ヒト大動脈解離におけるシングルセルRNAシークエンスによる成因解析

Research Project

Project/Area Number	22K08935
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 55030:Cardiovascular surgery-related
Research Institution	Kobe University
Principal Investigator	岡田健次神戸大学, 医学研究科, 教授 (90284356)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	井上大志神戸大学, 医学部附属病院, 助教 (50868487) 山中勝弘神戸大学, 医学研究科, 講師 (70729384) 江本拓央神戸大学, 医学研究科, 医学研究員 (80855023) 山下智也神戸大学, 医学部附属病院, 教授 (90437468)
Project Period (FY)	2022-04-01 – 2025-03-31
Project Status	Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help	¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000) Fiscal Year 2024: ¥650,000 (Direct Cost: ¥500,000、Indirect Cost: ¥150,000) Fiscal Year 2023: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000) Fiscal Year 2022: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
Keywords	大動脈解離 / シングルセルRNAシークエンス
Outline of Research at the Start	大動脈解離の発生機序は未解明であり、治療法も発症後早期の緊急手術が選択され、新規の予防法および進展抑制法の開発が急務である。本研究の目的は、ヒト大動脈解離手術サンプルの単一細胞遺伝子発現解析を行い、病変部の炎症細胞と血管細胞の単一細胞ごとの遺伝子発現を調査することで、大動脈解離発生メカニズムの一端を解明することである。解離病変に特異的な遺伝子発現から関連分子を特定し、蛋白レベルでの解析も加えて病態との関係を検証する。新規治療標的の可能性のある炎症細胞とその関連分子に対して動物モデルによる介入実験を行い検証する。
Outline of Annual Research Achievements	昨年度までに施行したシングルセルRNAシークエンス解析をもとにIL1B陽性マクロファージと大動脈解離の発生との相互関係を検証した。BAPNとAngiotensin2により作成したマウス大動脈解離モデルに対してIL-1β抗体を投与した。それぞれ14匹ずつに期間を分けて50マイクログラム、200マイクログラムを一週間のうち2回投与して2週間後の大動脈解離発生をIgG isotype controlを投与した群と比較検討した。50マイクログラム投与群では有意な差を認めなかったが、200マイクログラム/ twice a weekで投与した群ではcontrol群と比べて90% vs 60%と有意に生存率の向上がみられた。期間中に生存したマウスの大動脈を取り出し、組織学的な発生メカニズムを検証すると、組織学的に大動脈解離が発生していないマウスにおいても、IL-1β抗体の投与によりelastin degradationを抑制していることがわかった。上記を踏まえ、研究論文を作成し投稿中である。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason 昨年までにシングルセル解析を概ね終了できており、検証実験に十分な時間をかけることができたため。
Strategy for Future Research Activity	研究論文を投稿しており、査読者によって指摘された追加実験を引き続き継続する。