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βーケトチオラ-ゼ欠損症の分子生物学的検討

研究課題

研究課題/領域番号 01570522
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 小児科学
研究機関岐阜大学

研究代表者

山口 清次  岐阜大学, 医学部附属病院・小児科, 講師 (60144044)

研究期間 (年度) 1989 – 1990
研究課題ステータス 完了 (1990年度)
配分額 *注記
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1990年度: 1,000千円 (直接経費: 1,000千円)
1989年度: 1,100千円 (直接経費: 1,100千円)
キーワード先天代謝異常 / 有機酸代謝異常症 / βーケトチオラ-ゼ欠損症 / 酵素欠損機構 / 分子生物学的解析 / 遺伝子解析 / β-ケトチオラ-ゼ欠損症 / 酸素生合成障害 / ケト-シス
研究概要

βーケトチオラ-ゼ欠損症は間歇的に起こるケト-シス発作を主徴とする有機酸代謝異常症である。本症は、哺乳類で知られている4種類のチオラ-ゼのうち、ミトコンドリア・アセトアセチルーCoAチオラ-ゼ(T2)の欠損によって起こり、遺伝形式は常染色体劣性遺伝であることが知られている。我々は本症の病因を分子生物学的な面から解明することを目的として、免疫生化学的手法で酵素をタンパクレベルで解析し、さらにヒトのT2cDNA,および遺伝子のクロ-ニングを行い、遺伝子レベルでの解析を行った。本研究によって得られた主な成果は以下の通りであった。
(1)12例の患者の細胞を用いて、タンパクレベルでの解析を行った結果、検出されたT2タンパクの分子サイズ、量、寿命のちがいから、少なくとも6つの群に分けられた。(2)比較的採取しやすいリンパ球、直腸粘膜を用いても、酵素活性、イムノブロットによって本症の酵素診断が可能なことを確認した。(3)ヒトのT2cDNA,およびT2遺伝子のクロ-ニングを行った。この結果、T2cDNAは427個のアミノ酸をコ-ドする1281個の塩基から成っていること、T2遺伝子は全長約27万塩基からなり、12個のエクソンを含んでいることがわかった。(4)患者のRNA発現を調べたところ(ノ-ザンブロット)、その発現量は患者によって差がみられ、RNA発現のレベルでも異質性のあることがわかった。(5)PCR法を用いて遺伝子解析を行ったところ、1例の患者において、一方のalleleではエクソン6上の点変異、他方のalleleではエクソン8のスキッピングからなるヘテロ接合体を見いだした。(6)このエクソンスキップの原因はイントロン8の5'スプライスサイトにおける点変異であることも判明した。今後さらに患者および家族の解析を進め、本症の病因および遺伝的背景を明かにしてゆきたい。

報告書

(3件)
  • 1990 実績報告書   研究成果報告書概要
  • 1989 実績報告書
  • 研究成果

    (38件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (38件)

  • [文献書誌] H.Nagasawa,S.Yamaguchi,T.Orii,RBH.Schutgens,L.Sweetman,T.Hashimoto: "Heterogeneity of defects in mitochondrial acetoacetylーCoA thiolase biosynthesis in fibroblasts from four patients with 3ーketothiolase deficiency." Pediatric Research. 26. 145-149 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Fukao,K.Kamijo,T.Osumi,Y.Fujiki,S.Yamaguchi,T.Orii,T.Hashimoto: "Molecular cloning and nucleotide sequence of cDNA encoding the entire precursor of rat mitochondrial acetoacetylーCoA thiolase" J.Boichemistry. 106. 197-204 (1989)

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  • [文献書誌] N.Nagasawa,S.Yamaguchi,T.Orii,RBH.Schutgens,L.Sweetman,: "3ーKetothiolase deficiency:Heterogeneity in a defect of mitochondrial acetoacetylーCoA thiolasebiosynthesis in fibroblasts from four patients." J.Inherited Metabolic Disease. 12. 368-372 (1989)

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  • [文献書誌] 清水 信雄、山口 清次、折居 忠夫: "ジカルボン酸尿症におけるカルニチンの検討" 日本医用マススペクトル学会講演集. 14. 139-142 (1989)

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  • [文献書誌] 八十嶋 弘一、飽津 泰史、楠 幸博、伊丹 儀友、〓丸 博幸、武越 靖郎、荒島 奥一郎、岡安 多香子、浅野 嘉文、野々村 克也、松野 正、山口 清次: "原発性高シュウ酸尿症II型(Lーグリセリン酸尿症)の1例" 日本小児科学会雑誌,. 93. 2091-2097 (1989)

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  • [文献書誌] T.Fukao,S.Yamaguchi,H.Nagasawa,M.Kano,T.Orii,Y.Fujiki,T.Osumi,T.Hashimoto: "Molecular cloning of cDNA for human mitochondrial acetoacetylーCoA thiolase and molecular analysis of 3ーketothiolase deficiency" J.Inhrited Metabolic Disease. 13. 757-760 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Fukao,S.Yamaguchi,M.Kano,T.Orii,Y.Fujiki,T.Osumi,T.Hashimoto: "Molecular cloningand sequence of the complimentary DNA encoding human mitochondrial acetoacetylーCoA thiolase and study of the variant enzymes in cultured fibroblasts with 3ーketothiolasedeficiency" J.Clinical Investigation. 86. 2086-2092 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Yamaguchi,T.Orii,K.Maeda,M.Oshima,T.Hashimoto: "A new variant of glutaric aciduria type II:Deficiency of βーsubunit of electron transfer flavoprotein" J.Inherited Metabolic Disease. 13. 783-786 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Yamaguchi,T.Orii,Y.Suzuki,K.Maeda,M.Oshima,T.Hashimoto: "Newly identified forms of electron transfer flavoprotein deficiency in two patients with glutaric aciduria type II" Pediatric Research. 29. 60-63 (1991)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 長沢 宏幸,山口 清次,折居 忠夫,小林 正紀,和田 義郎,〓倉 圭子,嶋尾 智,岡田 敏夫: "グルタ-ル酸尿症I型(GlutarylーCoA dehydrogenase欠損症):本邦4症例と家族の酵素学的検索" 日本小児科学会雑誌, 94:103ー108. 94. 103-108 (1990)

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  • [文献書誌] 清水 信雄,山口 清次,折居 忠夫: "ジカルボン酸尿症を認めた症例の有機酸プロフィ-ルの検討" 日本小児科学会雑誌,. 94. 2023-2029 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] 清水 信雄,山口 清次,折居 忠夫,大浦 敏博,一迫 祐,成田 俊光,前田 御子,滝山 宣明,児玉 浩子,東條 恵: "グルタル酸尿症II型5例の尿中有機酸の検討" 日本小児科学会雑誌. 95. 735-741 (1991)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] S.Yamaguchi,T.Fukao,H.Nagasawa,T.Orii,N.Sakura,R.B.H.Schutgens,L.Sweetman,Y.Fujiki,T.Osumi,T.Hashimoto: "3ーketothiolase deficiency:molecular heterogeneity of the enzyme defect and cloning of the cDNA,Fatty Acid Oxidation: Clinical,Biochemical,and Molecular Aspects" Alan R.Liss,Inc.,New York, 728 (1990)

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  • [文献書誌] 山口 清次,清水 信雄,折居 忠史: "尿中有機酸分析,小児の臨床検査指針,小児科診療増刊" 1診断と治療社, 808 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nagasawa, H., Yamaguchi, S., Orii, T., Schutgens, R. B. H., Sweetman, L., Hashimoto, T.: "Heterogeneity of defects in mitochondrial acetoacetyl-CoA thiolase biosymtheis in fibroblasts from four patients with 3-k etothiolase deficiency." Pediatr Res. 26. 145-149 (1989)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Fukao, T., Kamijo, K., Osumi, T., Fujiki, Y., Yamaguchi, S., Orii, T., Hashimoto, T.: "Molecular cloning and nucleotide sequence of cDNA encoding the rat mitochondrial acetoacetyl-CoA thiolase." J Biochemistry. 106. 197-204 (1989)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Nagasawa, H., Yamaguchi, S., Orii, T., Schutgens, R. B. H., Sweetman, L.: "3-Ketothiolase deficiency : Heterogeneity in a defect of mitochondrial acetoacetyl-CoA thiolase biosynthesis in fibroblasts from four patients." J Inher Met Dis. 12. 368-372 (1989)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Fukao, T., Yamaguchi, S., Nagasawa, H., Kano, M., Orii, T., Fujiki, Y., Osumi, T., Hashimoto, T.: "Molecular cloning of cDNA for human mitochondrial acetoacetyl-CoA thiolase and molecular analysis of 3-ketothiolase deficiency." J Inher Met Dis. 13. 757-760 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yamaguchi, S., Fukao, T., Nagasawa, H., Orii, T., Sakura, N., Schugens, R. B. H., Seetman, L., Fujiki, Y., Osumi, T., Hashimoto, T.: "3-Ketothiolase deficiency : molecular heterogeneity of the enzyme defect and cloning of the cDNA." Fatty Acid Oxidation : Clinical, Biochemical, and Molecular Aspects, Alan R. Liss Inc., New York. 673-679 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Fukao, T., Yamaguchi, S., Kano, M., Orii, T., Fujiki, Y., Osumi, T., Hashimoto, T.: "Molecular cloning and sequence of the complementaryDNA encoding fuman mitoc hondrila acetoacetyl-CoA thiolase and study of the variant enzymes in cultured fibroblasts with 3-ket othiolase deficiency." J Clin Invest. 86. 2086-2092 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] Yamaguchi, S., Orii, T., Maeda, K., Oshima, M., Hashimoto, T.: "A new variant of glutaric aciduria type II : Deficiency of B-subunit of electron transferflavo protein deficieny in two patients with glutaric aciduria type II." J Inher Met Dis. 13. 783-786 (1990)

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      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] YAMAGUCHI, S., ORII, T., SUZUKI, Y., MAEDA, K., OSHIMA, M., HASHIMOTO, T.: "Newly identified forms of electron transfer flavoprotein deficiency in two patients with glutaric aciduria type II." Pediatr Res. 29. 60-63 (1991)

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      「研究成果報告書概要(欧文)」より
    • 関連する報告書
      1990 研究成果報告書概要
  • [文献書誌] T.Fukao,S.Yamaguchi,H.Nagasawa,M.Kano,T.Orii,Y.Fujiki,T.Osumi,T.Hashimoto: "Molecular cloning of cDNA for human mitochondrial acetoacetylーCoA thiolase and molecular analysis of 3ーketothiolase deficiency" J.Inhrited Metabolic Disease. 13. 757-760 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] T.Fukao,S.Yamaguchi,M.Kano,T.Orii,Y.Fujiki,T.Osumi,T.Hashimoto: "Molecular cloningand sequence of the complimentary DNA encoding human mitochondrial acetoacetylーCoA thiolase and study of the variant enzymes in cultured fibroblasts with 3ーketothiolasedeficiency" J.Clinical Investigation. 86. 2086-2092 (1990)

    • 関連する報告書
      1990 実績報告書
  • [文献書誌] S.Yamaguchi,T.Orii,K.Maeda,M.Oshima,T.Hashimoto: "A new variant of glutaric aciduria type II:Deficiency of βーsubunit of electron transfer flavoprotein" J.Inherited Metabolic Disease. 13. 783-786 (1990)

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] S.Yamaguchi,T.Orii,Y.Suzuki,K.Maeda,M.Oshima,T.Hashimoto: "Newly identified forms of electron transfer flavoprotein deficiency in two patients with glutaric aciduria type II" Pediatric Research. 29. 60-63 (1991)

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 長沢 宏幸,山口 清次,折居 忠夫,小林 正紀,和田 義郎,壱倉 圭子,嶋尾 智,岡田 敏夫: "グルタ-ル酸尿症I型(GlutarylーCoAdehydrogenase欠損症):本邦4症例と家族の酵素学的検索" 日本小児科学会雑誌,94:103ー108. 94. 103-108 (1990)

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 清水 信雄,山口 清次,折居 忠夫: "ジカルボン酸尿症を認めた症例の有機酸プロフィ-ルの検討" 日本小児科学会雑誌. 94. 2023-2029 (1990)

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  • [文献書誌] Seiji Yamaguchi: "Prenatal Diagnosis and Neonatal Monitoring of a Fetus with Glutaric Aciduria type II Due to Electron Transfer Flavoprotein(Bーsubunit)Deficiency" Journal of Pediatrics.

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  • [文献書誌] Nobuo Shimizu: "Mass Spectronetric Analysis of Metabolite Excretion in Five Japanese Patients with the Late Onset Form Glutaric Aciduria Type II" Biological Mass Spectrometry.

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] S.Yamaguchi,T.Fukao,H.Nagasawa,T.Orii,N.Sakura.R.B.H.Schatgens,L.Sweetman,Y.Fujiki,T.Osumi,T.Hashimoto: "3ーketothiolase deficiency:molecular heterogeneity of the enzyme defect and cloning of the cDNA,Fatty Acid Oxidation:Clinical,Biochemical,and Molecular Aspects" Alan R.Liss,Inc.,New York, 728 (1990)

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] 山口 清次,清水 信雄,折居 忠夫: "尿中有機酸分析,小児の臨床検査指針,小児科診療増刊" 1 診断と治療社, 808 (1990)

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      1990 実績報告書
  • [文献書誌] H.Nagasawa,S.Yamaguchi,T.Orii、RBH.Schutgens,L.Sweetman,T.Hashimoto: "Heterogeneity of defects in mitochondrial acetoacetyl-CoA thiolase biosynthesis in fibroblasts from four patients with 3-ketothiolase deficiency." Pediatric Research. 26. 145-149 (1989)

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      1989 実績報告書
  • [文献書誌] T.Fukao,K.Kamijo,T.Osumi,Y.Fujiki,S.Yamaguchi,T.Orii,T.Hashimoto: "Molecular cloning and nucleotide sequence of cDNA encoding the entire precursor of rat mitochondrial acetoacetyl-CoA thiolase" J.Boichemistry. 106. 197-204 (1989)

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      1989 実績報告書
  • [文献書誌] H.Nagasawa,S.Yamaguchi,T.Orii,RBH.Schutgens,L.Sweetman: "3-Ketothiolase deficiency:Heterrogeneity in a defect of mitochondrial acetoacetyl-CoA thiolasebiosynthesis in fibrolasts from four patients." J.Inherited Metabolic Disease. 12. 368-372 (1989)

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      1989 実績報告書
  • [文献書誌] 清水信雄、山口清次、折居忠夫: "ジカルボン酸尿症におけるカルニチンの検討" 日本医用マススペクトル学会講演集. 14. 139-142 (1989)

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  • [文献書誌] 八十嶋弘一、飽津泰史、楠幸博、伊丹儀友、萬丸博幸、武越靖郎、荒島真一郎、岡安多香子、浅野嘉文、野々村克也、松野正、山口清次: "原発性高シュウ酸尿症II型(L-グリセリン酸尿症)の1例" 日本小児科学会雑誌. 93. 2091-2097 (1989)

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      1989 実績報告書
  • [文献書誌] S.Yamaguchi,T.Fukao,H.Nagasawa,T.Orii,N.Sakura,RBH.Schutgens,L.Sweetman Y.Fujiki,K.Kamijo,T.Osumi,T.Hashimoto: "Fatty Acid Oxidation:Clinical,Biochemical,and Molecular Aspect,(ed.by K.Tanaka and P.Coates)" Alan R. Liss,Inc., 728 (1990)

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      1989 実績報告書

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公開日: 1989-04-01   更新日: 2016-04-21  

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