| 研究課題/領域番号 |
01570718
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
外科学一般
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| 研究機関 | 名古屋市立大学 |
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研究代表者 |
小林 俊三 名古屋市立大学, 医学部, 講師 (50080057)
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| 研究分担者 |
岩瀬 弘敬 名古屋市立大学, 医学部, 助手 (40211065)
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| 研究期間 (年度) |
1989
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| 研究課題ステータス |
完了 (1989年度)
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| 配分額 *注記 |
1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
1989年度: 1,900千円 (直接経費: 1,900千円)
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| キーワード | ヒト乳癌 / エストロゲン・レセプタ- / cDNA / 遺伝子発現 / DNA / mRNA |
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| 研究概要 |
ヒト乳癌40例より抽出したDNA、mRNAをラット・エストロゲン・レセプタ-(ER)cDNA(pRcER6、小池ら)をプロ-ブとして、ハイブリダイゼ-ションしER発現との関連を解析した。
〔方法〕【○!1】Proteinase K,Phenol,Chloroformを使用してDNAを抽出し制限酵素EcoRIで消化しSouthern hybridizationを行った。【○!2】FAST TRACK mRNA ISORATION KIT(INVITROGEN)を使用してmRNAを抽出しNorthern hybridizatonをおこなった。【○!3】プロ-グにはmultiprime labeling kitを使用した。【○!4】ER測定にはEIA法とDCC法をおこなった。
〔結果〕DNAのSouthern hybridization解析ではERの有無と無関係にすべての例で9.1kb、7.4kb、3.4kb、2.8kb程度の大きさの4バンドを検出し、濃淡も各バンド毎に腫瘍間で差異はなかった。ヒト胎盤、子宮より抽出したDNAでも全く同様のバンドが検出され、乳腺細胞の癌化に伴うER発現遺伝子の再編成や増幅は認められなかった。mRNAのNorthern hybridization解析ではすべてのER(+)腫瘍で約6.0kbにバンドが検出され、そのうちの1例では約7.2kbの副バンドが検出された。それについてはRNAレベルでのスプライシングの異常を起こしていることが予想され、欠陥ERを産生している可能性がある。ER(-)腫瘍では全くバンドが検出されなかった。
なお上記の結果は第49回日本癌学会総会にて発表予定である。
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