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核酸およびペプチドの超高選択的高感度蛍光プロ-ブ試薬の創製

研究課題

研究課題/領域番号 01460243
研究種目

一般研究(B)

配分区分補助金
研究分野 物理系薬学
研究機関九州大学

研究代表者

大倉 洋甫  九州大学, 薬学部, 教授 (00037574)

研究期間 (年度) 1989 – 1990
研究課題ステータス 完了 (1990年度)
配分額 *注記
6,800千円 (直接経費: 6,800千円)
1990年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
1989年度: 6,000千円 (直接経費: 6,000千円)
キーワード蛍光プロ-ブ / 蛍光試薬 / 核酸 / 核酸塩基 / ヌグレオシド / ヌクレオチド / ペプチド / トリプトファン / ヌクレオシド
研究概要

(1)アルコ-ルの蛍光ラベル化試薬 2ー(5ークロロホルミルー2ーオキサゾリル)ー5,6ーメチレンジオキシペンゾフラン(OMBーCOC1)が,ヌクレオシド及びヌクレオチドの5'ー水酸基の選択的蛍光ラベル化試薬に成り得ることを明らかにした.(2)1,2ービス(4ーメトキシフェニル)エチレンジアミン試薬が,過ヨウ素酸ナトリウム存在下,酸性条件でリボヌクレオシド及びそのヌクレオチドのリボ-スと反応し強い蛍光を発することを見い出し,ポストカラム誘導体化HPLCによるヒト赤血球中のリボヌクレオチドの高感度分析法を開発した.(3)4ーカルバモイルベンズアミジン試薬がデオキシリボ-スに対して選択的に強く発蛍
光することを見い出し,核酸塩基と糖部を塩酸加水分解することによって,プリンデオキシリボヌクレオシドおよびそのヌクレオチドの高選択的蛍光定量法を開発した.(4)グアニンに高選択的な蛍光試薬フェニルグリオキサ-ル(PGO)によりDNA 鎖中のグアニン含量を, クロロアセトアルデヒド蛍光試薬による同鎖中のアデニン含量をそれぞれ測定する方法により,二本鎖DNAの高感度定量法を開発した.(5)カテコ-ルアミンの蛍光試薬1,2ージフェニルエチレンジアミンが,過酸化水素存在下,ペルオキシダ-ゼ活性により,エピネフリンまたはアドレナロンと反応し強い蛍光を与えることを発見した.(6)これにより,DNAハイブリダイゼイションアッセイに於けるPVDFメンブランフィルタ-に吸着された DNAービオチンーアビジン複合体のペルオキシダ-ゼ活性の高感度検出法を開発した.(7)Nー末端にチロシン含有ペプチドの高選択的蛍光反応をHPLCのポストカラム蛍光反応システムに適用し,ラット脳組織に存在する7種類のオピオイドペプチド類の一斉定量法を開発した.(8)グアニン類の高選択的蛍光試薬であるPGOを用い,トリプトファンのみに強い蛍光を与える反応条件を見い出し,トリプトファンの新規蛍光定量法を開発した。

報告書

(3件)
  • 1990 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1989 実績報告書
  • 研究成果

    (18件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (18件)

  • [文献書誌] Yoshiko,Umegae: "High pertormance liguid chronatograylic deternination of ribonucleotides by postcolumn derivatigation involving oxidtion followed by fluresence reaction,and its analication human erythrocyte sample" Analytical sciences. 6. 519-522 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hitoshi Nohta: "Assay for peroxidase using 1.2ーdiaryLethylenediamines and catechol compounds as tluorogenic substrates" Analytical Sciences.

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] GuoーQing Zhang: "Determination of seven opioid peptides in rat brain by high performance liguid chromatography with onーline postcolumn fluorescence derivatization" Analytical Sciences. 6. 671-676 (1990)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hiroaki Nagaoka: "2ー(5ーchloro carbonylー2ーoxayolyl)ー5ー,6ーmethylenedioxybengo furan as tluorescence derivatigation reagent for nucle osides and nuclootides" Analytical Sciences.

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sayuri Yonekura: "Fluorimetric assay double strand DNA by rhanylgly oxal and chloracetaldehyde reactins" Analyfical chimica Acta.

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Eijiro Kojima: "Phenylgyoxol as a tluorogenic reagent selectiue for tryptothan" Analyfical chimica Acta.

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoshihiko Umegae: "High performance liquid chromatographic determination involving oxidation followed by fluorescence reaction, and its application to human erythrocyte sample" Analytical Sciences. 6. 519-522 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hitoshi Nohta: "Assay for peroxidase using 1, 2-diarylethylene-diamines and catechol compounds as fluorogenic substrates" Analytical Sciences.

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Guo-Qing Zhang: "Determination of seven opioid peptides in rat brain by high performance liquid chromatography with on-line postcolumn fluorescence derivatization" Analytical Sciences. 6. 671-676 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Eijiro Kojima: "Phenylglyoxal as a fluorogenic reagent selective for tryptophan" Analytical Chimica Acta.

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Hiroaki Nagaoka: "2-(5-Chlorocarbony1-2-oxazolyl)-5, 6-methylene-dioxybenzofuran as fluorescence derivatization reagent for nucleosides and nucleotides" Analytical Sciences.

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Sayuri Yonekura: "Fluorimetric assay for double strand DNA by phenylglyoxal and chloroacetaldehyde reactions" Analytical Chimica Acta.

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yoshihiko Umegae: "High performance liquid chromatographic determination of ribonucleotides by postcolumn derivatization involving oxidation followed by fluorescence reaction,and its application to human erythrocyte sample" Analytical Sciences. 6. 519-522 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Hitoshi Nohta: "Assay for peroxidase using 1,2ーdiarylethylenediamines and catechol compounds as fluorogenic substrates" Analytical Sciences.

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] GuoーQing Zhang: "Determination of seven opioid peptides in rat brain by high performance liquid chromatography with onーline postcolumn fluorescence derivatization" Analytical Sciences. 6. 671-676 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Eijiro Kojima: "Phenylglyoxal as a fluorogenic reagent selective for tryptophan" Analytical Chimica Acta.

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Hiroaki Nagaoka: "2ー(5ーChlorocarbonylー2ーoxazolyl)ー5,6ーmethylenedioxybenzofuran as fluorescence derivatization reagent for nucleosides and nucleotides" Analytical Sciences.

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Sayuri Yonekura: "Fluorimetric assay for double strand DNA by planylglyoxal and chloracetaldehyde reactions" Analytical Chimica Acta.

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書

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公開日: 1989-04-01   更新日: 2016-04-21  

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