細胞成長因子の遺伝子移入による発生機序の解析

• Project/Area Number: 63560255
• Research Category: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: 畜産学(含草地学)
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 小西 秀彦 東京大学, 農学部, 助手 (50153581)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 八木 慎太郎 東亜燃料工業, 研究所, 研究員 ; 塩田 邦郎 東京大学, 農学部, 助教授 (80196352) ; 高橋 迪雄 東京大学, 農学部, 教授 (30011943) ; 豊田 裕 東京大学, 医科研, 教授 (90050418)
• Project Period (FY): 1988
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1988)
• Budget Amount: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000); Fiscal Year 1988: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000)
• Keywords: マウス / 細胞成長因子 / TGF-β / EDF / 2細胞-ブロック / 遺伝子注入

Research Abstract

1 C57B/6系マウスの受精卵の雄性前核に、ヒトTGF-β遺伝子にSV-40のプロモターターを接続した組み換え遺伝子を注入した。注入が成功した46個の卵のうち、翌日までに2細胞期にまで発達したものは11個(23.9%)しかなかった。一方、ヒト成長ホルモン遺伝子を注入した卵では68%(51/75)が翌日2細胞になった。従ってTGF-β遺伝子注入による2細胞への発生阻害は、受精卵において合成されたTGF-βに起因していると考えられる。さらにTGF-β遺伝子を注入した卵を培養した培養液で無処理の1細胞受精卵を培養したところ、2細胞まで発達した卵が認められなかった(0/12)。以上より、マウス受精卵はTGF-β様物質のリセプターを有しており、TGF-β様の成長因子は初期発生に影響を与えると考えられる。
2 TGF-βと類似の構造を持つEDFを含む培養液で、BDF、C57B/6、ICRのマウスの受精卵を24時間培養したところ、ICRで2細胞への発生率が低下していた。ところがさらに培養時間を延長したところ3細胞以降へ発生したものは、対照群で5.4%(3/37)であるのに対し、EDF群では31.9%(15/47)で有意に高い値を示した。ICRはラットと同様、1細胞から培養すると発生が2細胞で中止する、いわゆる2Cell-ブロックが起きる系として知られており、本実験の結果からEDFには、2-Cellブロックを解除する働きがあると考えられる。また、1細胞から2細胞までの間にEDFと共に培養した卵で3細胞以降へと発生した卵は11.8%であるのに対し、2細胞に発達してからEDFを培養液中に入れた時は48.8%の卵が細胞以降へと発達した。したがって、EDFか2-Cellブロック解除の効果を発現する時期は2細胞に達してからであり、それ以前では卵の発生にむしろ悪い影響を与えると考えられる。