研究概要 |
TRH欠損症患者のproTRH cDNAの検討 TRH欠損症患者(1人)及び欝病患者未梢白血球(3人)よりammonium acetate/guamidine法によりDNAを抽出した。5ー10μg DNAを種々のrestriction enzymes(BamH I,BgI II,BstE II,EcoRI,HindIII,Kpn I,Nco I,Pst I,Pvu II,Xba I)20ー60unitsと共に2時間温置し,0.8%agarose gelでelectrophorisisを行い、nylon・membraneにtransberした。digoxigenin標識人proTRH cDNAを用いてhybridizationを行い、antiーdigoxigenin alkoline phosphate/nitroblue.tetrazolineで発色させ解析した。各々のrestriction enzymesではsingle.bandを認めるのみであり、restriction fragment length polymorplism(RFIP)は認められなかった。これらの結果は人proーTRH geneはhuman genomcに於いてはsingle copy gencである事が示唆しており、TRH欠損症患者並びに欝病患者におけるproーTRH geneには大きなabnormalityはないことを示している。しかしRFLPでは認識出来ないpoint mutations,small insertions,small deletionsの存在は否定出来ない。
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