| 研究課題/領域番号 |
01540557
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
植物生理学
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
奥山 英登志 北海道大学, 理学部, 助教授 (90125295)
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| 研究分担者 |
高田 泰弘 北海道大学, 理学部, 講師 (10163213)
佐々木 昭治 北海道大学, 理学部, 教授 (10000811)
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| 研究期間 (年度) |
1989 – 1991
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| 研究課題ステータス |
完了 (1991年度)
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| 配分額 *注記 |
2,000千円 (直接経費: 2,000千円)
1991年度: 400千円 (直接経費: 400千円)
1990年度: 300千円 (直接経費: 300千円)
1989年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
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| キーワード | 耐冷菌 / 好冷菌 / Psendomonas / Vibrio / シス / トランス異性化酵素 / トランス型不飽和脂肪酸 / Pseudomonas / シス・トランス異性化酵素 / 脂肪酸 / 低温適応 / Vibrio ABE-1株 / 不飽和脂肪酸異性化酵素 |
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| 研究概要 |
Vibrio ABEー1株とPsendomonas Eー3株は生育温度上限付近の温度で培養された時、トランス型不飽和脂肪酸である16:1(9t)を16:1(9C)からの異性化により合成する。Pseudomonas Eー3株の無細胞抽出液には、遊離の16:1(9C)を基質とする酵素の活性とホスファチジルエタノ-ルアミンに結合している16:1(9C)を基質とする酵素の活性が存在することがわかった。本研究ではPseudomonas Eー3株の酵素について調査した。
細胞分画により、遊離脂肪酸を基質とする酵素は細胞質に、ホスファチジルエタノ-ルアミンを基質とするものは細胞膜に存在することがわかった。但し後者の活性発現には細胞質成分の共存が必要とされた。
細胞質画分を硫安画分の後、DEAEートヨパ-ル、Butylートヨパ-ル・ゲルろ過の各クロマトグラフィにより、細胞質成分として存在する酵素を約5000倍に精製した。本酵素はSDSーPAGE,native PAGEのいずれによっても2本の主要なタンパク質バンドからなることがわかった。又ゲルろ過により分離された2つのタンパン質の分子量は39,000と41,000であった。これらのタンパク質は単独では16:1(9C)を異性化できず、活性発現のためには両者の共存が必須であった。
精製された本酵素は0℃で最大活性を示し、-20℃でも最大活性の5%を維持するという特異な性質をもつことが明らかとなった。40℃では最大活性の23%が残っていた。炭素数16で、二重結合の位置は△9にある遊離の脂肪酸を基質として利用したが、炭素数(鎖長)、二重結合の位置に関する特異性は厳密なものではなかった。
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