ALK陽性未分化大細胞リンパ腫におけるALK阻害剤耐性の機序解明と新規治療の開発
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22K07821
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 52050:Embryonic medicine and pediatrics-related
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
深野 玲司 山口大学, 大学院医学系研究科, 准教授 (00403676)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
加藤 格 京都大学, 医学研究科, 助教 (10610454)
水上 洋一 山口大学, 大学研究推進機構, 教授 (80274158)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2023: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
Fiscal Year 2022: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
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| Keywords | ALK陽性未分化大細胞リンパ腫 / 未分化大細胞リンパ腫 / ALK陽性 / ALK阻害薬 / 遺伝子解析 / 悪性リンパ腫 |
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| Outline of Research at the Start |
小児・思春期に好発するAnaplastic lymphoma kinase (ALK) 陽性未分化大細胞リンパ腫 (ALCL) ではALK融合遺伝子よりリンパ腫細胞の増殖が生じる。再発・難治性ALK陽性ALCLではALK阻害剤の有効性が報告されているが、約30%の症例で耐性が認められる事が報告されている。ALK陽性ALCLがALK阻害剤への耐性を示すメカニズムは明らかになっていない。本研究では、ALK阻害剤であるクリゾチニブおよびアレクチニブを投与したALK陽性ALCL症例のリンパ腫検体を用いて遺伝子解析を行い、ALK阻害剤に対する耐性メカニズムの解明と新規治療法の開発を目指す。
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| Outline of Annual Research Achievements |
1. 「再発又は難治性ALK陽性未分化大細胞リンパ腫患者を対象としたCH5424802の第II相試験(アレクチニブ医師主導治験)」に参加した小児・成人のうち、腫瘍 の保存検体が確保できた9症例から収拾したリンパ腫生検組織(パラフィン包埋ブロック;FFPE)から腫瘍細胞のDNAを抽出し、次世代シーケンサーによるアンプリコンシーケンス解析および前ゲノム解析を行った。
2. アレクチニブを投与中に再発 を認めた際に腫瘍組織生検を実施した1症例において、アレクチニブが結合するチロシンキナーゼドメイン内に十分なread countを有するアミノ酸変異を伴う遺 伝子変異を認めた。この変異のVAFは24%であり、read countとともに適正に解析が行われていることを示していると判断した。この変異とALK阻害薬の感受性に 関する報告はこれまでになく、新しい知見である可能性が考えられた。
3. 2の遺伝子変異を有するNPM:ALK融合遺伝子のプラスミドを合成した。このプラスミドをBa/F3細胞に遺伝子導入する準備を整え、遺伝子導入実験を開始した。
4. アレクチニブを含む薬剤耐性および腫瘍細胞播種に関わる遺伝子異常を解明することを目的として、生検腫瘍組織を用いて全ゲノム解析とRNA-seqを実施し、診断時に腫瘍播種を認める症例に共通する遺伝子異常を同定した。この遺伝子変異はALK陽性肺癌においても薬剤耐性に関わることが報告されており、ALK陽性ALCLにおいても薬剤耐性や播種に関与している可能性が考えられる。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
アレクチニブ耐性に関わると考えられる遺伝子変異を同定し、その遺伝子変異を有するプラスミドを合成した。遺伝子導入実験の体制を整え、遺伝子導入実験を開始している。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後はALK遺伝子に付加的変異を遺伝子導入したBa/F3細胞を用いて、サイトカイン依存性試験や薬剤感受性試験を行い、当該の遺伝子変異がアレクチニブ耐性の原因であることを証明する。
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Report
(2 results)
Research Products
(1 results)
