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Combination of fluorescence and scattered light measurements for rapid determination of cell-derived microparticles.

Research Project

Project/Area Number 22K19886
Research Category

Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)

Allocation TypeMulti-year Fund
Review Section Medium-sized Section 90:Biomedical engineering and related fields
Research InstitutionHokkaido University

Principal Investigator

Kinjo Masataka  北海道大学, 先端生命科学研究院, 名誉教授 (70177971)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 北村 朗  北海道大学, 先端生命科学研究院, 講師 (10580152)
Project Period (FY) 2022-06-30 – 2024-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2023)
Budget Amount *help
¥6,500,000 (Direct Cost: ¥5,000,000、Indirect Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2023: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,000,000、Indirect Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 2022: ¥3,900,000 (Direct Cost: ¥3,000,000、Indirect Cost: ¥900,000)
Keywords蛍光測定 / 光散乱測定 / 相互相関関数 / 微粒子 / 蛍光微粒子 / 相関関数 / 散乱測定 / 相関分光
Outline of Research at the Start

本研究では、細胞外に放出される多彩な構造と幅広い分子量分布を持つ分子集合体を対象とした散乱光による網羅的検出と蛍光による特異的検出を統合した新規定量的検出法の確立を目指す。
特にそのような分子集合体の中でもガン診断の指標等として注目されている抗原提示エクソソームと呼ばれるものを対象として、その定量的検出・同定法の確立を通してその性能を実証し、新規細胞由来微粒子検出法としての可能性を探査する

Outline of Final Research Achievements

Membrane-free organelles (membraneless organelles ) and protein condensates based on liquid-liquid phase separation phenomena have been considered as transmitters of dementia and neurodegenerative diseases. When fluorescence-labelled antibodies are used for their detection, particles with the corresponding surface antigens can be detected with high sensitivity, but others remain undetected and invisible. Scattering, on the other hand, gives a profile of the whole particle, but does not allow determination of particles with specific functions
The Principal Investigator focused on the fact that Fluorescence Correlation Spectroscopy (FCS), like light scattering, is a method that reflects the dynamic properties derived from the diffusive motion of particles and molecules, and investigated the possibility of combining scattering and fluorescence measurements. The possibility of combining scattering and fluorescence measurements was studied.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

生体由来の微粒子やタンパク質凝集体の測定方法には大きく蛍光測定と散乱測定がある。蛍光測定は特異性が高いが微弱光測定であり,試料や測定に繊細な調整が必要である。一方,散乱測定は特異性は低いものの,散乱光シグナルは蛍光比較して強く検出はやや容易であり,多くの粒子の情報を得ることが可能である。この二つの同時測定を融合することで,特異的なシグナルと網羅的な情報を得ることで,新規の生体微粒子解析法の開発を目指した。両方測定可能な励起光を見つけることは困難であったが,同じ装置の光路で測定が可能であることは示すことができた。今後,試料の調整条件などを検討することで,同時測定が達成されると考える。

Report

(3 results)
  • 2023 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2022 Research-status Report
  • Research Products

    (16 results)

All 2024 2023 2022 Other

All Int'l Joint Research (3 results) Journal Article (3 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 3 results) Presentation (8 results) (of which Invited: 3 results) Remarks (2 results)

  • [Int'l Joint Research] スウェーデン王立工科大学/カロリンスカ研究所(スウェーデン)

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  • [Int'l Joint Research] Institute of Physics(セルビア)

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  • [Int'l Joint Research] スウェーデン王立工科大学応用物理学部(スウェーデン)

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  • [Journal Article] Intracellular Conformation of Amyotrophic Lateral Sclerosis-Causative TDP-432023

    • Author(s)
      Kitamura Akira、Yuno Sachiko、Kawamura Rintaro、Kinjo Masataka
    • Journal Title

      International Journal of Molecular Sciences

      Volume: 24 Issue: 6 Pages: 5513-5513

    • DOI

      10.3390/ijms24065513

    • Related Report
      2022 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Trans-cis isomerization kinetics of cyanine dyes reports on the folding states of exogeneous RNA G-quadruplexes in live cells2023

    • Author(s)
      Kitamura Akira、Tornmalm Johan、Demirbay Baris、Piguet Joachim、Kinjo Masataka、Widengren Jerker
    • Journal Title

      Nucleic Acids Research

      Volume: 51 Issue: 5 Pages: e27-e27

    • DOI

      10.1093/nar/gkac1255

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      2022 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Increased intracellular crowding during hyperosmotic stress2022

    • Author(s)
      Kitamura Akira、Oasa Sho、Kawaguchi Haruka、Osaka Misato、Vukojevic Vladana、Kinjo Masataka
    • Journal Title

      bioRxiv (preprint)

      Volume: - Pages: 11834-11834

    • DOI

      10.1101/2022.12.30.522363

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  • [Presentation] 偏光蛍光相関分光法の開発と今後の進展2024

    • Author(s)
      金城 政孝
    • Organizer
      第19回バイオオプティクス研究会
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  • [Presentation] 蛍光相関分光法の開発と今度の進展2024

    • Author(s)
      金城政孝
    • Organizer
      新領域開発課題 「一分子の科学」研究報告会
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    • Author(s)
      Masataka Kinjo, Riku Ando, Akira Kitamura
    • Organizer
      第61 回日本生物物理学会年会 2023 年11月16日
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      Ai Fujimoto , Masataka Kinjo , Akira Kitamura
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      Riku Ando , Johtaro Yamamoto, Akira Kitamura , Nori Nakai , Sumio Terada , Masataka Kinjo
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      第60回日本生物物理学会年会
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      Yuta Hamada , Masataka Kinjo , Akira Kitamura
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      第60回日本生物物理学会年会
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      第60回日本生物物理学会年会
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      金城政孝
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      第18 回バイオオプティクス研究会
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    • URL

      https://altair.sci.hokudai.ac.jp/infmcd/publist/pub_j.html

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    • URL

      https://www.hokudai.ac.jp/news/2023/01/rnarna.html

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Published: 2022-07-05   Modified: 2025-01-30  

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