| 研究課題/領域番号 |
01570674
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
血液内科学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
三浦 昇 (1990) 東京大学, 医学部・血液内科学, 助手 (50222419)
青木 克己 (1989) 東京大学, 医学部(病)(血液内科学), 助手 (90212331)
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| 研究分担者 |
三浦 昇 東京大学, 医学部(病)(血液内科学), 医員
矢富 裕 東京大学, 医学部(病)(血液内科学), 医員
東原 正明 東京大学, 医学部(病)(血液内科学), 医員
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| 研究期間 (年度) |
1989 – 1990
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| 研究課題ステータス |
完了 (1990年度)
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| 配分額 *注記 |
2,100千円 (直接経費: 2,100千円)
1990年度: 1,200千円 (直接経費: 1,200千円)
1989年度: 900千円 (直接経費: 900千円)
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| キーワード | 血小板 / CD9抗原 / アミノ酸配列 / 細胞内カルシウム / モノクロナル抗体 / 白血病細胞 / CD9 / 樹立細胞株 / cDNAライブラリ- / 巨核球 |
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| 研究概要 |
1。CD9抗原のクロ-ニング及び生化学的性状の検討を目的として、先ずCD9抗体(TP82)用いた抗体アフィニテ-カラムにてヒト血小板膜よりpureなCD9抗原を得た。この一部10μgをアミノ酸シ-ケンサ-にかけN末端より20個のアミノ酸配列を決定した。このアミノ酸配列によりNo12〜No20は疎水性が強く、膜の内側に組み込まれていることが予想された。又、CD9抗原のSDSーgelでmajor band以外に、幾つかのmainor bandが隣接してみられ、glicosylationの存在示唆された(FEBS Lett.264:270,1990)。我々は次にクロ-ニングを試みていたが、つい最近Boucheixらが、ヒト血小板のクロ-ニング報告をした(J.B.C.266:117,1991)。彼らは、我々の論文も引用し、N末端20個のアミノ酸配列は同じであると述べている。又No12〜No35アミノ酸は血小板膜を貫通していることを示している。彼らのクロ-ニングにより、CD9抗原は4個の膜貫通部位をもち、N末端・C末端ともに細胞内に存在することが解った。
2。我々は、CD9抗体TP82による血小板細胞内Ca^<2+>([Ca^<2+>]i)上昇について、Quin2、エコ-リン、Furaー2の三つの試薬を用いて、[Ca^<2+>]i上昇パタ-ンがこれらindicatorにより異なっていることを示した(BBRC171:109,1990)。
3。フロ-サイトメ-タ-を用いた白血病細胞の解析を40症例について検討し、CD9抗原はリンパ系ではpreB細胞、骨髄系ではmyelomonocytic或はもっと未熟な段階の白血病クロ-ンに発現していることを示した(臨床血液31:1308,1990)。
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