研究課題/領域番号 |
01570065
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研究種目 |
一般研究(C)
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配分区分 | 補助金 |
研究分野 |
神経・筋肉生理学
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研究機関 | 広島大学 |
研究代表者 |
瀬山 一正 広島大学, 医学部, 教授 (70034006)
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研究期間 (年度) |
1989 – 1990
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研究課題ステータス |
完了 (1991年度)
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配分額 *注記 |
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1990年度: 800千円 (直接経費: 800千円)
1989年度: 1,300千円 (直接経費: 1,300千円)
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キーワード | Naチャンネル / 燐酸化 / 代謝性制御 / Aーkinase / βー刺激剤 / 心筋 / βー刺識 / オイル隔絶膜電位固定法 |
研究概要 |
心室筋のNaチャンネルは、心筋内の興奮伝導とそれに続く心筋の収縮を制御し、心臓のポンプとしての働きを正常に行わせる主要なイオンチャンネルである。Naチャンネルのアミノ酸の一次構造の中に、蛋白質の燐酸化に密接に関連する箇所があることが解り、Caチャンネルと同様に代謝性の制御を受けている可能性が出てきた。この研究計画は、蛙心室筋Naチャンネルに代謝性制御があるかどうかを検討するために企画された。一般的に心筋のNa電流は電流量が多く、その上時間的変化が大きいため、正確な膜電位の制御が困難である。蛙心室筋は、他の心筋細胞と比べてNa電流密度は1/10で、変化の時間経過も遅いので心筋のNa電流の変化を調べるためには最適な標本である。更にその他の実験上の制約としては、Naチャンネルのゲ-ト機構の電位依存性が時間と共に変化することがあり、解析を一層困難なものとしている。心筋におけるチャンネル制御は、Aーkinase系を介して行われていると言われる。このためβーStimulantとしてIsoproterenol(ISP)とHistamineを、またAdenylate cyclaseを直接刺激するForskolinを各々細胞外より投与し、Na電流の消長について油隔絶膜電位固定法を用いて検討した。Na電流の最大値、ピ-ク迄の時間及び下降相の時定数に変化は認めなかった。不活性化曲線についても1/2不活性化電位の変化は3mV以内であり、実験誤差の範囲に止まった。薬投与の前後において、Na電流のIーV曲線及び不活性化曲線の変化がない安定した標本であると確認した。細胞膜の半分を破壊した状態で行う実験操作に伴い、細胞内Aーkinase系が不活性化されている可能性は否定しきれない。このためNa電流とCa電流が同時に記録できる標本でISPを作用させると、発生するCa電流は2.5〜5倍に増大したが、Na電流は変化しなかった。これらの結果から蛙心室筋細胞のNaチャンネルはAーkinase系を介する代謝性制御を受けていないことが明らかになった。
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