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脂質ラフトのバイオイメージングと電気生理学的手法による全身麻酔薬の作用機序研究

Research Project

Project/Area Number 22K09062
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 55050:Anesthesiology-related
Research InstitutionHokkaido University

Principal Investigator

長谷 由理  北海道大学, 大学病院, 助教 (20626121)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 舩橋 誠  北海道大学, 歯学研究院, 教授 (80221555)
長谷部 晃  北海道大学, 歯学研究院, 教授 (90281815)
Project Period (FY) 2022-04-01 – 2025-03-31
Project Status Granted (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥4,160,000 (Direct Cost: ¥3,200,000、Indirect Cost: ¥960,000)
Fiscal Year 2024: ¥390,000 (Direct Cost: ¥300,000、Indirect Cost: ¥90,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2022: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
Keywords全身麻酔薬 / 作用機序 / 脂質ラフト / バイオイメージング / パッチクランプ法 / ATPase
Outline of Research at the Start

近年、全身麻酔薬の作用の場は生体膜の一部を構成する脂質ラフトと考える説が登場し、研究が進められている。研究がさらに進むとリピド説とタンパク説が融合され、全身麻酔薬の作用機序が統一されると考えるに至った。
本研究では、バイオイメージング技術により生細胞の脂質ラフトに対する全身麻酔薬の影響を可視化して解析し、パッチクランプ法により、全身麻酔薬の脂質ラフトに対する作用によりニューロンの興奮性が調節されることを明らかにする。また、脂質ラフトに存在するNa,K-ATPaseやCa,Mg-ATPaseに対する全身麻酔薬の作用を比較し、脂質の重要性について検討する。

Outline of Annual Research Achievements

全身麻酔薬の作用の場が脂質ラフトであると仮定し、全身麻酔薬による脂質ラフトの流動性や構造の変化があることを生細胞で可視化することを目標に、研究を進めた。
バイオイメージングの専門家の指導・協力を得て、CHO-K1のGPI-HT安定発現株の培養を開始した。2023年7月に大阪大学で開催された第34回細胞生物学ワークショップに参加し、顕微鏡の基礎からイメージングまでの研修を受けた。
8月から北海道大学ニコンイメージングセンターにて、共焦点レーザー顕微鏡の観察技術を学び、光褪色後蛍光回復法(FRAP)法の基礎的な観察訓練を行った。また、文部科学省・科学研究費助成事業の先端バイオイメージング支援プラットフォーム(ABiS)への申請が採択され、研究支援を受けることができた。
2024年1月から、実際に生細胞に麻酔薬を作用させて、FRAP法にて観察をおこなったところ、プロポフォールにより脂質の流動性が上昇することが示唆される結果が得られた。現在、共同研究者・研究協力者と結果の詳細な解析を進めているところである。
脂質ラフトに存在する酵素であるNa,K-ATPase及びCa,Mg-ATPase活性に対するプロポフォールの作用に関する研究を行い、「Neuro-2a細胞のATPase活性に対するpropofolの作用」として、第51回日本歯科麻酔学会学術集会(長崎)においてポスター発表を行った。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

医局の新体制のもと臨床業務に従事する時間が長く、研究時間の確保が困難であった。年度の後半には、ニコンイメージングセンターにおける研究を進展させることができたが、予定より進行は遅れている。

Strategy for Future Research Activity

イメージングを行うための準備と実際の観察までを行ったため、データの解析処理を進める。これを第一歩として、異なる条件の下での観察や、各種麻酔薬による生細胞への影響を検討すること、またFRAP法を今後の研究の一つの手法として応用していきたい。
イメージングの研究を進めながら、共同研究者との電気生理学的手法による全身麻酔薬の作用機序研究を開始する。
また、これまで継続して行ってきた脂質ラフトに存在するATPase、特にNa,K-ATPaseとCa,Mg-ATPase活性に対する麻酔薬の作用について検討を進める。さらに、培養細胞の増殖・生存に対する麻酔薬の作用も定量的に解析する予定である。

Report

(2 results)
  • 2023 Research-status Report
  • 2022 Research-status Report
  • Research Products

    (5 results)

All 2023 2022

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 1 results) Presentation (2 results)

  • [Journal Article] Anesthetic Management for a Patient with Smith-Magenis Syndrome2023

    • Author(s)
      置 地 竜 一、詫 間 滋、桜 井 優 弥、長 谷 由 理、石 田 義 幸、藤 澤 俊 明
    • Journal Title

      Journal of Japanese Dental Society of Anesthesiology

      Volume: 51 Issue: 1 Pages: 10-12

    • DOI

      10.24569/jjdsa.51.1_10

    • ISSN
      2433-4480
    • Year and Date
      2023-01-15
    • Related Report
      2022 Research-status Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Suspected Accidental Infiltration of Rocuronium During General Anesthesia Induction: A Case Report2023

    • Author(s)
      Sakurai Yuya、Shibuya Makiko、Okiji Ryuichi、Hase Yuri、Hojo Takayuki、Kimura Yukifumi、Fujisawa Toshiaki
    • Journal Title

      Anesthesia Progress

      Volume: 70 Issue: 3 Pages: 116-119

    • DOI

      10.2344/anpr-70-02-01

    • Related Report
      2023 Research-status Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Anesthetic management of a pediatric patient with Dravet syndrome: A case report.2023

    • Author(s)
      Hase Y, Takuma S, Hojo T, Nitta Y, Kamekura N.
    • Journal Title

      Medicine

      Volume: 102 Issue: 4 Pages: 1-4

    • DOI

      10.1097/md.0000000000032709

    • Related Report
      2022 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] Neuro-2a細胞のATPase活性に対するpropofolの作用2023

    • Author(s)
      長谷 由理, 城戸 幹太
    • Organizer
      第51回日本歯科麻酔学会学術集会(長崎)
    • Related Report
      2023 Research-status Report
  • [Presentation] シンポジウム :わからなくなるわけがわかるシンポジウム「コナン君の麻酔銃の中身は何?」2022

    • Author(s)
      長谷由理
    • Organizer
      麻酔メカニズム研究会2022(Re-born 3rd)
    • Related Report
      2022 Research-status Report

URL: 

Published: 2022-04-19   Modified: 2024-12-25  

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