• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 前のページに戻る

植物病原糸状菌への遺伝子導入と形質転換ベクタ-系の開発

研究課題

研究課題/領域番号 01560057
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 植物保護
研究機関近畿大学

研究代表者

豊田 秀吉  近畿大学, 農学部 (00150805)

研究分担者 吉田 元信  近畿大学食品科学研究所, 講師 (80192425)
松田 克礼  近畿大学, 農学部, 研究生
松田 克のり  近畿大学, 農学部, 研究生
研究期間 (年度) 1989 – 1990
研究課題ステータス 完了 (1990年度)
配分額 *注記
2,700千円 (直接経費: 2,700千円)
1990年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
1989年度: 1,600千円 (直接経費: 1,600千円)
キーワードエレクトロポ-レ-ション / rRNA遺伝子 / 相同組換え / in Situ ハイブリダイゼ-ション / マイクロインジェクション法 / トマト萎凋病菌 / リボゾ-ムRNA遺伝子 / in situ検出 / 細胞壁構造 / 固型NMR / キチンーキトサン複合系 / キケン分解性放線菌 / プロモ-タ- / デンプン / アミラ-ゼ生産遺伝子 / mRNA / 遺伝子バンク / 水銀無毒化遺伝子
研究概要

本研究の最初度においては、エレクトロポ-レ-ション法を使用することによって、トマト萎凋病菌(Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici)の分生胞子に直接外来物質を導入できることを明らかにし、Journal Phyto pathology誌の1989年125巻に発表した。最終年後の研究においては、導入された遺伝子の発現を効果的なものとするため、本菌で有効に機能するベクタ-系の開発につとめた。遺伝子発現に至る第1段階としては、導入した遺伝子が本菌染色体DNAに組込れることが必須となる。そこで、染色体上には多数のrRNA遺伝子が存在することに着目し、これらの遺伝子をベクタ-内に連結することで、ベクタ-と染色体DNA間での相周組換えによる遺伝子導入法を検討した。まず、本菌のrRNAからcDNAを合成し、それが染色体上のrRNA遺伝子と同一であることをサザンハイブリダイゼ-ションによって明らかにした後,検出マ-カ-(ハイグロマイシン低抗性遺伝子)の上流および下流に分割した挿入したベクタ-を構築した。このベクタ-は、本菌の分生胞子にエレクトロポ-レ-ション法で効果的に導入され、検出マ-カ-遺伝子が組込れた形質転換体の作出に成功した。また、これらの遺伝子が本菌の生育・分化段階においても安定して継代されていることを証明するため、in situハイブリダイゼ-ションを行った。すなわち、それぞれの発育段階における菌糸細胞にプロ-ブDNAをマイクロインジェクション法で注入し、細胞質内におけるmRNAとのハイブリダイゼ-ションを行わせた。以上の結果は、日本農芸化学会英文誌に現在投稿中である。

報告書

(3件)
  • 1990 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1989 実績報告書
  • 研究成果

    (25件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (25件)

  • [文献書誌] 松田 克礼,他: "Direct introduction of fluorescent isothiocyanaTeーcajngated albumin into intact macroconibia of F・oxysporum by electroporation" Journal of Phytopathology. 125. 89-96 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 豊田 秀吉,他: "Transient expression of the βーGlucuronidase gene introduced into borley coleoptile cells by microinjection" Plant Cell Reports. 9. 299-302 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 深溝 慶,他: "Solid state^<13>cーNMR analysis of cell wall components of Fusarium oxysporum" Agricultural and Biological Chemistry. 54. 2761-2762 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 豊田 秀吉,他: "In situ hybridization of cytoplasmic mRNA in filamentous plant pathsgenic Fmgus,Fusarium oxysporum f sp <lycopersici>___ー" Agriwltural and Biolojical Chemistry.

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 豊田 秀吉 他: "植物病害と遺伝子工学" 朝日出版社, 225 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Y. Matsuda: "Direct introduction of fluorescent isothiocyanate-conjugated albumin into intact macroconidia of Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici by microinjection" Journal of Phytopathology. 125. 89-96 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H. Toyoda: "Transient expression of the beta-glucuronidase gene introduce into barley coleoptile cells by microinjection." Plant Cell Reports. 9. 299-302 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T. Fukamizo: "Solid state ^<13>C-NMR analysis of cell wal components of Fusarium oxysporum." Agricultural and Biological Chemistry. 54. 299-302 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H. Toyoda: "In situ hybridization of cytoplasmic mRNA in filamentous plant pathogenic fungus, Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici." Agricultural and Biological Chemistry. (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] H. Toyoda: Asahi Publishing. Plant Diseases and Genetic Engineering., 225 (1989)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 豊田 秀吉: "培養カルス系による耐病性植物の選抜" 化学と生物. 28. 12-19 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 豊田 秀吉・堀越 浩二・稲葉 幸司・大内 成志: "Plant Regeneration of callus tissues mduced from leaf explants of strawberry" 植物組織培養. 7. 38-41 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 深溝 慶・園田 浩二・豊田 秀吉・大内 成志・後藤 幸男: "Solid state ^<13>CーNMR analysis of cell wall components of Fusarium oxysporum" Agric.Biol.Chem.54. 2761-2762 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 豊田 秀吉: "野菜の培養変異と育種への利用" バイオホルティ-. 4. 9-14 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 豊田 秀吉・山家 高子・松田 克礼・大内 成志: "Transient expression of the βーgluculonidase gene introduced into barley coleoptile cells by microinjection" Plant Cell Reports. 9. 299-302 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 豊田 秀吉他9名: "Callus induction and plant regeneration from barley coleoptile tissues" 植物組織培養. 7. 202-204 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 豊田 秀吉: "最新バイオテクノロジ-全書3 野菜の組織・細胞培養と育種" 農業図書, 250 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 豊田 秀吉: "植物病害と遺伝子工学" 朝日出版社, 225 (1989)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] Y.Matsuda,H.Toyoda,T.Nishiguchi,S.Ouchi: "Direct introduction of fluorescein isothio cyanate-conjugated albumin into in tact macroconidia of Fusarium oxysporum f.sp.lyoopersici by electroporation." Journal of Phytopathology. 125. 89-96 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] Y.Matsuda,H.Toyoda S.Ouchi: "Application of microinjection to appressoria and haustoria to Erysiphe graminis f.sp.hordei" Ann.Phytopath.Soc.Japan. 55. 67-68 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] H.Toyoda,T.Oki,Y.Matsuda,K.Katsuragi,T.Nishigudi,S.Ochi: "Transformation of contituent cells of tomato callus ajgregates by intranuclear mieroinjection" Ploant Tissue Culture Letters. 6. 95-97 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] H.Toyoda,K.Shimizu.K.Chatani,N.Kita,Y.Matsuda,S.Ouchi: "Selection of bacterial-wilt resistant tomato through tissue cultare" Plant Cell Reports. 8. 317-320 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] H.Toyoda,K.Chatani,Y.Matsuda,S.Ouchi: "Multiplication of tobacco mosaic virus in tobacco callus tissues and in ritro selection for vival disease resistance" Plant Cell Reports. 8. 433-436 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] 豊田秀吉(分担執筆): "植物病理学実験マニュアル" 養賢堂, 160 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書
  • [文献書誌] 豊田秀吉(分担執筆): "植物病害と遺伝子工学" 朝日出版社, 225 (1989)

    • 関連する報告書
      1989 実績報告書

URL: 

公開日: 1989-04-01   更新日: 2016-04-21  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi