Project/Area Number |
21K09874
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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Allocation Type | Multi-year Fund |
Section | 一般 |
Review Section |
Basic Section 57030:Conservative dentistry-related
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Research Institution | The University of Tokushima |
Principal Investigator |
稲垣 裕司 徳島大学, 病院, 講師 (50380019)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
木戸 淳一 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 准教授 (10195315)
板東 美香 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 助教 (10510000)
生田 貴久 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 助教 (00746563)
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Project Period (FY) |
2021-04-01 – 2024-03-31
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Project Status |
Granted (Fiscal Year 2022)
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Budget Amount *help |
¥4,030,000 (Direct Cost: ¥3,100,000、Indirect Cost: ¥930,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2021: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
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Keywords | スクレロスチン / 糖尿病関連歯周炎 / 歯肉溝滲出液 / AGEs / 骨細胞 |
Outline of Research at the Start |
本研究は、糖尿病関連歯周炎の新規バイオマーカーとしてスクレロスチン(SOST)の可能性を調べ、また糖尿病合併症の原因の1つである終末糖化産物(AGEs)と歯周病原細菌由来のリポポリサッカライド(LPS)の協調作用による「歯周炎局所における炎症性骨吸収の増悪」と「SOST発現上昇」との関連性とその機序を明らかにする。 具体的には、糖尿病関連歯周炎患者の歯肉溝滲出液および唾液中のSOST量、歯周病原細菌量および皮膚蓄積AGEsを測定する。さらに骨細胞と、破骨細胞または骨芽細胞とを共培養して糖尿病関連歯周炎局所の骨微小環境を再現し、AGEsとLPSの協調作用による炎症性骨吸収の促進機序について調べる。
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Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、徳島大学病院歯科・歯周病科に来院する糖尿病関連歯周炎患者、非糖尿病歯周炎患者および対照健常者を被験者とする臨床研究である。初年度(2021年度)、被験者の口腔内からサンプル(唾液や歯肉溝滲出液)を採取してスクレロスチン(SOST)などのバイオマーカーを測定するために、当大学の臨床研究倫理審査委員会に申請を行い承認を得た。また糖尿病の診査に必要な機器(AGEsセンサや簡易型の血糖値/HbA1c測定器)を購入し、診査・サンプル採取からELISA法(Sclerostin,Human, ELISA Kit)によるSOST測定・解析までのシステムを構築した。2022年度は大学病院の外来において被験者のエントリーを行ったが、COVID-19流行で外来患者の人数が大幅に減少した影響もあり、当初の予定人数(3群、各群20名以上)には達しなかった。そこで集まったサンプルをもとに複数のメーカーのELISA Kitを用いて歯肉溝滲出液中のSOSTを定量した。その結果、歯肉溝滲出液中のSOSTは10~20pg/mLの濃度で検出できたが、現在までのところ、歯肉溝滲出液中のSOST濃度と皮膚で検出したAGEsやHbA1cとの関連性は得られていない。今後、被験者数(例数)を増やして関連性を明らかにしていく予定である。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
臨床研究では、病院外来にて被験者のエントリーを行っているが当初の予定人数(3群、各群20名以上)には達していない。特に糖尿病関連歯周病患者はもともと人数が少ないにもかかわらず、COVID-19流行で外来患者の人数が大幅に減少した影響もあり、予定通りにエントリーができていない。さらに当初使用を予定していたメーカーのELISAキットでは、歯肉溝滲出液中のSOSTはいずれの部位でも検出限界値未満で測定できなかった。そのため、歯肉溝滲出液中のSOSTの検出が可能なELISAキットを複数の別メーカーのものから選定するのに時間を費やした。
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Strategy for Future Research Activity |
臨床研究では、引き続き被験者のエントリーを行うとともに、2022年度同様、被験者から唾液や歯肉溝滲出液を採取する。そして採取したサンプル中のSOSTを通法に従い抽出し、2022年度に新たに選定したELISAキットにより順次測定していく。また並行して歯周ポケット内の口腔内細菌を採取し、P. gingivalis、Tannerella forsythia、Treponema denticola、Aggregatibacter actinomycetemcomitans の定量を検査会社に外注する。 一方、基礎研究では骨細胞株を用いた細胞実験を継続するとともに、糖尿病ラット(絹糸結紮により歯周炎を惹起した)の歯周組織のパラフィン切片に対して、SOSTの抗体を用いて免疫組織化学染色を行う。
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