| Project/Area Number |
22K08358
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 53040:Nephrology-related
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
安達 政隆 熊本大学, 病院, 准教授 (90398206)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
向山 政志 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 教授 (40270558)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
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| Keywords | セリンプロテアーゼ / 水利尿 / 水チャネル / バゾプレッシン / セリンプロテアーゼ阻害薬 |
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| Outline of Research at the Start |
SDラットにおいてセリンプロテアーゼ阻害薬メシル酸カモスタット(CM)を投与し、尿量や体重の変化、血液・尿生化学検査を施行し、尿濃縮に関連する血中および尿中各種パラメーターを調べ、CMの水利尿作用について検討する。SDラットにおいてCM投与による腎皮質集合尿細管での水チャネル(AQP)およびセリンプロテアーゼ(SP)の各種mRNA発現量を定量的に評価し、尿および尿exosome中のSP蛋白発現量について検討する。さらにトランスクリプトーム解析、プロテオーム解析を行い、尿濃縮に関与するSPの同定のみならず、新規と既知の転写産物ならびに蛋白を同定し、SPが関与する尿濃縮メカニズムについて検討する。
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| Outline of Annual Research Achievements |
Sprague-Dawley (SD)ラットにおける1-デアミノ-8-D-アルギニンバソプレッシン（DDAVP）投与下でのメシル酸カモスタット(CM)による腎組織および尿エクソソーム中の水チャネルAQP1～4の各種mRNAや蛋白発現および腎皮質集合尿細管のAQP2局在の変化について下記の通り検討した。
6週齢雄性SDラットを (1)コントロール群(n=4)と(2)DDAVP群（浸透圧ミニポンプを使用して20ng/hrの投与量で皮下注）(n=4)および(3)CM（2ペレット）+ DDAVP群 (n=4)の3群に分け、5日目に24時間蓄尿・採尿した後、血液と腎臓のサンプルを回収し、解析したところ、CMによる多尿と多飲はDDAVP投与により消失した。腎臓でのAQP2発現はDDAVP投与の2群で増加した。さらに、CMによる尿中エクソソームAQP2の減少は、DDAVPによりコントロール群と同程度まで回復した。このことから、CMはバソプレシンによるAQP2の活性化を障害しており、この作用はDDAVP負荷によりキャンセルされると考えられた。
現在、SDラットにおけるCM投与量の違いによる腎組織および尿エクソソーム中のAQP1～4の各種mRNAや蛋白発現および腎皮質集合尿細管のAQP2局在の変化について、6週齢雄性SDラットを (1)コントロール (n=4)、(2)CM 1 (1ペレット/ラット、30 mg/kg/日、n=4)、(3)CM 2 (2ペレット/ラット、60mg/kg/日、n=4)および(3)CM3 (3ペレット/ラット、90 mg/kg/日、n=4)の4群に分け、 0、1、3、5日目に蓄尿・採尿し、血液と腎臓のサンプルを得るために7日目にラットを屠殺し、検討している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
2023年度の研究計画通りに実験を遂行でき、結果についても解析できている。
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| Strategy for Future Research Activity |
現在の研究計画に基づいて実験ならびに結果解析を遂行する。
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Report
(2 results)
Research Products
(3 results)
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[Presentation] Serine protease inhibition exerts aquaretic effects and decreases urinary exosomal AQP2 levels2022
Author(s)
Yutaka Kakizoe, Yasunobu Iwata, Terumasa Nakagawa, Qinyuan Deng, Masataka Adachi, Yoshikazu Miyasato, Miyuki Nakagawa, Yu Nagayoshi, Kayo Nishiguchi, Yuki Narita, Yuichiro Izumi, Takashige Kuwabara, and Masashi Mukoyama
Organizer
第29回国際高血圧学会
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Int'l Joint Research
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