| 研究課題/領域番号 |
01480222
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| 研究種目 |
一般研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
消化器内科学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
井廻 道夫 東京大学, 医学部(病), 助教授 (70134228)
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| 研究分担者 |
中村 郁夫 東京大学, 医学部(病), 医員
郡司 俊秋 東京大学, 医学部(病), 医員
中釡 斉 東京大学, 医学部(病), 助手
中釜 斉 東京大学, 医学部(病), 医員
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| 研究期間 (年度) |
1989 – 1991
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| 研究課題ステータス |
完了 (1991年度)
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| 配分額 *注記 |
5,100千円 (直接経費: 5,100千円)
1991年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1990年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1989年度: 3,100千円 (直接経費: 3,100千円)
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| キーワード | 肝癌 / キラ-T細胞 / 腫瘍抗原 / 細胞傷害性T細胞 |
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| 研究概要 |
私達は、細胞障害性T細胞株5B5が認識する腫瘍特異的抗原ATMー1を分子生物学的に研究する目的で、ヒト肝癌細胞株SKーHEPー1細胞からcDNAライブラリ-を作製し、免疫スクリ-ニングによりATMー1遺伝子のクロ-ニングを試みた。しかしながら、用いたモノクロ-ナル抗体では、ATMー1遺伝子のクロ-ニングは成功しなかった。そこで、ATMー1抗原を精製し、N端のアミノ酸配列を決定し、合成ペプチドに対する抗体を作製し、あるいは合成オリゴマ-を用いてATMー1遺伝子をクロ-ニングすることに計画を変更した。血清ATMー1値の高い肝癌患者血清からゲル濾過、抗ATMー1抗体アフィニティ-クロマトグラフィ-によりATMー1の精製を行ったが、使用した抗体の特異性が低いため、健常者血清も同様に処理し、得られた蛋白を電気泳動により比較することにより、ATMー1蛋白の同定を行い、N端のアミノ酸配列の決定を行った。その結果、2種類のアミノ酸の配列が得られ、一つは免疫グロブリン重鎖可変領域IIIのアミノ酸配列であり、これは、ATMー1と免疫複合体を形成し、一緒に精製されてきたものと考えられる。もう一つは、未知の蛋白のアミノ酸配列であり、今後この合成ペプチドを作製し、抗体を作りATMー1遺伝子の免疫スクリ-ニングを行うと共に、合成オリゴマ-を作製してのATMー1遺伝子のクロ-ニングも予定している。ATMー1測定の肝癌診断への応用に関しては、確立した測定系は、感度、特異性共に低く、実用的なレベルではなかった。今後は、ATMー1遺伝子クロ-ニングの後、遺伝子組換え技術によりATMー1を発見させ、これを用いて特異性、親和性の高いモノクロ-ナル抗体を作製し、新たな測定系を作る予定である。更に、抗ATMー1抗体の肝癌画像診断、ミサイル療法への応用も検討する予定である。
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