研究概要 |
プロトプラスト融合を中心に組織培養法を活用する新しい桑育種に関する2,3の基礎実験を試みた。まず,試料用カルスの保存方法について検討した。そして,前処理を行って冷蔵(5゚C)する方法によると20週間までは可能であることを確認した。この冷蔵試験の中で,冷蔵カルスにも休眠に類似した現象が存在することを発見した。この現象は冷蔵3週間経過あたりから現れ始め,8週間経過頃が最も顕著となる。しかし,18週間に至るとこの現象から覚醒し,恰も外界の温度条件による他発休眠のような状態になることが判明した。そして,休眠する桑のカルスはいずれもこの性質をもっているが,休眠し難い桑(沖縄桑 等)のカルスにはこの性質を持たないことが判った。一方,出庫時のカルスの酵素と蛋白質を電気泳動法により分析し,冷蔵期間中における酵素と蛋白質のバンドの消長を調査したところ,消長の模様は休眠類似現象の消長と一脈相通ずるものがあると窺えた。なお,休眠類似現象はジベレリンとジチオスレイト-ルを培地へ添加することにより打破されることが判った。更に長期間の保存の為の冷凍保存法については,前処理の薬剤と処法を検討し,従来の液体窒素による方法より簡便な電気冷凍庫による保存法を開発した。次に,試料細胞の単離に生長調節物質を使って懸濁単離させる方法も検討した。上記諸種の細胞のプロトプラストで電気融合を試みた。桑の品種間における融合の難易があることが認められた。異種植物との融合を試みたが,概ね可能ではあるが,中には電圧を高くすると破壊する場合があった。得られた融合細胞の培養条件,即ち従来の培地の組成に検討を加えて改良を行い,不定胚から不定根の誘導,生長まで成功した。なお,現在も育成進行中である。以上,課題の研究についての当初計画は概ね達成できたものといえる。
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