自己免疫疾患の病変部位における自己抗体の産生機構の解明

Research Project

Project/Area Number	22K08528
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 54020:Connective tissue disease and allergy-related
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	竹下勝慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師 (10571135)
Project Period (FY)	2022-04-01 – 2025-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help	¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000) Fiscal Year 2024: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000) Fiscal Year 2023: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000) Fiscal Year 2022: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Keywords	シェーグレン症候群 / 抗ARS抗体症候群 / 自己抗体 / 肺胞洗浄液 / 唾液腺 / 自己免疫疾患 / B細胞
Outline of Research at the Start	本研究では自己免疫疾患において認められる自己抗体の出現機構を詳細に調べることで、なぜ自己免疫が起こるのかを探索する。抗ARS抗体症候群とシェーグレン症候群の2つの疾患の病変部位の組織検体（肺胞洗浄液、筋組織、唾液腺など）を収集し、その中に含まれる免疫細胞をシングルセルレベルで詳細に解析し、自己に反応している細胞の中でどのような遺伝子が働いているのかを調べ、なぜ自己に反応する細胞が出てくるのかを明らかにする。
Outline of Annual Research Achievements	本研究は2疾患を対象にして自己抗体が出現する機構の解明を目指すものである。1つは抗Jo-1抗体、抗PL-7抗体などの別々の自己抗体が出現する一方、共通の筋/肺/皮膚症状を呈する抗ARS抗体症候群であり、もう1つは抗SSA抗体と抗セントロメア抗体という背景病態が異なる2系統の自己抗体が出現するシェーグレン症候群である。本年度の進捗は以下の通り。抗ARS抗体症候群においては、肺胞洗浄液検体および唾液腺検体から200種類以上の抗体を作製し、詳細に反応性と抗体の成熟過程における体細胞変異の影響、抗体のエピトープの分布等を統合的に解析し、学会発表、論文投稿を行っている。同時に少数例ながら筋生検検体由来の抗体作製を進めている。付随して、病変局所の抗体解析用に準備した自己抗原ライブラリを用いて、血清における迅速な自己抗体検出系の構築した。シェーグレン症候群については、20症例以上の唾液腺のシングルセル免疫・遺伝子発現ライブラリを取得し、バイオインフォマティクス解析を行っている。細胞クラスター毎の発現遺伝子から高生細胞種のアノテーションを行い、いくつかの抗原は免疫染色によって発現を確認した。それぞれのクラスターで特徴的な遺伝子・パスウェイを複数同定し、抗体種毎の違いに着目して解析を進行中である。また、得られたBCR配列から各症例の代表的なBCRの抗体化を進めており、疾患特異的自己抗体がどの程度エンリッチしているのかを検討する予定としている。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason ほぼ計画通りに進捗しているため。
Strategy for Future Research Activity	引き続き精力的に解析を進める。自己免疫疾患の病変組織検体の入手機会は非常に限られるものがあるため、計画に無い疾患や組織であっても、貴重な組織検体を入手できる機会があれば積極的に収集し解析対象としていきたい。