| Project/Area Number |
24K13198
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 57070:Developmental dentistry-related
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
寺尾 文恵 九州大学, 歯学研究院, 助教 (10510018)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高橋 一郎 九州大学, 歯学研究院, 教授 (70241643)
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| Project Period (FY) |
2024-04-01 – 2027-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000)
Fiscal Year 2026: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2025: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
Fiscal Year 2024: ¥2,080,000 (Direct Cost: ¥1,600,000、Indirect Cost: ¥480,000)
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| Keywords | 顎顔面形態 / ヒストンアセチル化 / miRNA / ヒストン修飾 / 胎生期 |
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| Outline of Research at the Start |
本研究では、顎顔面領域の発生におけるエピジェネティック制御機構に着目し、顎顔面領域におけるmiRNA-ヒストン修飾相互作用による形態制御メカニズムの解明を目指す。胎生期マウス第一鰓弓の下顎隆起を用いた高密度培養および器官培養において、HDAC阻害下において抽出したtotal RNAを用いたmiRNAマイクロアレイ解析により、HDACが制御するmiRNAを同定する。候補となったmiRNAを高密度培養および器官培養へ導入することにより、miRNAとHDACの相互作用による胎生期顎顔面形態形成の発現制御メカニズムを明らかにする。
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| Outline of Annual Research Achievements |
われわれは、胎生期における顎顔面のパターン形成制御機構の解明を試みてきた。これまで、胎生期マウス下顎隆起および下顎頭初期形成期において、miRNA-200aが間葉系細胞の増殖・分化を制御していることを明らかにしたまた、顎顔面領域の発生におけるエピジェネティック制御機構に着目し、ヒストン脱アセチル化酵素(Histone deacetylase, HDAC)の阻害は、下顎隆起細胞の増殖、下顎隆起のパターン形成を乱すことを確認した。そこで、本研究では、ヒストン脱アセチル化酵素とmiRNAの相互作用による顎顔面形態形成の制御機構が存在するという仮説のもとに、顎顔面領域におけるmiRNA-ヒストン修飾相互作用による形態制御メカニズムの解明を目指す。
まず、胎生期マウス胎齢10日のマウス第一鰓弓の下顎隆起において、ヒストン脱アセチル化酵素(Hdac)1およびHdac2の発現パターンを確認した。さらに、胎齢10日のマウスより摘出した下顎隆起を改良型 Trowell 法により器官培養する。アスコルビン酸含有の無血清 BGJb培地を用い、阻害剤を添加して培養を行い、経時的にtotal RNAを抽出した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
研究開始に先立ち、Hdac1およびHdac2のマウス第一鰓弓の下顎隆起における発現パターンの確認実験に時間を要したため。
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| Strategy for Future Research Activity |
初年度に行う予定であった下顎隆起由来細胞の高密度培養における阻害実験を行う。
胎齢10日のマウス胎仔より下顎隆起を摘出し、細胞を分散、スポット状に高密度で培養プレートに播種することで細胞凝集の状態を作り出し、軟骨分化を促す。10％FBS含有DMEM培地にて培養を行い、阻害剤を添加、total RNAを抽出する。
その後、高密度培養と期間培養で得られたサンプルから、miRNAマイクロアレイ解析を行うことにより、HDAC阻害剤で発現が変動するmiRNAの網羅的発現解析を行う。
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