Cost: ¥3,300,000、Indirect Cost: ¥990,000)
Fiscal Year 2023: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2021: ¥2,470,000 (Direct Cost: ¥1,900,000、Indirect Cost: ¥570,000)
Keywords超分子 / 電気泳動 / 分離と溶出 / 非変性 / 機能制御 / タンパク質複合体 / タンパク質 / 天然酵素 / 電気泳動法 / 酵素活性 / 酵素 / 天然超分子 / 分離分析法
Outline of Research at the Start

多くの生体タンパク質は複数のタンパク質と相互作用することで超分子を形成し、生体内で連鎖反応を起こすなど複雑な機能を担っている。この超分子の複雑な機能の解明には、超分子を天然状態で網羅的に分離検出し、その機能を分析する方法が必要である。さらに、抗体、アプタマー、分解酵素などを超分子に作用させることで、可逆的に機能制御できる超分子の構築につながる。本研究では、天然超分子の分離分析法とその機能制御法を融合する研究を提案する。具体的には、高分離能分離された超分子の網羅的な溶出と検出法の確立、検出された超分子の選別法と定量的な機能分析法の確立、超分子の可逆的な機能制御法の確立、を実施する。

Outline of Annual Research Achievements

昨年度は、今まで行ってきた非変性条件の2次元電気泳動法による天然酵素の分離やその溶出法などの研究成果について、依頼論文や依頼講演を行うことで今までの研究成果を国内の学会で公表することができた。さらに、日本電気泳動学会から第62回日本電気泳動学会学会賞を頂くことができた。また、エステラーゼやリゾチームなどの酵素と、トランスフェリンなどのタンパク質と複合体からなる超分子を生体試料から分離溶出し、その複合体の機能制御を解明してきた。これらの研究成果も日本分析化学会などで発表してきた。これらの研究結果より、本研究の目的のタンパク質超分子の分離、溶出および検出法の構築を実現できたものと考えられる。また、超分子の機能制御法の構築も実現できたものと思われる。昨年度発表した論文は以下の4件である。1)島崎洋次:第62回電気泳動学会賞(児玉賞)受賞論文、非変性条件の2次元電気泳動による各種酵素および複合体の分離と機能解析, 電気泳動(in press). 2)M.Inoue, Y. Shimazaki:Applicability of esterase activity change analysis using a combined method of non-denaturing two-dimensional electrophoresis and reverse staining, Journal of Electrophoresis, 2023, 67: 1-7. 3)島崎洋次、福家麗、徳田深咲:非変性2次元ゲル電気泳動法によるネイティブタンパク質の分離分析法の展望と課題, 電気泳動, 2023, 67, 71-75. 4)島崎洋次、中尾香琳、福家麗:非変性2次元電気泳動法によって分離、溶出されたカルボキ汁エステラーゼとトランスフェリン複合体の電気泳動的抽出,電気泳動, 2023,67, 37-42.

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

研究内容および成果では概ね順調に進んできたが、最後にまとめる上で必要な物品の調達が期限内に間に合わなかったため、1年間の期間延長をお願いした。今年度中には仕上げる予定である。

Strategy for Future Research Activity

最後にまとめる上で必要な物品の調達が期限内に間に合わなかったため、1年間の期間延長をお願いした。今年度中には仕上げる予定である。また、国内学会だけでなく、国際的な学術誌や学会での成果報告も可能ならば行っていきたい。

Report

(3 results)
  • 2023 Research-status Report
  • 2022 Research-status Report
  • 2021 Research-status Report
  • Research Products

    (15 results)

All 2024 2023 2022 2021

All Journal Article (7 results) (of which Peer Reviewed: 7 results,  Open Access: 4 results) Presentation (8 results) (of which Invited: 3 results)

  • [Journal Article] 第62回日本電気泳動学会学会賞(児玉賞)受賞者論文:非変性条件の2次元電気泳動による各種酵素およびその複合体の分離と機能解析2024

    • Author(s)
      Shimazaki Youji
    • Journal Title

      Electrophoresis Letters

      Volume: 68

    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Electrophoretic extraction of the carboxylesterase-transferrin complexes after separation and detection by non-denaturing two-dimensional electrophoresis2023

    • Author(s)
      Shimazaki Youji、Nakao Karin、Fuke Urara
    • Journal Title

      Electrophoresis Letters

      Volume: 67 Issue: 1 Pages: 37-42

    • DOI

      10.2198/electroph.67.37

    • ISSN
      2189-2628, 2189-2636
    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Applicability of esterase activity change analysis using a combined method of non-denaturing two-dimensional electrophoresis and reverse staining2023

    • Author(s)
      Inoue Maho、Shimazaki Youji
    • Journal Title

      Journal of Electrophoresis

      Volume: 67 Issue: 1 Pages: 1-7

    • DOI

      10.2198/jelectroph.67.1

    • ISSN
      1349-9394, 1349-9408
    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Prospects and challenges of native protein separation and analysis using non-denaturing two-dimensional gel electrophoresis2023

    • Author(s)
      Shimazaki Youji、Fuke Urara、Tokuda Misaki
    • Journal Title

      Electrophoresis Letters

      Volume: 67 Issue: 2 Pages: 71-75

    • DOI

      10.2198/electroph.67.71

    • ISSN
      2189-2628, 2189-2636
    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Analysis of the enzymatic degradation of lysozyme fibrils using a combination method of non-denaturing gel electrophoresis and double staining with Coomassie brilliant blue G-250 and R-250 dyes2023

    • Author(s)
      Kenichiro Nagata, Ryo Ashikaga, Wakako Mori, Tamotsu Zako, Youji Shimazaki
    • Journal Title

      Analytical Sciences

      Volume: 39 Pages: 267-274

    • DOI

      10.1007/s44211-022-00229-w

    • Related Report
      2022 Research-status Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Electrophoretic extraction of protein complexes after separation and detection by a combined method of non-denaturing two-dimensional electrophoresis and reversible staining2022

    • Author(s)
      Karin Nakao, Youji Shimazaki
    • Journal Title

      Journal of Electrophoresis

      Volume: 66 Issue: 1 Pages: 5-11

    • DOI

      10.2198/jelectroph.66.5

    • ISSN
      1349-9394, 1349-9408
    • Related Report
      2022 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Characterization of enzymatic activity of lysozyme in lysozyme-ovotransferrin complex before and after treatment with trypsin2021

    • Author(s)
      Youji Shimazaki, Shunta Yabu
    • Journal Title

      Separation Science Plus

      Volume: 4 Pages: 377-383

    • Related Report
      2021 Research-status Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 第62回日本電気泳動学会 学会賞(児玉賞)受賞講演: 非変性条件の2次元電気泳動による天然酵素および複合体の分離と機能解析2023

    • Author(s)
      島崎洋次
    • Organizer
      第74回日本電気泳動学会学術集会
    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Invited
  • [Presentation] 私と電気泳動「電気泳動でタンパク質の機能を視る」2023

    • Author(s)
      島崎洋次,
    • Organizer
      第74回日本電気泳動学会学術集会
    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Invited
  • [Presentation] ミクロ2次元電気泳動法で分離された酵素-トランスフェリン複合体の溶出とその機能解析2023

    • Author(s)
      井上真帆 , 榎本信也 , 島﨑洋次
    • Organizer
      日本分析化学会第72年会
    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Presentation] 非変性条件の2次元電気泳動法で分離・検出されたタンパク質複合体の電気泳動法による抽出2022

    • Author(s)
      中尾香琳, 島崎洋次
    • Organizer
      第73回日本電気泳動学会
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] 2次元ゲル電気泳動で分離されたタンパク質超分子の分析法の検討2022

    • Author(s)
      島崎洋次, 中尾香琳
    • Organizer
      日本分析化学会第71年会
    • Related Report
      2022 Research-status Report
  • [Presentation] 非変性条件の2次元ゲル電気泳動法によるネイティブタンパク質の分離分析法の展望と課題2022

    • Author(s)
      島崎洋次, 福家麗
    • Organizer
      第72回日本電気泳動学会シンポジウム
    • Related Report
      2022 Research-status Report
    • Invited
  • [Presentation] 非変性等電点電気泳動分離したタンパク質複合体の溶出法の検討とその特性分析2021

    • Author(s)
      O島崎洋次、籔隼大、塚野鈴
    • Organizer
      日本電気泳動学会第72回総会
    • Related Report
      2021 Research-status Report
  • [Presentation] 等電点電気泳動分離溶出されたリゾチーム超分子の機能制御法の検討2021

    • Author(s)
      O島崎洋次、塚野鈴、籔隼大
    • Organizer
      日本分析化学会 第70年会
    • Related Report
      2021 Research-status Report

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Published: 2021-04-28   Modified: 2024-12-25  

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