Analysis of the protein-protein interaction dynamics of EGFR on the plasma membrane using proximity biotinylation enzyme

• Project/Area Number: 24H00560
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 一般
• Review Section: Medium-sized Section 43:Biology at molecular to cellular levels, and related fields
• Research Institution: Ehime University
• Principal Investigator: 澤崎 達也 愛媛大学, プロテオサイエンスセンター, 教授 (50314969)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小迫 英尊 徳島大学, 先端酵素学研究所, 教授 (10291171) ; 土方 敦司 東京薬科大学, 生命科学部, 准教授 (80415273)
• Project Period (FY): 2024-04-01 – 2028-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2024)
• Budget Amount: ¥47,450,000 (Direct Cost: ¥36,500,000、Indirect Cost: ¥10,950,000); Fiscal Year 2025: ¥12,610,000 (Direct Cost: ¥9,700,000、Indirect Cost: ¥2,910,000); Fiscal Year 2024: ¥11,830,000 (Direct Cost: ¥9,100,000、Indirect Cost: ¥2,730,000)
• Keywords: EGFR / インタラクトーム / 近位依存性ビオチン標識 / 薬剤応答 / 相互作用ダイナミクス

Outline of Research at the Start

申請者らが独自に開発してきた近位依存性ビオチン標識酵素AirIDを用いて、肺がん等の多くのがん細胞で増殖に関与するEGFR（上皮成長因子受容体）を対象に、リガンド結合に影響しない抗EGFR抗体に融合した分子（①EGFR-FabID）、EGFRのC末に融合した②EGFR-AirID、リガンドEGFに融合した③AirID-EGFの３種類のAirID融合分子を構築し、リガンド応答やEGFRチロシンキナーゼ阻害剤処理での変動解析と共に、質量分析によるタンパク質およびビオチン化部位の同定によりEGFRの細胞内・細胞外を区別したタンパク質間相互作用を解析する。