生細胞でのイメージングを基盤とするシリアの形成とタンパク質輸送機構の解明
Publicly Offered Research
Project Area | Cilium-centrosome system regulating biosignal flows |
Project/Area Number |
25113514
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Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
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Allocation Type | Single-year Grants |
Review Section |
Biological Sciences
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Research Institution | Kyoto University |
Principal Investigator |
中山 和久 京都大学, 薬学研究科(研究院), 教授 (40192679)
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Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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Project Status |
Completed (Fiscal Year 2014)
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Budget Amount *help |
¥11,700,000 (Direct Cost: ¥9,000,000、Indirect Cost: ¥2,700,000)
Fiscal Year 2014: ¥5,850,000 (Direct Cost: ¥4,500,000、Indirect Cost: ¥1,350,000)
Fiscal Year 2013: ¥5,850,000 (Direct Cost: ¥4,500,000、Indirect Cost: ¥1,350,000)
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Keywords | シリア / 小胞輸送 / ライブセル・イメージング / BBSome / 一次繊毛 / Rab / Arf / イメージング |
Outline of Annual Research Achievements |
外部シグナルのセンサーとして働く繊毛は、多様な生理現象に関与し、その異常はBardet-Biedl症候群(BBS)などの繊毛病の発症につながる。このような異常には、繊毛への選択的なタンパク質の輸送の異常がかかわる。BBSの原因遺伝子の産物により構成されるBBSome複合体は、繊毛へのタンパク質輸送にかかわる。本研究では、BBSomeの構築様式と機能の解明をめざして研究を行った。 1)新たに開発した抗GFP-Nanobodyを活用したタンパク質間相互作用解析法(visible immunoprecipitation assay; VIPアッセイと命名)によって、BBSomeの8つのサブユニット(BBS1, 2, 4, 5, 7, 8, 9, 18)すべての間の相互作用を調べ、BBSomeの構築様式の全体像を解明した。特に、これまではBBSomeのサブユニットかどうかも不明であったBBS18がBBSomeの必須成分であることを証明した。 2)低分子量GTPaseのArl6/BBS3が、BBS1とのみ相互作用することをVIPアッセイによって示した。 3)相互作用解析の結果をもとにして、さまざまな細胞内局在解析を行い、BBSomeはBBS4を起点にして、中心体近傍で構築されることを示した。 4)EGFP-BBS1を安定発現する細胞株を樹立し、基底小体近傍と繊毛内に局在することを示した。
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Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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Report
(2 results)
Research Products
(19 results)
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[Journal Article] Histamine synthesis is required for granule maturation in murine mast cells.2014
Author(s)
Nakazawa, S., Sakanaka, M., Furuta, K., Natsuhara, M., Takano, H., Tsuchiya, S., Okuno, Y., Ohtsu, H., Nishibori, M., Thurmond, R.L., Hirasawa, N., Nakayama, K., Ichikawa, A., Sugimoto, Y., and Tanaka, S.
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Journal Title
Eur. J. Immunol.
Volume: 44
Issue: 1
Pages: 204-214
DOI
Related Report
Peer Reviewed
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[Journal Article] Phospholipid Flippase Activities and Substrate Specificities of Human Type IV P-type ATPases Localized to the Plasma Membrane2014
Author(s)
Takatsu, H., Tanaka, G., Segawa, K., Suzuki, J., Nagata, S., Nakayama, K. and Shin, H.W.
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Journal Title
J. Biol. Chem
Volume: 289
Issue: 48
Pages: 33543-33556
DOI
NAID
Related Report
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Mitosis-Coupled, Microtubule-Dependent Clustering of Endosomal Vesicles around Centrosomes2013
Author(s)
Takatsu, H., Katoh, Y., Ueda, T., Waguri, S., Murayama, T., Takahashi, S., Shin, H.-W. &Nakayama, K.
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Journal Title
Cell Structure and Function
Volume: 38
Issue: 1
Pages: 31-41
DOI
NAID
ISSN
0386-7196, 1347-3700
Related Report
Peer Reviewed
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[Journal Article] ARF1 and ARF4 regulate recycling endosomal morphology and retrograde transport from endosomes to the Golgi apparatus2013
Author(s)
Nakai, W., Kondo, Y., Saitoh, A., Naito, T., Nakayama, K., and Shin, H.-W.
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Journal Title
Mol. Biol. Cell
Volume: 24
Issue: 16
Pages: 2570-2581
DOI
NAID
Related Report
Peer Reviewed
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