| Project/Area Number |
24K18976
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Review Section |
Basic Section 53010:Gastroenterology-related
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
影本 開三 徳島大学, 病院, 特任助教 (60933356)
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| Project Period (FY) |
2024-04-01 – 2026-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2024)
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| Budget Amount *help |
¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000)
Fiscal Year 2025: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,000,000、Indirect Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 2024: ¥2,210,000 (Direct Cost: ¥1,700,000、Indirect Cost: ¥510,000)
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| Keywords | 大腸癌 / オルガノイド |
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| Outline of Research at the Start |
大腸癌は左右の局在により薬剤感受性や予後が異なることが報告されている。右側が予後不良とされ、治療ガイドラインにおいても薬剤選択の違いが記載されているが、その原因や機序の詳細は不明である。申請者らはこれまでに右側及び左側大腸癌患者よりヒト由来オルガノイドを樹立し、右側大腸癌オルガノイドは左側と比較し細胞増殖能および細胞浸潤能が高いことを示した。さらに右側大腸癌では左側大腸癌に比べてTIMP1が有意に高発現していることを見出した。本研究では多数の大腸癌由来オルガノイドを用いて、TIMP1経路を標的とした治療薬の有効性を検証し、これらの選択的阻害剤の臨床試験に向けた基盤研究を行う。
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、左右大腸癌の分子生物学的差異の解明を目的としている。左右大腸癌オルガノイドを用い、RT-PCRで細胞増殖に関わる遺伝子を解析することで、活性化されたpathwayを確認した上で、原因遺伝子をノックダウンし、大腸がんの細胞増殖、浸潤能を確認し、特異的な阻害剤を開発する研究である。これまでに左側及び右側大腸癌よりオルガノイドをそれぞれ4病変、計8病変のオルガノイドを作成樹立した。主要な30シグナル伝達経路を選び、それに関連した184遺伝子を解析したところ、左側に比較し右側においてFold change比が高い遺伝子から順番にS100P，DHH，SDC2，TIMP1，MSNが抽出された。これら5遺伝子のうち，mRNAの発現レベルが左右で統計学的に有意であったのはTIMP1のみであり、予備実験を裏付ける結果であった。次いで、Western blotにてTIMP1/FAK/Akt pathwayの構成因子が活性化されているのを確認した。今後はできる限りオルガノイド症例を増やし、右側大腸癌由来オルガノイドにTIMP1 shRNAを導入してTIMP1発現をノックダウンし、細胞増殖、浸潤能、薬剤抵抗性などが抑制されるかどうかを確認し、FAK inhibitorやAkt inhibitorなどの抑制効果を調べる予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
これまでに左側及び右側大腸癌よりオルガノイドをそれぞれ4病変、計8病変のオルガノイドを作成樹立した。臨床での大腸癌オルガノイド症例の集積が思わしくないが、研究はおおむね予定通り進行している。TIMP1が、統計学的に右側で優位であることが、確認され、Western blotにてTIMP1/FAK/Akt pathwayの構成因子が活性化されているのを確認した。
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| Strategy for Future Research Activity |
大腸癌症例は引き続き内科外科で連携しながら集積する。今後はできる限りオルガノイド症例を増やし、右側大腸癌由来オルガノイドにTIMP1 shRNAを導入してTIMP1発現をノックダウンし、細胞増殖、浸潤能、薬剤抵抗性などが抑制されるかどうかを確認し、FAK inhibitorやAkt inhibitorなどの抑制効果を調べる予定である。
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