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プロテア-ゼを用いた血液アイソザイムの分画

研究課題

研究課題/領域番号 01480506
研究種目

一般研究(B)

配分区分補助金
研究分野 病態検査学
研究機関熊本大学

研究代表者

岡部 紘明  熊本大学, 医学部, 教授 (20185466)

研究分担者 岡嶋 研二  熊本大学, 医学部, 助手 (60152295)
宇治 義則  熊本大学, 医学部, 助手 (90203512)
研究期間 (年度) 1989 – 1990
研究課題ステータス 完了 (1990年度)
配分額 *注記
4,100千円 (直接経費: 4,100千円)
1990年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
1989年度: 2,800千円 (直接経費: 2,800千円)
キーワードprotease / selective proteolysis / Mitochondrial aspartate aminotransferase / proteolytic isoenzyme assay / aspartate aminotransferase / cytosolic aspartate aminotransferase / lactate dehydrogenaseー1 / apoーmitochondrial aspartate aminotransferase / protease 401 / mitochondrial aspartate aminotransferase / aspartate aminotranseferase isozyme / automated assay of isoenzyme / apo-mitochondrial aspartate aminotransferase
研究概要

血液中に逸脱する酵素であるアスパルテ-トアミノトランスフェラ-ゼについて、酵素の蔵器からの精製、各種プロテア-ゼの反応性について検討し、プロテア-ゼ401,およびプロティナ-ゼKがヒト サイトゾ-ル由来アスパルテ-トアミノトランスフェラゼを阻害し,ヒト ミトコンドリア由来のアスパルテ-トアミノトランスフェラ-ゼを阻害しないことを確認した。これらのプロテア-ゼをアスパルテ-トアミノトランスフェラ-ゼの測定系に導入した場合の至適条件の検討を行い、安定した精密度、正確度の高いアスパルテ-トアミノトランスフェラ-ゼアイソエンザイムの測定系を確立した。本法は迅速かつ簡便であり自動分析装置での測定が可能であり、動物由来の酵素についても同様の反応性が確認され動物血清のアスパルテ-トアミノトランスフェラ-ゼの測定も可能である。また、同様に血液中の逸脱するラクテ-トデハイドロゲナ-ゼについてもグアニジンとαーキモトリプシンの併用により、ラクテ-トデハイドロゲナ-ゼー1のみを測定できる系を確立した。
このことは心筋梗塞患者等における迅速検査として有用なものと考えられる。

報告書

(3件)
  • 1990 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1989 実績報告書
  • 研究成果

    (41件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (41件)

  • [文献書誌] Okabe H,Sugiuchi H.Yamane N,Watanabe N,Inoue M.Morino Y,Hayasaki K,Teranishi H,and Inayama S.: "Mitochondrial aspartate aminotransferase by immunoprecipitation method in patients with acute myocardial infarction." Clin Physiol Biochem. 7. 109-118 (1989)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 岡部 紘明: "プロテア-ゼを用いたアイソザイムの分画法(LD_1の測定)" 医学のあゆみ. 150. 148- (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 岡部 紘明: "プロテア-ゼを用いたmーGOT(AST)の測定法" 臨床検査. 33. 325-327 (1989)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Watazu Y,Uji Y,Sugiuchi H,Okabe H,and Murao S.: "New automated measurement of mitochondrial aspartate aminotransferase with use of protease 401" Clin Chem. 36. 687-689 (1990)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Okajima K,Inoue M,Koga S,Okabe H,and Takatsuki K.: "Plasma polymorphonuclear leukocyte elastaseーα_1ーproteinase inhibitor complex in patients with gastric ulcer." Clin Chim Acta. 189. 237-242 (1990)

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      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Watazu Y,Okabe H,Sugiuchi H,Uji Y,Shirahase Y,and Kaneda N.: "Proteolytic measurement of mitochondrial aspartate aminotransferase in human serum." Clin Biochem. 23. 127-130 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Okabe H,Uji Y,Sugiuchi H,Watazu Y,Shirahase Y,and Kaneda N.: "Optimal concentrations for protease use in the assay of serum mitochondrial asparate aminotransferase." Clin Lab Anal. 4. 350-354 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yamamoto T,Shibuya Y,Nishino N,Okabe H,and Kanbara T.: "Activation of human Hageman factor by pseudomonas aeruginosa elastase in the presence or absence of negatively charged substance." Biocnem et Biophys Acta. 1038. 231-239 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 岡部 紘明: "プロテア-ゼを用いたアイソザイムの分画法" Medical Technology. 18. 186-188 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 渡津 吉史,白波瀬 泰史,兼田 喜明,宇治 義則,岡部 紘明,杉村 博幸: "プロテア-ゼ401を用いた新しいミトコンドリア由来アスパラギン酸アミノトランスフェラ-ゼの活性測定法" 臨床検査. 34. 849-853 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 渡津 吉史,宇治 義則,岡部 紘明,白波瀬 泰史,兼田 喜明: "Proteinase Kを用いた新しいmーASTの測定法" 生体試料分析. 13. 123-128 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shirahase Y,Watazu Y,Kaneda K,Uji Y,Okabe H,and Arthur Karmen: "Specific assay of serum lactate dehydrogenaseー1 isozyme using proteolysis with αーchymotrypsin and protein denaturation." Clin Chem.

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Okabe H, Sugiuchi H, Yamane N, Watanabe N, Inoue M, Morino Y, Hayasaki K, Teranishi H, and Inayama S.: "Mitochondrial aspartate aminotransferase by immunoprecipitation method in patients with acute myocardial infarction." Clin Physiol Bilchem.7. 109-118 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Okabe H.: "Proteolytic measurement of isoenzyme (Determination of lactatedehydrogenase-1 in human serum)." Igakynoayumi.150. 148-148 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Okabe H.: "Determination of m-GOT(AST) with use of protease." Rinshokensa.33. 325-327 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Watazu Y, Uji Y, Sugiuchi H, Okabe H, and Murao S.: "New stuomated measurement of mitochondrial aspartate aminotransferase with use of protease 401." Clin Chem.36. 687-689 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Okajima K, Inoue M, Koga S, Okabe H, and Takatsuki K.: "Plasma polymorphonuclear leukocyte elastase-alpha_1-proteinase inhibitor complex in patients with gastric ulcer." Clin Chim Acta.189. 237-242 (1990)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Watazu Y, Okabe H, Sugiuchi H, Uji Y, Shirahase Y, and Kaneda N.: "Proteolytic measurement of mitocondrial aspartate aminotransferase in human serum." Clin Biochem.23. 127-130 (1990)

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    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Okabe H, Uji Y, Sugiuchi H, Watazu Y, Shirahase Y, and Kaneda N.: "Optimal concentrations for protease use in the assay of serum mitochondrial aspartate aminotransferase." Clin Lab Anal.4. 350-354 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yamamaoto T, Shibuya Y, Nishino N, Okabe H, and Kanbara T.: "Activation of human Hageman factor by pseudomonas aeruginosa elastase in the presence or absence of negatively charged substance." Biochem et Biophys Acta. 1038. 231-239 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Okabe H.: "Separation method of isoenzyme with use of protease." Medical Technology.18. 186-188 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Watazu Y, Shirahase Y, Kaneda N, Uji Y, Okabe H, and Sugiuchi H.: "New method of mitochondrial aspartate aminotransferase activity in human serum with use of protease 401." Rinshokensa.34. 849-853 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Watazu Y, Uji Y, Okabe H, Shirahase Y, and Kaneda N.: "A new proteolytic determination of m-AST with use of proteinase K." J Anal Bio Sci.13. 123-128 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Shirahase Y, Watazu Y, Kaneda N, Uji Y, Okabe H, Arthur Karmen.: "Specific assay of serum lactate dehydrogenade-1 isozyme using proteolysis with alpha-chymotrypsin and protein denaturation." Clin Chem. (1991)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Okabe H,Sugiuchi H,Yamane N,Watanabe N,Inoue M,Morino Y,Hayasaki K,Teranishi H,and Inayama S.: "Mitochondrial aspartate aminotransferase by immunoprecipitation method in patients with acute myocardial infarction." Clin Physiol Biochem. 7. 109-118 (1989)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 岡部 紘明: "プロテア-ゼを用いたアイソザイムの分画法(LD_1の測定)" 医学のあゆみ. 150. 148 (1989)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 岡部 紘明: "プロテア-ゼを用いたmーGOT(AST)の測定法" 臨床検査. 33. 325-327 (1989)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Watazu Y,Uji Y,Sugiuchi H,Okabe H,and Murao S.: "New automated measurement of mitochondrial aspartate aminotransferase with use of protease 401" Clin Chem. 36. 687-689 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Okajima K,Inoue M,Koga S,Okabe H,and Takatsuki K.: "Plasma polymorphonuclear leukocyte elastaseーα_1ーproteinas^^`e inhibitor complex in patients with gastric ulcer." Clin Chim Acta. 189. 237-242 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Watazu Y,Okabe H,Sugiuchi H,Uji Y,Shirahase Y,and Kaneda N.: "Proteolytic measurement of mitochondrial aspartate aminotransferase in human serum." Clin Biochem. 23. 127-130 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Okabe H,Uji Y,Sugiuchi H,Watazu Y,Shirahase Y,and Kaneda N.: "Optimal concentrations for protease use in the assay of serum mitochondrial asparate aminotransferase." Clin Lab Anal. 4. 350-354 (1990)

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Yamamoto T,Shibuya Y,Nishino N,Okabe H,and Kanbara T.: "Activation of human Hageman factor by pseudomonas aeruginosa elastase in the presence or absence of negatively charged substance." Biochem et Biophys Acta. 1038. 231-239 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 岡部 紘明: "プロテア-ゼを用いたアイソザイムの分画法" Medical Technology. 18. 186-188 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 渡津 吉史,白波瀬 泰史,兼田 喜明,宇治 義則,岡部 紘明,杉村 博幸: "プロテア-ゼ401を用いた新しいミトコンドリア由来アスパラギン酸アミノトランスフェラ-ゼの活性測定法" 臨床検査. 34. 849-853 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 渡津 吉史,宇治 義則,岡部 紘明,白波瀬 泰史,兼田 喜明: "Proteinase Kを用いた新しいmーASTの測定法" 生体試料分析. 13. 123-128 (1990)

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Shirahase Y,Watazu Y,Kaneda K,Uji Y,OKabe H,and Arthur Karmen: "Specific assay of serum lactate dehydrogenaseー1 isozyme using proteolysis with αーchymotrypsin and protein denaturation." Clin Chem.

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Okabe H.,et al.: "Selective measurement of aspartate aminotransferase isozymes using protease" Isozymes Bulletin. 22. S98 (1989)

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      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Okabe H.,et al.: "Mitochondrial aspartate aminotransferase by immuno precipitation method in patients with myocardial infarction" Clinical Physiolog and Biochemistry. 7. 109-118 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Watazu Y.,et al.: "New automated measurement of mitochondrial aspartate aminotransferase with use of protease 401" Journal of Clinical Chemistry. 36. (1990)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Okabe H.,et al.: "Effects of protease on aspartate aminotransferase isoenzymes measurement" Journal of Clinical Biochemistry. (1990)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Okabe H.,et al.: "Proteolytic measurement of mitochondrial aspartate aminotransferase" Journal of Clinical Biochemistry. (1990)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書

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公開日: 1989-04-01   更新日: 2016-04-21  

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