| Project/Area Number |
22K07091
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 49060:Virology-related
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| Research Institution | Kawasaki Medical School |
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Principal Investigator |
三浦 未知 川崎医科大学, 医学部, 助教 (70912369)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥520,000 (Direct Cost: ¥400,000、Indirect Cost: ¥120,000)
Fiscal Year 2023: ¥520,000 (Direct Cost: ¥400,000、Indirect Cost: ¥120,000)
Fiscal Year 2022: ¥3,120,000 (Direct Cost: ¥2,400,000、Indirect Cost: ¥720,000)
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| Keywords | HTLV-1 / 天然変性タンパク質 / RNA FISH / マルチプレックス / インフルエンザウイルス / RNA核外輸送 / heterogeneity / ATL / クロマチン / 蛍光イメージング |
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| Outline of Research at the Start |
ヒト白血病ウイルスHTLV-1は宿主ゲノムに組み込まれて潜伏感染する。感染者の体内では数千もの感染細胞クローンが存在するが、腫瘍化するのはこの中のごく一部である。本研究ではHTLV-1が組み込まれた部位の宿主クロマチン環境が発がんに重要であると考え、新規の蛍光in situ検出系を開発し（１）ウイルス組み込み部位のクロマチン動態、（２）ウイルスDNAのメチル化、（３）HTLV-1および宿主遺伝子発現の関連を解析する。これにより感染細胞を腫瘍化に導く宿主クロマチン環境と、そこに置かれたHTLV-1遺伝子発現の特徴を抽出し、発がん機序の解明や、予防・診断・治療法の開発につなげる。
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヒトT細胞白血病ウイルスHTLV-1はヒトに対して病原性を持つレトロウイルスである。主にTリンパ球に感染し、長い潜伏期間の後に白血病(ATL)や下腿の麻痺(HAM)などを発症させる。病原性に重要なウイルスタンパク質の一つがTaxであり、Taxは多様な宿主因子と相互作用するが、Taxの立体構造は不明である。我々の興味はTaxが多様な宿主因子と相互作用するメカニズムである。今年度はTaxの組み換えタンパク質の発現と精製を行い、in vitroにおけるTaxの性質について調べた。標準的な生化学的条件においてTaxは不溶性であり、可溶化にはGSTなどのタグタンパク質が必要であった。カラムからの溶出やプロテアーゼによるタグタンパク質の切断が標準的な方法ではうまくいかず、工夫を要することが分かった。Taxはin vitroで解析するには扱いにくいタンパク質であるが、裏を返せば非常に興味深い性質を持つと思われる。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
扱う組み換えタンパク質が可溶化せず、工夫に時間を要したため。
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| Strategy for Future Research Activity |
タグタンパク質無しでTax複合体を可溶化し、溶液中におけるTax複合体の構造解析を目指す。
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