| Project/Area Number |
22K09507
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56030:Urology-related
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
鑪野 秀一 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 准教授 (30624655)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
坂口 大 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 助教 (70779008)
榎田 英樹 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 教授 (80347103)
吉野 裕史 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 講師 (90642611)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2023)
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| Budget Amount *help |
¥3,900,000 (Direct Cost: ¥3,000,000、Indirect Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2024: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000)
Fiscal Year 2023: ¥1,820,000 (Direct Cost: ¥1,400,000、Indirect Cost: ¥420,000)
Fiscal Year 2022: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
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| Keywords | エクソソーム / 腎細胞癌 / マイクロRNA / microRNA-1 / MYO15A / 腎癌 |
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| Outline of Research at the Start |
進行性腎細胞癌の治療戦略は免疫チェックポイント阻害薬（ICI）の出現により大きく変化した。しかしながら従来の血管新生阻害剤に代表される分子標的治療薬は一次治療においても ICI との併用が高い奏効率を示すことが示され、進行性腎細胞癌の中心的役割を担っている。このような背景から治療抵抗性腎細胞癌における分子標的治療薬に対する薬剤耐性獲得は克服すべき喫緊の課題となっている。本研究はエクソソーム解析を起点として治療抵抗性腎細胞癌における分子標的治療薬への耐性獲得機序を明らかにし、新規治療戦略や治療効果予測マーカーを探索するための基礎データを収集する提案である。
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| Outline of Annual Research Achievements |
今年度は、エクソソームmiR-1の機能と、エクソソームがRCCの腫瘍メーカーを構成する可能性について検討した。まず、細胞ライセートやヒト血清からエクソソームをスピンカラム法で採取する方法を確立した。次に、Nanosightナノ粒子トラッキング解析とエクソソームマーカーCD63を用いたウェスタンブロット解析を用いてエクソソームを評価した。PKH26で標識したエクソソームがレシピエント細胞と融合することを確認した。さらに、miR-1トランスフェクション細胞由来のエクソソームで処理したRCC細胞では、miR-1の発現が上昇した。機能解析により、エキソソームmiR-1は、対照治療と比較して細胞の増殖、遊走、浸潤を有意に阻害することが示された。RCCのTCGAデータベースを用いた解析では、臨床RCC検体ではmiR-1発現が正常腎臓検体と比較して有意にダウンレギュレーションされており、miR-1発現が低い患者は高発現の患者と比較して全生存期間が短いことが示された。さらに、RNA配列解析により、いくつかの遺伝子の発現レベルがエクソソームmiR-1への曝露によって変化していることが示された。TCGAデータベースを用いた解析により、MYO15Aの高発現はRCCの転帰不良と関連していることが示された。さらに、臨床患者の血清由来のエクソソームのRT-qPCR解析では、RCC患者ではMYO15Aが健常対照と比較して有意にアップレギュレーションされていることが示された。この研究は、エクソソームmiR-1による治療がRCCの治療に有効なアプローチであるとともにエキソソームMYO15AはRCCの診断腫瘍マーカーとなる可能性が示唆された。さらに附随研究としてスニチニブ耐性腎細胞癌細胞株においてsecretogranin II がHIF１を介した標的遺伝子となり得ることを見出した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
エクソソーム内マイクロRNAの有用性を示す論文を作成できた。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後、さらにエクソソーム内の他のマイクロRNAに着目して、研究を進めていきたい。
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