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病原性コアラレトロウイルスの解明と制御へ向けての基礎研究

Research Project

Project/Area Number 22658094
Research Category

Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Basic veterinary science/Basic zootechnical science
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

宮沢 孝幸  京都大学, ウイルス研究所, 准教授 (80282705)

Project Period (FY) 2010 – 2011
Project Status Completed (Fiscal Year 2011)
Budget Amount *help
¥2,170,000 (Direct Cost: ¥1,900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2011: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2010: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Keywords内在性レトロウイルス / 免疫不全 / 内在化 / コアラレトロウイルス / 進化 / コアラ / 有袋類 / ゲノム / ウイルス受容体 / レトロトランスポゾン
Research Abstract

レトロウイルスはゲノムに組み込まれるという性質をもっており、ほ乳類のゲノムには意味のある遺伝子の何倍もの分量の「レトロウイルス」が生まれながらにして組み込まれている。この宿主のゲノムに入り込み宿主と同化したウイルスのことを内在性レトロウイルスと呼ぶ。ほ乳類のゲノムでは、遺伝子の占める割合がわずか2%程度である一方で、内在性レトロウイルスの配列が占める割合は約10%と非常に高い。最近の研究により、内在性レトロウイルスが、胎盤の形成や病原性ウイルスの防御に関わっていることが明らかになってきた。このことは、ほ乳類は生理学的機能の進化のためにレトロウイルスを積極的に取り込み(内在化)、利用してきたことを意味する。ところがコアラレトロウイルス(KoRV)は内在性レトロウイルスでありながら、病原性を保持しており、白血病や免疫不全などを引き起こしている。本研究では、KoRVを遺伝学的ならびに生物学的に解析し、病原性をもつ型(サブタイプ)を明らかにするとともに、KoRVの増殖を抑える抗ウイルス薬の探索を行うことを目的とした。
本年度はこれまでの研究結果をもとに性質の異なるKoRVの感染性遺伝子クローンを作出した。それぞれの型に特異的なプライマーを設計し、忠実度の高いPCR用ポリメラーゼを用いてKoRV全長のcDNAを得た。得られたcDNAの塩基配列を決定しPCRによるエラーがないことを確認した後、ゲノムの両側にLTRをもつ感染性遺伝子クローンの形に組み直した。感染性遺伝子クローンのプラスミドをKoRVに感受性の細胞にトランスフェクトし、逆転写酵素活性、LacZマーカーレスキューアッセイ、イムノブロット法にて感染性を確認したところ、野生株と同様の感染性が確認できた。興味深いことにクローニングした感染性クローン由来のウイルスは、HEK293細胞では増殖したが、TE671細胞では増殖しなかった。

Report

(2 results)
  • 2011 Annual Research Report
  • 2010 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All 2011 2010

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (4 results)

  • [Journal Article] Isolation of koala retroviruses from koalas in Japan2011

    • Author(s)
      Miyazawa T, Shojima T, Yoshikawa R, Ohata T.
    • Journal Title

      Journal of Veterinary Medical Science

      Volume: 73 Pages: 65-70

    • NAID

      40018701684

    • Related Report
      2010 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] コアラレトロウイルスの解析2011

    • Author(s)
      星野重樹、宮沢孝幸
    • Organizer
      第17回日本野生動物医学会大会
    • Place of Presentation
      大阪府立大学
    • Year and Date
      2011-10-01
    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Presentation] 有袋類レトロウイルスを利用した感染抵抗性因子の同定と解析2011

    • Author(s)
      星野重樹、宮沢孝幸
    • Organizer
      第152回日本獣医学会学術集会
    • Place of Presentation
      大阪府立大学(大阪)
    • Year and Date
      2011-09-20
    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Presentation] Identification of a novel koala endogenous retrovirus2011

    • Author(s)
      Shigeki Hoshino, Takuji Ohata, Tayayuki Shojima, Takayuki Miyazawa
    • Organizer
      XV International Congress of Virology
    • Place of Presentation
      札幌コンベンションセンター(北海道)
    • Year and Date
      2011-09-15
    • Related Report
      2011 Annual Research Report
  • [Presentation] コアラ内在性レトロウイルスの解析2010

    • Author(s)
      星野重樹、大畑拓司、庄嶋貴之、宮沢孝幸
    • Organizer
      第58回日本ウイルス学会
    • Place of Presentation
      徳島市(招待講演)
    • Year and Date
      2010-11-09
    • Related Report
      2010 Annual Research Report

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Published: 2010-08-23   Modified: 2016-04-21  

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