TRPV1チャンネルをターゲットにした前庭障害への治療法の開発

• Project/Area Number: 21K09606
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Review Section: Basic Section 56050:Otorhinolaryngology-related
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 鎌倉 武史 大阪大学, 大学院医学系研究科, 助教 (30600564)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 太田 有美 大阪大学, 大学院医学系研究科, 講師 (00598401) ; 滝本 泰光 大阪大学, 大学院医学系研究科, 招へい教員 (00624298) ; 佐藤 崇 大阪大学, 大学院医学系研究科, 助教 (30756002) ; 近藤 誠 大阪公立大学, 大学院医学研究科, 教授 (50633012) ; 今井 貴夫 奈良県立医科大学, 医学部, 非常勤講師 (80570663)
• Project Period (FY): 2021-04-01 – 2024-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2022)
• Budget Amount: ¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000); Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000); Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2021: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
• Keywords: TRPV1受容体 / 前庭機能障害 / 前庭動眼反射 / 前庭障害

Outline of Research at the Start

TRPV1受容体は一般体性感覚系に発現し、炎症性疼痛に深く関与している。我々は前庭神経系でのTRPV1受容体の発現や機能解析を行ってきた。その結果TRPV1受容体が前庭神経節に発現していることを組織学的手法だけでなく生理学的手法も用いて確認し、イオンチャンネルとして機能し得ることを明らかにした。以上からTRPV1受容体がめまい症状への関与が示唆されるが、その機序は未だ完全に解明されていない。本研究の目的は前庭系でのTRPV1の機能解析によってめまい発生の機序を解明し、TRPV1をターゲットにした従来の治療法より効果的なめまい治療法を開発することである。

Outline of Annual Research Achievements

我々の過去の報告(Takimoto Y, et al., Toxicol Lett, 2016)では内耳毒性のあるシスプラチン4㎎/kgを4日間マウスに投与した時に前庭動眼反射におけるVOR利得が低下することを示した。このことはシスプラチンにより前庭機能の低下を来たすことが示唆している。このモデルを用いて実験を進めることとした。実際にはシスプラチンによる前庭動眼反射におけるVOR利得の低下がTRPV1受容体の選択的アンタゴニストであるカプサゼピンを投与することで抑制できるか、つまりカプサゼピンによりシスプラチンの前庭系への障害が抑制できるかを実験した。
前年度の予備的な実験において、カプサゼピン5㎎/kg投与30分後にシスプラチン4㎎/kg投与、これを4日間連続でマウスに投与し、VOR利得の低下がコントロール群に比べて抑制できる可能性が示唆されたため、本格的にこの実験を進めることとした。
マウスを、カプサゼピン1㎎/kgの群とカプサゼピン5㎎/kg、そしてコントロール(10%DMSO)の3群に分け、カプサゼピン投与30分後にいずれの群にもシスプラチン4㎎/kg投与、これを4日間連続でマウスに投与し、5日目に前庭動眼反射を計測した。既に各群10匹ずつ、合計30匹の実験は終了しており、その解析を進めているところであるが、1匹あたりの解析にかなり時間がかかるため、全体の結果が判明するにはもう少し時間を要する予定である。
またカルシウムイメージングによりマウス前庭神経節細胞を用いた細胞内カルシウム濃度の変化を測定する実験については、上記実験の解析結果を踏まえて条件を検討し、行う予定である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

実験そのものが5日間連続で行わないといけないため、スケジュールの調整が難しく、思うように実験が進まなかったことと、実験の解析にどうしても時間がかかることが理由である(マウス1匹の解析にスムーズでも数時間要する)。

Strategy for Future Research Activity

既に実験と前庭動眼反射の測定を終えているが、その解析を行い、VOR利得を確認する作業を進める。一部のマウスでは十分に測定できていない可能性も考えられるため、追加での実験を行うことも想定はしている。
またカルシウムイメージングにより前庭神経節細胞を用いた細胞内カルシウム濃度の変化を測定する実験については、上記実験の解析結果を踏まえて条件を検討し、行う予定である。さらに免疫染色など組織学的実験も行う計画である。